李佳楠等

摘要：探索分光光度法测定菜豆（Phaseolus vulgaris）植物凝集素活性的最佳测定条件，分析了56个菜豆品种的植物凝集素活性。结果表明，红细胞悬液浓度2×108个/mL，凝血10 min后测定OD416 nm，为菜豆植物凝集素的最佳测定条件。在该条件下，分析了56个菜豆品种中的植物凝集素活性浓度，旨在为分析菜豆植物凝集素的毒效提供参考。

关键词：菜豆（Phaseolus vulgaris）；植物凝集素；分光光度法；活性

中图分类号：S532 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）12-3005-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.12.053

Determination of the Activity of Lectin in Kidney Bean

LI Jia-nan，YANG Wei，YUAN Sha，CHEN Chan-you

（Department of Biotechnology， Life Science College， Jianghan University， Wuhan 430056， China）

Abstract： The optimal detecting lectin activity in Phaseolus vulgaris by spectrophotometry and 56 varieties were analyzed in this paper. The results showed that the suitable concentration of red blood cell was 2×108 cell/mL， and the best coagulation time was 10 min and detected at 416 nm. The lectin activity concentration of 56 varieties were determined under to the established conditions to provide a reference for the toxic effects analysis of lectin in Phaseolus vulgaris.

Key words： Phaseolus vulgaris； lectin； spectrophotometry； activity

菜豆（Phaseolus vulgaris）为豆科一年生草本植物，别名四季豆、芸豆、豆角，是常见食用蔬菜[1]，但其中的植物凝集素（PHA），胰蛋白酶抑制剂，皂甙和植酸等对人体均有一定的毒性作用，常常导致菜豆中毒事件[2-5]。植物凝集素是植物界中广泛存在的一类能够可逆结合到特异单糖或多糖上的蛋白质，其相对分子量为126～136 kDa，含有4个亚基，每个亚基都有1个与糖结合位点，能使红细胞产生凝集现象[6，7]。迄今为止，在已发现的1 000多种菜豆植物凝集素中，豆科植物凝集素有600多种[8]。

红细胞凝集法是目前应用最为广泛的植物凝集素检测方法[9]。该方法利用兔、羊、人等动物红细胞，配制成一定浓度的红细胞悬液，将凝集素溶液经过倍比稀释后加入等体积红细胞悬液，静置一段时间后，通过肉眼观察或比色测定活性[10-12]。但目前已报道的凝集素测定方法多为定性或半定量方法，难以定量分析凝集素浓度与血细胞凝集效应之间的关系。本试验采用分光光度法优化了菜豆植物凝集素标准品的活性测定条件，并测定了56个菜豆品种的植物凝集素活性浓度，为验证菜豆植物凝集素的毒效关系提供试验依据。……