罗浩明

【摘 要】目的 探讨邵阳地区女性中高危型和低危型人乳头状瘤病毒的感染状况及其主要型别的分布特点。方法 利用PCR-反向点杂交法对2013年3月至2015年3月来本院就诊的4745例女性患者样本进行19种HPV基因亚型检测，分别为16种中、高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304）和3种低危型HPV（6、11、43型），并对其检测结果进行分析。结果 4745例中阳性1074例，HPV 检出率为22.6%，单型感染者935例，占87.1%；多重感染者139例，占12.9%，共检出1222株HPV亚型。其中中高危型以HPV16最多见，占所有HPV感染者的16.61%，其次为52、58型，分别占16.53%和14.57%。低危型以6、11、43型多见，分别占感染者的3.85%、2.86%和3.85%。结论 邵阳地区女性HPV感染以中高危型、单型感染为主，其分布依次是HPV16、52、58型，21-50岁各年龄段HPV感染率基本相同，≤20岁年龄段的HPV阳性感染率和低危亚型的阳性率明显高于其它各年龄段。

【关键词】人乳头状瘤病毒；宫颈癌；基因分型；单型感染；年龄

近年来，宫颈癌的发生率呈上升趋势，是女性第二大恶性肿瘤，有数据显示，宫颈癌占所有女性恶性肿瘤的25%[1]，世界范围内发病率和死亡率仅次于乳腺癌，分别为15.2/10万和7.8/10万 [2]。研究已证实，人乳头瘤病毒（HPV）是宫颈癌和宫颈上皮内瘤变的致病因素之一，尤其是感染高危型HPV更容易导致宫颈癌前病变，而宫颈癌的癌前病变期可逆[3]，因此，HPV感染并对其准确分型，进行早期干预治疗对挽救患者性命具有重要的意义。在不同国家和地区，HPV感染率及亚型分布存在一定差异。本文对邵阳地区女性HPV的感染状况及其型别分布特点进行分析，为临床提高宫颈病变的准确诊断并制定相关干预措施提供科学依据。

1.资料与方法

1.1 样本来源

选择2013年3月至2015年3月在本院妇科就诊的4745例女性患者，年龄范围17-82岁。HPV杂交分型的样本均为宫颈脱落细胞。标本采集步骤和要求按宫颈脱落细胞学取材常规进行，标本放置专用采集管内，立即用于检测或保存于-20℃，3天内完成检测。

1.2 仪器与试剂

基因扩增仪为ABI-7300实时荧光定量PCR系统，凯普医用核酸分子快速杂交仪，试剂为中山大学达安基因股份有限公司提供的HPV基因分型检测试剂盒（PCR-反向点杂交法），规格为单管单人份，10人份/盒。

1.3 实验方法

标本的处理，HPV DNA 提取、HPV PCR扩增、核酸分子快速杂交，显色分型等操作步骤及结果判读均按试剂盒要求进行，能同时检测19种亚型，其中16种中、高危亚型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304）和3种低危亚型HPV（6、11、43型）。

1.4 统计学处理

采用SPSS13.0软件包进行统计分析。率的比较采用χ2 检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 HPV亚型分布情况

对4745例女性患者样本进行HPV分型检测，结果显示：1074例阳性，阳性率为22.6%，其中单型感染者935例，占87.1%；多重感染者139例，占12.9%。共检出1222株HPV亚型，高危型1093株，占89.4%；低危型129株，占10.6%。其中HPV16型检出率最高，占所有HPV感染亚型的16.61%，其次为52、58型，分别占16.53%和14.57%。低危型6、11、43型分别占感染亚型的3.85%、2.86%和3.85%。各型分布特点，见表1.

表1 HPV感染各亚型的分布情况

类别 基因型 单型感染例数 百分率（%） 多重感染例数 百分率（%） 合计 百分率（%）

中高

危型 16型 184 19.68 19 6.62 203 16.61

18型 36 3.85 7 2.44 43 3.52

31型 27 2.89 10 3.48 37 3.03

33型 49 5.24 6 2.09 55 4.50

35型 7 0.75 1 0.35 8 0.65

39型 5 0.53 16 5.57 21 1.72

45型 7 0.75 1 0.35 8 0.65

51型 31 3.32 9 3.14 40 3.27

52型 162 17.33 40 13.94 202 16.53

53型 81 8.66 25 8.71 106 8.67

56型 9 0.96 6 2.09 15 1.23

58型 149 15.94 29 10.10 178 14.57

59型 20 2.14 2 0.70 22 1.80

66型 26 2.78 14 4.88 40 3.27

68型 38 4.06 23 8.01 61 4.99

CP8304型 34 3.64 20 6.97 54 4.42

低危型 6型 11 1.18 36 12.54 47 3.85

11型 26 2.78 9 3.14 35 2.86

43型 33 3.53 14 4.88 47 3.85

合計 935 100.00 287 100.00 1222 100.00

2.2 不同年龄段感染HPV的分布情况

21-50岁各年龄段HPV感染率基本相同，≤20岁年龄组HPV感染阳性率达35.4%，低危型感染率为40.9%，明显高于其它各年龄组，见表2.

表2 不同年龄段HPV感染各亚型的分布情况

年龄段（岁） 检测例数 感染例数 单型感染例数 多重感染例数 HPV亚型例数 中高危HPV感染例数 低危HPV感染例数

≤20 48 17（35.4%） 13（76.5%） 4（23.5%） 22 13（59.1%） 9（40.9%）

21～30 913 212（23.2%） 187（88.2%） 25（11.8%） 235 179（76.2%） 56（23.8%）

31～40 1649 355（21.5%） 301（84.8%） 54（15.2%） 402 373（92.8%） 29（7.2%）

41～50 1574 368（23.4%） 322（87.5%） 46（12.5%） 421 400（95.0%） 21（5.0%）

51～60 446 95（21.3%） 87（91.6%） 8（8.4%） 108 98（90.7%） 10（9.3%）

≥61 115 27（22.6%） 25（92.6%） 2（7.4%） 34 30（88.2%） 4（11.8%）

合計 4745 1074（22.6%） 935（87.1%） 139（12.9%） 1222 1093（89.4%） 129（10.6%）

3.讨论

人乳头状瘤病毒（HPV）是一种可引起女性黏膜组织良性及恶性肿瘤的病毒，其中某些HPV的亚型是宫颈癌的病原体[3]。依据不同型HPV与癌症发生的危险高低分为低危型和高危型，而高危型HPV感染与宫颈高度鳞状上皮内瘤变和宫颈浸润之间有着密切的相关性[4]。有研究报道，HPV亚型感染率具有较大的地域差异，亚州国家感染率最常见的是HPV52型和HPV58型。中国女性最常见的HPV亚型感染频率前五位的分别是HPV16、18、52、58、31型[5]。HPV感染率及亚型分布差异可能与种族、遗传等因素有关。本研究共筛查了4745例女性，1074例阳性，阳性率为22.6%，其中单型感染者935例，占87.1%；多重感染者139例，占12.9%。一共检出1222株HPV亚型。高危型感染为1093株，占89.3%。其中HPV16型检出率最高，占所有HPV感染者的16.61%，并以单型感染为主。其次为52、58型，分别占16.53%和14.57%。低危亚型以6、11、43型多见，分别占感染者的3.85%、2.86%和3.85%，单一型感染占约88.7%，大于或等于两重感染占约11.3%比例。研究显示：本地区女性患者HPV感染以HPV16、52、58型为主，与无锡地区、湘潭地区等的报道一致，与重庆地区HPV16、58、52有所区别[6-7]。

有文章报道，年龄是宫颈癌和HPV感染的相关因素，HPV感染率的高低取决于人群的年龄和性行为[2]。本次调查发现，各年龄段HPV感染阳性率不同，≤20岁年龄组HPV感染阳性率达35.4%，其它各年龄组：21～30岁组、31～40岁组、41～50岁组、51～60岁组及≥61岁组HPV感染阳性率分别为23.2%、21.5%、23.4%、21.3%、22.6%。≤20岁年龄组HPV感染阳性率和低危亚型的阳性率与其它各年段比较，显著高于其它各年龄组的HPV感染阳性率，差异有统计学意义（P<0.05），≥21岁的各年龄段HPV感染阳性率相互比较，差异无统计学意义（（P>0.05）。因此，女性HPV感染有年轻化和低龄化的趋势。从表2中还可以发现，51～60岁组及≥61岁组HPV多重感染阳性率仅为8.4%，7.4%，低于其它各年龄段，说明随着年龄的增长HPV亚型多重感染率逐步降低，具体原因是否与样本来源有关，还是其它因素尚待进一步研究。

综上所述，本研究结果有助于了解邵阳地区女性中高危型和低危型人乳头状瘤病毒的感染状况及其主要型别的分布特点，对临床提高宫颈病变的准确诊断具有重要的指导意义。因此加强对女性HPV亚型的检测，能够有效筛查出HPV高危感染人群，可以达到女性宫颈疾病早发现、早治疗的目的，同时对筛查宫颈癌和宫颈癌手术后随访亦具有重要的临床价值。

参考文献：

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[3] Hausen H.：Papilloma viruses in the causation of human cancers a brief historical account [J].Virology，2009，384（2）：260–265

[4] 冯程娟，苏东梅，刘丽娥，等.人乳头状瘤病毒HPV感染的临床实验结果分析[J]；国际检验医学杂志；2015，36（7）：903-905.

[5] 李春龙，廖洪，杨瑛，等.HPV分型及其高危亚型与宫颈病变的相关性分析[J]；检验医学与临床；2015，12（8）：1109-111.

[6] 许泼实，赵静，陈光辉.导流杂交技术检测中原地区女性人乳头瘤病毒感染情况[J]；检验医学[J]；检验医学与临床；2012，27（12）：1040-1042.

[7] 王红旗，郭远瑜，汪敏，等.6868例妇科门诊病人HPV感染状况及基因型分析[J]；中国卫生检验杂志，2010，20（5）：1204-1206