余晓明，袁雪凌，孟昊业，孙 振，尹合勇，郭全义，彭 江，汪爱媛，卢世璧解放军总医院 骨科研究所，北京 00853；南开大学，天津 30007

骨性关节炎(osteoarthritis，OA)是一种临床上常见的退行性疾病，主要表现为关节软骨及软骨下骨的退行性改变、关节疼痛、活动困难、骨赘形成等症状，好发于中老年人[1-2]。MicroRNAs(miRNAs，miR)是一个庞大的内源性、非编码核苷酸序列家族，长度21 ~ 25个核苷酸，主要在转录后信使RNA的功能上调控基因的表达[3-5]。近年来，越来越多的miRNAs被证明在骨科疾病中起着重要作用[6]。而miRNA-214被证明在骨质疏松的骨重塑过程中对破骨细胞的功能有调控作用[7]。为进一步研究miR-214的功能，本实验旨在探究其在骨关节炎发展进程中的表达情况，以便了解miR-214作为骨性关节炎治疗靶向标记物的潜在价值。

材料和方法

1 实验标本 实验用原发性膝关节骨性关节炎患者及截肢患者胫骨平台标本，由本院关节外科行人工全膝关节置换术治疗的30例OA患者及严重创伤需行截肢手术治疗的10例患者自愿捐赠。均排除肿瘤、类风湿关节炎、感染及激素治疗等因素。其中男性23例，女性17例，年龄31 ~ 82岁。患者术前均行双膝关节负重位X线检查，后依据Kellgren-Lawrence X线诊断标准将其分为Ⅰ级组(10例)、Ⅱ级组(10例)、Ⅲ级组(10例)、Ⅳ级组(10例)，进行实验检测。

2 RNA提取 将收集的胫骨平台分离软骨和软骨下骨，用陶瓷研钵分别将其在液氮下研碎。将分离的软骨及软骨下骨100 mg分别装入1.5 ml EP管中，用TRIzol提取组织中的RNA，样本经裂解、分层、RNA沉淀、洗涤和溶解后，使用分光光度计测定RNA浓度和纯度，确保后续试验准确度。……