朱光旭,周芳,朱向情,杨建勇,阮光萍，庞荣清，黄岚,康华莉,潘兴华

·干细胞与再生医学·

血管平滑肌细胞传代培养对内皮祖细胞吞噬Ac-LDL能力的影响及意义

朱光旭,周芳,朱向情,杨建勇,阮光萍，庞荣清，黄岚,康华莉,潘兴华

目的建立细胞共培养体系，探讨共培养的传代血管平滑肌细胞（SMCs）对内皮祖细胞(EPCs)吞噬Ac-低密度脂蛋白（Ac-LDL）能力的影响及意义。方法应用含15%FBS、细胞生长因子100μg/m l的DMEM/F12培养基培养EPCs，组织块法培养SMCs，分别应用Dil标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)与FITC标记荆豆凝集素Ⅰ(FITC-UEA-Ⅰ)荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光，对EPCs和SMCs进行鉴定。以单纯EPCs作为对照，分别将第1、4、8及第16代SMCs与EPCs进行非接触或混合共培养，荧光显微镜观察EPCs吞噬Dil-Ac-LDL能力，激光共聚焦显微镜拍照并使用ImageJ1.48u图像分析软件进行细胞荧光强度分析。结果在非接触性共培养系统，与对照相比，第1、4、8代SMCs对EPCs吞噬Ac-LDL无明显影响，但是第16代SMCs却显著抑制其吞噬能力；在混合共培养系统，第1、16代SMCs均显著抑制EPCs吞噬Ac-LDL（分别为P＜0.05与P＜0.01）。结论EPCs吞噬Ac-LDL受SMCs传代培养以及接触方式的影响，合成型SMCs显著抑制EPCs吞噬Ac-LDL，提示应用EPCs移植治疗损伤血管可能存在“时机窗”，血管损伤后极早或过晚应用EPCs移植均可能达不到修复血管损伤的最佳治疗效果。

内皮祖细胞；血管平滑肌细胞；Ac-LDL；内皮细胞

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是可以分化为血管内皮细胞（endothelial cells,ECs）的前体细胞，该类细胞既表达CD31、KDR等成熟ECs标志，同时具有干、祖细胞特性[1]。ECs吞噬Ac-低密度脂蛋白（Ac-LDL）是其重要生物学功能之一，其吞噬能力变化一定程度反映了其内皮特性或功能改变。……