汪 燕，艾彩霞，祝一鸣，吴奉奇，单体江，王 军*（. 广东省肇庆市国有北岭山林场，广东 肇庆 5600；. 华南农业大学 林学院，广东 广州 5064）

降香黄檀炭疽病的化学防治研究

汪 燕1，艾彩霞2，祝一鸣2，吴奉奇2，单体江2，王 军2*
（1. 广东省肇庆市国有北岭山林场，广东 肇庆 516200；2. 华南农业大学 林学院，广东 广州 510642）

通过室内测定15 种杀菌剂对降香黄檀炭疽病菌的毒力，选出 5种效果较好的药剂，即多菌灵、咪鲜∙戊唑醇、恶醚∙咪鲜胺、苯醚∙甲环锉和根太阳，5种药剂在稀释500倍时，对菌丝生长抑制效果均是100%，对孢子萌发抑制率接近或达到 100%。将此 5 种杀菌剂对降香黄檀进行保护和治疗试验，发现所有杀菌剂的保护效果均在 50%以上，500 倍的恶醚咪鲜胺和咪鲜戊唑醇对降香黄檀治疗效果最好，分别是 87.59%和 83.10%。进一步选取恶醚咪鲜胺和咪鲜戊唑醇进行田间防治试验，500倍液的咪鲜戊唑醇防治效果较好，达到79.28%。

降香黄檀；炭疽病；化学防治

汪燕， 艾彩霞， 祝一鸣， 等. 降香黄檀炭疽病的化学防治研究［J］. 生物灾害科学， 2015， 38（4）:306-311.

降香黄檀（Dalbergia odorifera T.Chen）是一种经济价值极高的红木树种，近年来在广东等地的栽培逐渐增多。但随着栽培面积的扩大，病虫害的发生也随之而来，尤其是炭疽病［1］，已经严重影响到幼树的生长，成为这一珍贵树种发展的重要障碍。虽然一些树木炭疽病的防治已有不少研究，如李春平［2］采用退菌特、甲基托布津等杀菌剂对油茶炭疽病有较好的防治效果；阮宏椿等［3］测定了 5 种杀菌剂对枇杷炭疽病菌的室内毒力，结果表明 25%咪鲜胺及 10%世高可分散粒剂等抑菌效果较好；王兰英等［4］发现百菌清、异 菌脲等对橡胶炭疽病菌孢子萌发起抑制作用；周 小燕［5］在对柑橘炭疽病的田间防治中，证 明 10%苯醚甲环唑及 25%咪酰胺表现出优良的防治效果。然而由于降香黄檀炭疽病是一种新病害，目前还没有其有关防治方面的研究报道。因此，对其进行化学防治试验，筛选有效的控制药剂及施用方法就显得很有必要。本 研究选用市场上常用的 10 余种杀菌剂，对 其进行针对降香黄檀炭疽病的室内毒力测定及室内和田间防治试验，以期对炭疽病的化学防治提供可行的用药参考。

1　材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试杀菌剂 苯醚甲环锉，10%水分散粒剂，瑞士先正达作物保护有限公司；菌毒清∙三十烷醇，6%可湿性粉剂，山东省泰安市宝丰农药厂；恶醚咪鲜胺，70%可湿性粉剂，南通江山农药化工股份有限公司；肟菌∙戊唑醇，75%水分散粒剂，拜耳作物科学公司；根太阳（花卉炭疽病专用），微乳剂，珠海真绿色技术有限公司；霉克，内吸性杀菌剂，广州市金农科技开发有限公司；苯甲嘧菌酯，悬浮剂，瑞士先正达作物保护有限公司；嘧菌酯，悬浮剂，英国先正达有限公司；多锰锌，50%可湿性粉剂，北京恒瑞生物科技有限公司；三氯异氰尿酸（克菌净），42%可湿性粉剂，湖南省海洋生物工程有限公司；多菌灵，80%可湿性粉剂，山东曹达化工有限公司；代森锰锌，80%可湿性粉剂，印度印地菲尔化学公司；根太阳（咪鲜戊唑醇），50%微乳剂，广东植物龙生物科技有限公司；多抗毒素，1%水剂，陕西绿盾生物制品有限公司。

1.1.2 供试植物 降香黄檀植株，分别栽种于华南农业大学校园和肇庆北岭山林场铁西工区。

1.1.3 供试病菌 炭疽菌菌株从北岭山林场铁西工区降香黄檀发病叶片上采集，经 分离纯化并鉴定保存。

1.2 试验方法

1.2.1 杀菌剂对菌丝生长抑制的测定 采用含毒平皿生长速率法。将 供试杀菌剂稀释配成500倍液、1 000倍液和 1 500倍液 3个浓度，对照组以无菌水代替药液。用直径为 6 mm的灭菌打孔器在 PDA平板上打取培养 6 d的炭疽病菌饼，将菌饼接种到含药的培养基平板中央，置于 28 ℃恒温培养箱中培养。9 d后，用十字交叉法测量菌落的直径，并计算供试杀菌剂对降香黄檀炭疽病病菌的相对抑制率：

1.2.2 杀菌剂对孢子萌发抑制的测定 将供试杀菌剂稀释配成 50倍液、100 倍液和150 倍液3 个浓度。用无菌水洗脱 PDA培养基上分生孢子，制成浓度为 100 个/视野（显微镜 10×10 倍）的孢子悬浮液备用。取若干个大培养皿并在培养皿中放入两张湿滤纸，做好相应的标记，备用。

用 1 000 μL（1 mL）移液枪将配置好的药液取 1 mL与其对应标记的空无菌培养皿中，再取 9 mL已配置好的孢子悬浮液，充分混合后，用移液枪取一滴于凹玻片凹槽中，对照组用无菌水代替药液，每个处理重复 3 次。然后将凹玻片放入大培养皿中，于 25 ℃下恒温保湿培养。24 h后在显微镜下检查孢子萌发数，每个玻片检查 100 个孢子，计算孢子萌发率及药剂对孢子萌发的抑制率：

1.2.3 杀菌剂保护作用的测定 用无菌水将以上筛选出的药剂稀释配置成500 倍液、1 000 倍液、1 500倍液 3 个浓度的药液，然后在已灭菌的每个培养皿中放入两张滤纸，并用无菌水浸湿滤纸，每个培养皿做好标记。取若干营养状态相同的降香黄檀叶片放入上述准备好的培养皿中，喷施相对应的药液，喷药量为以药液微流为止，对照组以无菌水代替药液，每个处理 6 个重复。之后放入恒温培养箱中保湿培养。3 d后针刺处理所有叶片，用直径为 6 mm的灭菌打孔器在 PDA平板上打取培养 6 d的炭疽病菌饼，在每片叶片的刺伤部位接种菌丝块，置于恒温培养箱中保湿培养。9 d后用网格坐标纸测量叶片病斑面积，并按以下公式计算杀菌剂的防治效果：

1.2.4 杀菌剂治疗作用的测定 先将培养皿，滤纸，载玻片高压灭菌，然后在已灭菌的每个培养皿中放入两张滤纸，并用无菌水浸湿滤纸，每个培养皿做好标记。取若干营养状态相同的降香黄檀叶片针刺接种，置于恒温培养箱中保湿培养。3 d后，用无菌水将以上筛选出的药剂稀释配置成 500 倍液、1 000倍液、1 500 倍液 3个浓度，对供试叶片进行相对应的药剂喷施，对照组以无菌水代替药液，每个处理重复6 次。将所有培养皿放入恒温培养箱中，接种 9 d后测量叶斑面积，并且计算防治效果。

1.2.5 杀菌剂的田间防治试验 田间防治设 7 个处理：（ 1）70%恶醚咪鲜胺WP 500 倍；（2）70%恶醚咪鲜胺 WP 1 000倍；（3）70%恶醚咪鲜胺 WP 1 500倍；（4）50%咪鲜戊唑醇 SC 500 倍；（5）50%咪鲜戊唑醇 SC 1 000 倍；（6）50%咪鲜戊唑醇 SC 1 500 倍；（7）清水对照。每处理 2 株降香黄檀树，任选5个枝梢挂牌，重复 5次，随机排列。选择在无降雨日喷药，连喷3 次，每次间隔 7 d。分别在喷药前、第3 次喷药后 7 d按分级法分别调查植株的病害发生情况，计算病情指数（DI）［6］。

1.2.6 数据处理 用DPS 软件对数据进行统计分析，并用 Duncan’最小显著差异法比较差异显著性。

2　结果与分析

2.1 杀菌剂对菌丝的抑制效果

当杀菌剂浓度稀释为 500 倍时，多菌灵、咪鲜戊唑醇、恶醚咪鲜胺、苯醚甲环锉、根太阳 5种杀菌剂对菌丝的生长抑制效果均为100%，抑制效果最好。而嘧菌酯、苯甲∙嘧菌酯等 10 种杀菌剂对菌丝的抑制效果在 30%～90%，其中多锰锌抑制效果最差，抑制率仅为 33.10%。

当杀菌剂浓度稀释为 1 000 倍时，多菌灵、咪鲜戊唑醇等 5 种杀菌剂对降香黄檀炭疽菌菌丝的生长抑制效果差异不显著，抑制效果最好，其中多菌灵、咪鲜戊唑醇、恶醚咪鲜胺抑制效果为 100%，苯醚甲环锉、根太阳（花卉炭疽病专用）抑制效果为98.29%和 97.53%，嘧菌酯抑制效果为 77.29%，显著高于苯甲∙嘧菌酯、菌毒清∙三十烷醇等 9 种杀菌剂，霉克和多锰锌的抑制效果最差，仅为 32.22%和 21.48%。

当杀菌剂浓度稀释为 1 500 倍时，多菌灵、咪鲜戊唑醇等 5 种杀菌剂对降香黄檀炭疽菌菌丝的生长抑制效果均在 91%以上，嘧菌酯、苯甲∙嘧菌酯、肟菌∙戊唑醇的抑制效果在45%～66%，菌毒清∙三十烷醇、代森锰锌、多抗霉素的抑制效果为 41.78%、39.02%和 38.14%，松脂酸铜等 4 种杀菌剂对菌丝的抑制效果在 14%～33%，其中多锰锌抑制效果最差，为 14.79% （表1）。

表1　15种杀菌剂对降香黄檀炭疽菌菌丝生长的抑制

上述结果显示多菌灵、咪鲜戊唑醇、苯醚甲环锉、恶醚咪鲜胺、根太阳对降香黄檀炭疽菌菌丝的生长抑制效果较好。

2.2 杀菌剂对孢子萌发的抑制效果

当杀菌剂浓度稀释为 500 倍时，多菌灵、咪鲜戊唑醇、苯醚甲环锉对分生孢子萌发的抑制效果均为100%，恶醚咪鲜胺、根太阳、代森锰锌 3 种杀菌剂对分生孢子萌发的抑制效果分别是 99.61%、99.22% 和 90.23%，肟菌∙戊唑醇、松脂酸铜等 9 种杀菌剂对分生孢子萌发的抑制效果在 33%～78%，其中多锰锌的抑制效果最差，为33.20%。

当杀菌剂浓度稀释为 1 000 倍时，多菌灵、咪鲜戊唑醇等 5 种杀菌剂对分生孢子萌发的抑制效果均在 90%以上，代森锰锌等 10 种杀菌剂的抑制效果是 19%～83%。

当杀菌剂浓度稀释为 1 500 倍时，多菌灵、咪鲜戊唑醇、恶醚咪鲜胺对分生孢子萌发的抑制效果分别是 91.79%、91.4%和92.57%，苯醚甲环锉、根太阳的抑制效果是 80.86%和 85.15%，代森锰锌、肟菌∙戊唑醇等 9 种杀菌剂的抑制效果在 24%～72%，多锰锌的抑制效果最差，是12.89%（表 2）。

表2　15种杀菌剂对降香黄檀炭疽菌孢子萌发的抑制效果

上述结果显示多菌灵、咪鲜戊唑醇、苯醚甲环锉、恶醚咪鲜胺的抑制效果最好，根太阳抑制效果次之，抑制效果最差的是多锰锌。结合之前测试的对菌丝生长抑制效果的试验，筛选出多菌灵、咪鲜戊唑醇、苯醚甲环锉、恶醚咪鲜胺、根太阳5 种杀菌剂进行后续试验。

2.3 杀菌剂的保护作用

表 3 显示，施药 9 d以后，各杀菌剂不同浓度之间的保护效果差异显著，不同杀菌剂之间的保护效果有所不同，其中 500 倍液不同杀菌剂之间的保护效果差异不显著，1 000倍液、1 500 倍液不同杀菌剂之间的保护效果差异显著。恶醚咪鲜胺效果最好，咪鲜戊唑醇、苯醚甲环锉次之，根太阳效果最差。

表3　施用5种杀菌剂处理9d后对将香黄檀叶片的保护效果

2.4 杀菌剂的治疗作用

由表 4 可知，不同杀菌剂之间和不同浓度之间的治疗效果都达到极显著差异，其中治疗效果最好的为恶醚咪鲜胺和咪鲜戊唑醇，苯醚甲环锉、多菌灵次之，根太阳效果最差，与保护作用试验所得的结果相似，但治疗效果显著低于保护作用 9 d时的结果

表4　接种叶片施用苯醚甲环锉等5种杀菌剂9d后的治疗效果

综合以上试验结果，选取恶醚咪鲜胺，咪鲜戊唑醇 2种杀菌剂进行田间防治试验。

2.5 田间防治试验

两种杀菌剂对降香黄檀炭疽病的田间防治试验，结果见表 5。从表中可知，3 次喷药后，70%恶醚咪鲜胺 WP 500 倍稀释液、1 000 倍稀释液、1 500 倍稀释液的防治效果分别是 76.44%、58.88%、31.35%。50%咪鲜戊唑醇SC 500倍稀释液、 1 000倍稀释液、 1 500倍稀释液的防治效果是79.28%、 57.41%、 37.88%。其中 50%咪鲜戊唑醇 SC 500 倍稀释液防治效果较好。

表5　杀菌剂的田间防治试验效果

3　结论与讨论

采用 15 种杀菌剂对降香黄檀炭疽病室内毒力测定试验，结 果表明，不 同药剂或同一药剂不同浓度对病原菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制效果均有一定的差异，其中多菌灵、咪鲜戊唑醇、恶醚咪鲜胺、苯醚甲环锉、根太阳的抑菌效果最好。由此筛选出的5 种杀菌剂进行离体叶片防治试验结果表明，在治疗试验中，500 倍浓度咪鲜戊唑醇和恶醚咪鲜胺对降香黄檀炭疽病的治疗效果最好，治疗效果分别为83.1%和 87.59%，其余的治疗效果均低于 80%，在保护试验中，500 倍浓度的 5 种杀菌剂的保护效果均在 90%以上，显著高于治疗效果。这表明在炭疽病病害发生前对降香黄檀进行保护性喷药远比在得病后治疗容易，再一次验证了在实际林木病害防治中应采取“预防为主”的策略。

田间防治试验中，5 00 倍浓度的恶醚咪鲜胺和 500 倍浓度的咪鲜戊唑醇防效差异不大，效 果均在 75%以上。但这与离体器官防治试验中表现出的效果并不完全相同，即杀菌剂在相同试验浓度下对离体油茶的抑制效果均显著高于田间防治效果。这可能与田间环境条件的复杂和多样性有关。在实际田间应用过程中，为了避免单一使用可能存在的抗药性风险，可以于所选药剂进行交替使用。

［1］ 桑利伟， 刘爱勤， 孙世伟， 等. 海南降香黄檀炭疽病病原鉴定及防治［J］. 热带农业科学， 2009， 29（8）:23-25.

［2］ 李春平， 李清华， 钟伟. 油茶常见病害的发生与防治［J］. 安徽农业科， 2003， 31（6）:1061， 1079.

［3］ 阮宏椿， 陈福如， 杨秀娟， 等. 批把炭疽病菌生物学特性及杀菌剂室内毒力测定［J］. 福建农业学报， 2005， 31（6）:80-82.

［4］ 王兰英， 张宇， 郑肖兰. 8种杀菌剂对橡胶炭疽菌的抑制活性［J］. 农药， 2010， 49（3）: 201-210，217.

［5］ 周小燕， 姜于兰. 不同杀菌剂对柑橘炭疽病的田间防治效果［J］. 湖北农业科学， 2011， 50（15）: 3080-3082.

［6］ 方中达. 植病研究方法［M］. 北京: 农业出版社， 1998:343-344.

［7］ 张利平， 陈国庆， 蒲占湑， 等. 18%苯醚甲∙拌SC防治柑橘炭疽病田间药效试验［J］. 浙江柑橘， 2008， 35（3）:34.

Chemical Control of Anthracnose of Dalbergia odorifera

WANG Yan1，AI Cai-xia2， ZHU Yi-ming2， WU Feng-qi2，SHAN Ti-jiang2，WANG Jun2*
（1. Beilingshan Forestry Plantation of Zhaoqing， Zhaoqing 516200， China； 2. College of Forestry， South China Agricultural University， Guangzhou 510642， China）

5 effective fungicides against anthracnose pathogen of Dalbergia odorifera were screened through laboratory toxicity tests from 15 chemicals. They are: Carbendazim， Tebuconazole， Prochloraz，Difenoconazole and Gntaiyang. When their concentrations were diluted 500 times， the inhibitory effects of all 5 fungicides on mycelial growth were 100%， and the inhibition rates on spore germination were almost 100%. These fungicides were then used in experiments of leaf protection and cure treatment against the pathogen. The results showed that the protective effects of all fungicides were more than 50%， of which 500 times Prochloraz and Tebuconazole achieved the better cure effect: 87.59% and 83.10%， respectively. Prochloraz and Tebuconazole were further applied in the field control experiment， and the results showed that 500 times of Tebuconazole achieved the best control effect: 79.28%.

Dalbergia odorifera；anthracnose； chemical control

S792.28；S763.7

A

2095-3704（2015）04-0306-06

2015-10-19

广东省林业科技创新项目（2015KJCH043）

汪燕，女，硕士，主要从事林业生产与科技项目管理工作，E-mail:wangyan_003@163.com；*通信作者：王军，教授，E-mail:wangjun@scau.edu.cn。