段卫华，于佳慧，高秀梅（天津中医药大学，天津300193）

·中药研究·

不同配比杜仲丸对SAMP6小鼠抗抑郁作用的研究*

段卫华，于佳慧，高秀梅
（天津中医药大学，天津300193）

［目的］研究不同配比杜仲丸的抗抑郁作用。［方法］采用3月龄快速老化SAMP6小鼠及其同源正常对照SAMR1为研究对象，应用杜仲丸、杜仲和续断进行治疗12周。末次灌胃给药1 h后，采用小鼠旷场实验（OFT）、小鼠悬尾实验（TST）、小鼠强迫游泳实验（FST）研究不同配比的杜仲丸的抗抑郁作用。［结果］在FST和TST中，杜仲丸低剂量组能显著降低小鼠不动时间（P＜0．05或P＜0．01）。［结论］杜仲丸具有一定的抗抑郁作用。

杜仲丸；抑郁症；强迫游泳实验；悬尾实验；SAMP6小鼠

DOI：10.11656/j.issn.1673-9043.2015.01.11

抑郁症是一种常见的精神疾患，以显著持久的情感抑郁或心境改变为主要特征，以情绪运动抑制、思维迟缓，常伴有注意力降低、记忆力减退等为主要临床表现，甚至会出现自伤或自杀行为。随着社会的快速发展，社会竞争日益加剧，工作生活压力不断增大，抑郁症的发病率逐年增高，成为严重危害公众健康的社会问题。中医药治疗抑郁症疗效肯定，不良反应较小，具有一定的优势。

杜仲丸始载于宋代陈自明撰写的《校注妇人良方》，由杜仲、续断各等分组成，具有补肾作用，是中医临床常用的补肾对药。本文基于中医“肾主生髓”的传统理论，研究杜仲丸组成药物杜仲、续断不同配伍比例对快速老化小鼠SAMP6出现的抑郁行为的影响。

1　材料

1.1动物SPF级3月龄SAMP6小鼠，正常同源对照SAMR1小鼠，雌雄各半，购自天津中医药大学第一附属医院实验动物中心SAM鼠繁育屏障系统，合格证号：实验动物（饲）字0004590。饲养环境终年维持室温（23±2）℃，相对湿度55%～60%，换风16次/h，12 h光照/12 h黑暗自动控制循环光照。

1.2药品杜仲、续断购自安国市顺全隆中药材有限公司，经天津中医药大学药学院中药鉴定教研室张丽娟教授鉴定。杜仲、续断生药分别以10倍量70%乙醇回流提取2次，每次2 h，合并2次提取液浓缩，真空干燥得提取物。按照杜仲、续断生药量1∶1比例，按上述工艺制备杜仲丸提取物。

2　方法

2.1动物分组与给药清洁级3月龄快速老化骨质疏松模型小鼠SAMP6 50只，正常同源对照小鼠SAMR1 10只，雌雄各半。SAMP6小鼠按随机数字表法随机分为SAMP6组、杜仲丸高剂量组（生药6g/kg，即杜仲、续断生药各用3 g/kg）、杜仲丸低剂量组（生药3 g/kg，即杜仲、续断生药各用1.5 g/kg）、杜仲组（即只用杜仲生药3 g/kg）、续断组（即只用续断生药3 g/kg），SAMR1组和SAMP6组分别灌服蒸馏水，灌胃给药12周。每周称量1次体质量，根据体质量调整给药量。于末次给药1 h后，进行行为学测试。

2.2小鼠旷场实验（OFT）末次给药1 h后，将单只小鼠放入箱内底面中心，同时进行摄像和计数。观察4 min，两位观察者记录小鼠穿格数和直立的次数，取平均值。每只鼠完成实验后须彻底清洗方箱内壁及底面，以免上一只鼠遗留的信息干扰下次测试结果。

2.3小鼠悬尾实验（TST）将单只小鼠在距尾尖约2 cm处用胶带固定尾部，将其倒挂于箱中，注意避免形成机械性损伤。动物行为视频分析系统记录6 min小鼠行为，计后4 min内小鼠悬尾不动时间（不动判断标准为小鼠停止挣扎，静止不动，身体呈倒垂状态）。

2.4小鼠强迫游泳实验（FST）将单只小鼠放入水深约10 cm，水温（24±2）℃的烧杯中。动物行为视频分析系统记录6 min小鼠游泳行为，计录后4 min内小鼠游泳的不动时间（不动判断标准为小鼠停止挣扎，漂浮在水中，仅有微小的肢体活动保持漂浮在水面）。

2.5统计学处理采用SPSS 18.0软件，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，符合正态分布计量资料组间比较采用单因素方差分析，符合偏态分布计量资料组间比较采用秩和检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

3　实验结果

3.1小鼠强迫游泳实验实验结果表明，和SAMR1组小鼠相比，SAMP6组小鼠强迫游泳的不动时间显著延长（P＜0.05）；与SAMP6组比较，杜仲丸低剂量组SAMP6小鼠的强迫游泳不动时间显著降低（P＜0.05）。见表1。

3.2小鼠悬尾实验实验结果表明，和SAMR1组小鼠相比，SAMP6组小鼠悬尾实验的不动时间显著延长（P＜0.01）；和SAMP6组比，杜仲丸低剂量组和杜仲组SAMP6小鼠的悬尾实验不动时间显著降低（P＜0.01，P＜0.05）。见表1。

3.3小鼠旷场实验见表2。小鼠旷场实验的结果显示，杜仲丸及其组成药物对SAMP6小鼠自主活动能力未见影响。

表1　杜仲丸对SAMP6小鼠强迫游泳、悬尾实验不动时间的影响（x±s）s

表2　杜仲丸对SAMP6小鼠旷场实验的影响（x±s）

4　讨论

抑郁症的机制复杂，涉及单胺类神经递质及其受体、神经内分泌、细胞分子等多种假说［1］。抑郁属中医学中“郁证”、“脏躁”、“百合病”、“癫狂”、“失眠”、“健忘”等多病证范畴。中医辨证常分为肝郁脾虚、肝郁气滞、肾阳不足、阴阳两虚等多种证型，其中肝郁气滞证的患者平均年龄最小而肾阳不足证患者平均年龄最大，且具差异性［2］。可见肾阳虚是抑郁症常见证型之一，特别是老年抑郁症发病的重要病机，甚至有学者认为是核心病机［3-5］。《千金翼方》云：“人年五十以上，阳气日衰，损与日至，心力渐退……万事冷落，心无聊赖，健忘嗔怒，性情变异。”明确指出老年阳虚是产生消极、悲观情绪的原因之一，阳主升动，而抑郁症的临床表现多属阳气不足导致的升动无力的表现。肾中藏一身之元阳，主生髓，虚则致髓海不足，元神失养，不能振奋精神而发病。《类证制裁》指出：“肾之精华上升于脑，精能生气，气能生神，神定气清。”

补虚药、安神药等是中医治疗抑郁症的常用药物，其中补虚药使用频率最高［6］，通过增加单胺类神经递质水平、对抗谷氨酸作用、保护神经元等多途径发挥抗抑郁、镇静作用［7-10］。杜仲、续断是中医临床常用的补肾阳药物。杜仲主要含有木脂素类、苯丙素类、环烯醚萜类、黄酮类、多糖等，具有降血压、抗骨质疏松、抗氧化、神经保护、镇静等药理作用［11-12］。续断中主要含有三萜及其苷类化合物、环烯醚萜苷类化合物、生物碱类化合物和挥发油类等化学成分［13］，具有抗骨质疏松、抗氧化、神经保护、提高实验动物学习记忆能力等作用［14-16］。

抑郁症动物模型研究也较多，动物模型建立主要包括改变生物学因素、社会心理因素及基因型等多种方法［17］，而SAMP6小鼠为自发的快速老化骨质疏松模型。有学者对SAMP6小鼠行为学方面进行研究发现，SAMP6小鼠具有自发活动增强、焦虑、抑郁等行为改变［18-19］。本实验中SAMP6小鼠强迫游泳和悬尾实验中不动时间均显著高于正常老化鼠SAMR1组，杜仲丸可以显著降低SAMP6小鼠强迫游泳和小鼠悬尾实验的不动时间，具有抗抑郁作用，而单味使用的杜仲、续断抗抑郁效果不明显。本研究为进一步研究杜仲丸的配伍及抗抑郁机制奠定了实验基础。

［1］李苒，高杉，李琳，等.抑郁症发病机制的研究进展［J］.天津中医药，2013，30（2）：121-125.

［2］郑开梅，武成，薛蕾，等.抑郁症中医证候学临床流行病学调查［J］.天津中医药大学学报，2006，25（3）：170-171.

［3］鱼浚镛，田金洲.基于中医文献的抑郁症常见证候及证候要素分布特点的研究［J］.天津中医药，2012，29（3）：299-301.

［4］雷菊英，刘菊妍.浅谈抑郁症从肾论治［J］.四川中医，2007，25（8）：26-27．

［5］江泳，江瑞云，陈建杉.论肾阳虚与抑郁症发病的关联性［J］.四川中医，2009，27（8）：30-31.

［6］熊洪艳，秦竹，徐薇，等.抑郁症现代治疗方剂用药特点浅析［J］.云南中医学院学报，2008，31（6）：6-9.

［7］张敏，于春泉.交泰丸抗抑郁作用的研究进展［J］.天津中医药，2012，29（1）：101-104.

［8］孙亚男，邹忆怀，朱陵群.宁心解郁胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠Open-Field行为的影响［J］.天津中医药，2014，31（1）：42-46.

［9］赵启铎，舒乐新，王颖，等.酸枣仁总黄酮抗抑郁作用的实验研究［J］.天津中医药，2011，28（4）：335-337.

［10］吕玲玲，沈小珩，陈敬贤.中医药治疗抑郁症动物实验研究进展［J］.辽宁中医药大学学报，2012，14（6）：75-77.

［11］杜红岩.杜仲活性成分与药理研究的新进展［J］.经济研究，2003，21（2）：58-61.

［12］吕锦芳，邢丽，宁康健.杜仲对小鼠中枢镇静作用的影响［J］.中国中医药科技，2004，11（5）：294-296.

［13］吴帅，刘二伟，张祎，等.川续断中化学成分的研究［J］.天津中医药大学学报，2010，29（3）：147-150.

［14］Niu Y，Li Y，Huang H，et al.Asperosaponin VI，a saponin component from Dipsacus asper wall，induces osteoblast differentiation through bone morphogenetic protein-2/p38 and extracellular signal-regulated kinase 1/2 pathway［J］. Phytother Res，2011，25（11）：1700-1706.

［15］何雪心，裘军.续断提取物对小鼠D-半乳糖拟痴呆模型的抗氧化作用［J］.中国药师，2005，8（3）：185-187.

［16］鄢嘉，曾超，吴云霞，等.续断总皂苷对阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力的改善作用［J］.武汉大学学报：医学版，2010，31（3）：324-326.

［17］高杉，李苒.抑郁症动物模型及其评价标准研究进展［J］.天津中医药大学学报，2012，31（1）：57-60.

［18］Niimi K，Takahashi E，Itakura C.Emotional behavior and expression patterns of tyrosine hydroxylase and tryptophan hydroxylase in senescence-accelerated mouse（SAM）P6 mice［J］.Behavioural Brain Research，2008，188（2）：329-336.

［19］Niimi K，Takahashi E，Itakura C.Analysis of motor function and dopamine systems of SAMP6 mouse［J］.Physiol Behav，2009，96（3）：464-469.

Study on the antidepressant effect of Duzhongwan with different proportions

DUAN Wei-hua，YU Jia-hui，GAO Xiu-mei
（Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China）

［Objective］To study the antidepressant effect of Duzhongwan with different proportions．［Methods］Three months old SAMP6 mice and their normal control mice SAMR1 were enrolled in this study.The SAMP6 mice were treated with high and low dose of Duzhongwan，respectively，contrasting with Duzhong and Xuduan during 12 weeks.At 1h after the administration（ig），the open field test（OFT），the tail suspension test（TST）and the forced swimming test（FST）were used to observe the antidepressant effect of Duzhongwan with different proportions．［Results］The immobility time of SAMP6 mice in Duzhongwan low dose group could significantly reduce in FST and TST，compared with those in the control group（P＜0.05 or P＜0.01）.［Conclusion］The results suggested that Duzhongwan performed antidepressant effect.

Duzhongwan；depression；forced swimming test；tail suspension test；SAMP6 mice

R285.5

A

1673－9043（2015）01－0034-03

国家科技重大专项“孵化基地”项目（2013ZX094 01004）；天津市中医药管理局中医中西医结合科研项目（13109）。

段卫华（1973-），博士，讲师，主要从事中药药理研究。

高秀梅，E-mail：yanjiuyuanbangongshi@gmail.com。

（2014-08-24）