庞荣清，王强，石琳琳，杨建勇，何洁，朱向情，阮光萍，朱光旭，潘兴华

脐带间充质干细胞对体外外周血单核细胞的影响

庞荣清，王强，石琳琳，杨建勇，何洁，朱向情，阮光萍，朱光旭，潘兴华

目的观察脐带间充质干细胞(UC-MSC)对体外外周血单核细胞的影响。方法分离人UC-MSC和外周血单核细胞，流式分析技术鉴定单核细胞CD45和CD3的表达率；UC-MSC和单核细胞按不同比例共培养72 h，采用免疫荧光染色和ELISA方法检测γ干扰素(IFN-γ)在细胞内和培养上清的表达。结果采用含10%血清的DMEM/F12可以从新鲜脐带分离到UC-MSC，密度梯度离心法可以从外周血中分离到单核细胞，CD45阳性率为89.4%，CD3阳性率为80.7%。可在CD3/CD28刺激培养的单核细胞检测到IFN-γ的表达，1∶10和1∶20共培养上清IFN-γ的含量显著低于仅有单核细胞的对照组（P＜0.01）。结论UC-MSC的存在可以影响IFN-γ在单核细胞的表达，这种影响与两种细胞的比例有关。

脐带；间充质干细胞；单核细胞；共培养；γ干扰素；影响

间充质干细胞不表达MHC-Ⅱ、CD40和CD80等共刺激分子[1-2]，可以抑制淋巴细胞的增殖反应[3]，这些特殊的生物学特性奠定了间充质干细胞在自身免疫性疾病治疗中可能存在潜在的应用价值[4]。γ干扰素（interferon-γ，IFN-γ）在自身免疫性疾病的病理机制中起着重要作用[5]。本实验以脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cell，UC-MSC)和外周血单核细胞共培养体系为研究对象，观察了UC-MSC对培养上清中IFN-γ的影响。

1 材料与方法

1.1 试剂及器材DMEM/F12培养基、新生牛血清和trypsin-EDTA均为Invitrogen公司生产；IFN-γ检测试剂盒为联科生物技术有限公司生产；一抗mouse-anti-human IFN-γ、二抗FITC-goat-anti-mouse IgG以及流式抗体CD45和CD3均为Santa Cruz公司生产；……