高风兰，相淑芳，郑月慧，肖秋香，郑莉萍，吴 磊

(滨州市人民医院 1.肾内科； 2.产科， 山东 滨州 256600； 3.南昌大学 医学院 生殖研究室， 江西 南昌 330006)



研究论文

NO调节在小鼠生发泡期卵母细胞体外成熟中的作用

高风兰1，相淑芳2，郑月慧3*，肖秋香3，郑莉萍3，吴 磊3

(滨州市人民医院 1.肾内科； 2.产科， 山东 滨州 256600； 3.南昌大学 医学院 生殖研究室， 江西 南昌 330006)

目的观察不同浓度硝普钠(SNP)、左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)对小鼠生发泡(GV)期卵母细胞体外成熟的影响。方法给小鼠腹腔注射PMSG 8IU，取其双侧卵巢，用卵母细胞体外培养法，分为L-NAME组、SNP+dbcAMP+L-NAME组、P+dbcAMP+SNP+L-NAME组，在倒置生物显微镜下观察卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率及第一极体(PB1)排出率。结果SNP+dbcAMP组的GVBD率与PB1率分别为(52.5±0.4与32.5±0.1)显著高于dbcAMP组的(28.0±0.2与11.1±0.7)(P<0.05)。P+dbcAMP+SNP+L-NAME组的GVBD率与PB1率分别为(62.8±0.3与20±1.4)显著低于P+dbcAMP+SNP组的(90.1±1.3与66.6±0.9)，GVBD率与PB1率显著性降低(P<0.05)。 结论L-NAME与二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)抑制小鼠卵母细胞成熟时，小剂量NO呈现促进作用，这种促进作用在孕酮(P)存在时进一步加强。

一氧化氮;卵母细胞;L-NAME;dbcAMP;孕酮

一氧化氮(nitric oxide，NO)作为一种信使分子，生物作用广泛。在某些肾脏疾病中，NO作为一种强有力的致病因素，可引起急性炎性反应。那么同时，NO对生殖系统有何影响，近年来研究发现NO也参与卵泡发育、卵母细胞成熟、排卵等卵巢生理活动。鼠、猪、牛等哺乳动物的卵巢中都有NO合成酶的表达，提示NO参与卵巢的各种功能。目前认为NO对卵母细胞的成熟呈双向调节作用，小剂量NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)促进卵母细胞成熟，大剂量NO抑制卵母细胞成熟[1- 2]。本研究通过观察不同浓度NO与dbcAMP 或/和孕酮 共同作用下卵母细胞生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)率及第一极体(first polar body,PB1)排出率变化，来探究对其体外成熟的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂：孕马血清促性腺激素(PMSG)(天津市华孚高新生物技术公司)M199、SNP、左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)、dbcAMP、孕酮(Sigma公司)。……