张岩岩，胡亚萍，张雪梅，刘 欢，王 鹏，王钦富

（大连大学 生命科学与技术学院，辽宁 大连 116622）

猪肺脏巨噬细胞的分离培养

张岩岩，胡亚萍，张雪梅，刘 欢，王 鹏，王钦富*

（大连大学 生命科学与技术学院，辽宁 大连 116622）

提取分离猪肺泡巨噬细胞（PAM）、猪肺血管巨噬细胞（PIM）、猪肺间质巨噬细胞（IM）三种细胞并进行体外培养，采用免疫组化和流式细胞术进行细胞的异质性研究。无菌条件下通过支气管肺泡灌洗获取PAM，右心室插管经心脏行肺血管原位灌注的方法分离得到PIM，肺组织机械处理结合酶消化法(胶原酶IA)分离IM。显微镜下观察三种细胞的形态上的不同；免疫组化和流式细胞术检测细胞表型。三种巨噬细胞形态有明显的不同，PAM较大，表面粗糙，PIM和IM较小，并且细胞光滑；PAM细胞大多为CD163阳性，IM和PIM则CD86阳性较多。PAM、PIM、IM在形态和表型上存在异质性。

猪肺泡巨噬细胞；猪肺血管巨噬细胞；猪肺间质巨噬细胞

巨噬细胞是机体重要的免疫细胞之一，它可以识别并对侵入组织和血液中的病原体做出迅速反应，进一步激发炎症反应，激活体内免疫反应，最后清除病原体并维护内环境的稳态[1]。炎症是机体对体内外损伤性因素产生的病理生理性反应，适度的炎症反应对机体是有利的，有助于清除感染、异物、老化细胞等，但是过度或持续的炎症反应则会造成不同程度的组织损伤。有研究表明炎症与肥胖、肿瘤、感染（慢性感染）、糖尿病、代谢综合征、关节炎、动脉粥样硬化等多种疾病病理过程的发生和发展密切相关[2-4]。……