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链霉菌JD211发酵条件优化

2015-08-06黄国强李红吴姚平李庆蒙韩顺魏赛金

湖北农业科学 2015年10期
关键词:优化

黄国强 李红 吴姚平 李庆蒙 韩顺 魏赛金

摘要:以戊二酰亚胺类抗生素菌株链霉菌(Streptomyces)JD211为研究对象,研究其发酵培养基和发酵条件,得出最佳培养基组成是甘油30 g/L、酵母膏10 g/L、硫酸铵5 g/L、NaCl 5 g/L、CaCO3 3.5 g/L。优化后的发酵条件为装液量50 mL/250 mL,初始pH 7.0,接种量7.5%,培养温度30 ℃,培养时间为144 h。培养基优化后菌丝体干重较优化前提高了166.61%,抑菌圈提高了30.77%。

关键词:链霉菌(Streptomyces)JD211;发酵培养基;发酵条件;优化

中图分类号:S476+.11 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2015)10-2470-03

DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.10.044

链霉菌(Streptomyces)JD211菌株是江西农业大学生物科学与工程学院从江西庐山珙桐树中分离筛选得到。研究发现,该菌株的粗提代谢物对水稻纹枯病菌、西瓜枯萎病菌等多种植物病原真菌具有显著的抑制效果[1]。其次生代谢物主要为戊二酰亚胺类抗生素,具有研发成新型友好生物农药的潜力和价值。本研究对链霉菌JD211培养基和培养条件进行初步研究,以此了解该菌适宜的发酵环境,提高抑菌活性物质的产量。

1 材料与方法

1.1 材料

链霉菌JD211、意大利青霉由江西农业大学生物工程实训基地提供。

蔗糖马铃薯培养基(PDA):蔗糖20 g,去皮马铃薯200 g,琼脂20.0 g,去离子水1 000 mL,pH 7.0。

种子培养基:葡萄糖10.0 g,甘油20.0 g,酵母膏10.0 g,碳酸钙5.0 g,硫酸铵5.0 g,去离子水1 000 mL,pH 7.0~7.2。

PDB培养基:去皮土豆200 g,蔗糖20 g,去离子水1 000 mL,pH自然。

高氏一号培养基:可溶性淀粉 20 g,KNO3 1 g,NaCl 0.5 g,K2HPO4 0.5 g,MgSO4 0.5 g,FeSO4 0.01 g,去离子水1 000 mL,pH 7.2~7.4。

LB培养基[2]:蛋白胨10 g,酵母膏5 g,NaCl 10 g,去离子水1 000 mL,pH 7.0。

察氏培养基:蔗糖30 g,NaNO3 2 g,K2HPO4 1 g,KCl 0.5 g,MgSO4 0.5 g,FeSO4 0.01 g,去离子水1 000 mL,pH 7.2~7.4。

葡萄糖-天门冬酰胺液体培养基:葡萄糖10.0 g,天门冬酰胺0.5 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,K2HPO4 0.5 g,FeSO4·7H2O 0.01 g,去离子水1 000 mL,pH 7.2~7.4。

Bennett′s培养基:葡萄糖10.0 g,N-Z酪蛋白素2 g,牛肉膏1 g,酵母粉1 g,去离子水1 000 mL,pH 7.2~7.4。

黄豆饼粉培养基:玉米淀粉20 g,玉米粉20 g,蔗糖20 g,黄豆饼粉15 g,KNO3 5 g,蛋白胨5 g,KH2PO4 0.3 g,NaCl 3 g,CaCO3 5 g,豆油10 mL,去离子水1 000 mL,pH 8.0。……

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