盛佳婧 钟琳 杨朝柱 胡凯 王大平 吴金平 胡中立 刁英

摘要： 为评价魔芋（Amorphophallus konjac）体内芋花叶病毒检测方法，利用人工接种芋花叶病毒的魔芋作为试验材料，分别采用DAS-ELISA、RT-PCR、荧光定量PCR等3种方法进行检测。结果表明，对于人工接种芋花叶病毒1周，植株出现有明显病征的魔芋，荧光定量PCR检测的灵敏度最高、RT-PCR次之，而DAS-ELISA酶联检测法灵敏度较低。

关键词：魔芋（Amorphophallus konjac）；芋花叶病毒；DAS-ELISA；RT-PCR；荧光定量PCR

中图分类号：S436.32 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）10-2519-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.10.059

魔芋（Amorphophallus konjac）是天南星科魔芋属多年生草本植物，已有2 000多年的种植历史[1]。魔芋是世界上迄今为止发现的惟一含有大量葡甘聚糖的植物。近年来随着葡甘聚糖营养保健功能的逐步被发现和在食品工业上的广泛应用，魔芋产品的市场需求逐年扩大，但因常年无性繁殖，使病毒积累、種性退化，其丰产性和品质无法保证[2]。芋花叶病毒（Dasheen mosaic virus，DsMV）是天南星科植物上发生最普遍和危害最严重的病毒[3]。

目前植物病毒的检测方法主要包括生长季隔离检疫、指示植物接种、血清学检测、免疫电镜和分子生物学检测[4，5]。已报道用ELISA和RT-PCR法来检测魔芋中芋花叶病毒[6]。荧光定量PCR是在常规PCR基础上将荧光共振能量转移与荧光标记探针结合，将核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术融合在一起的一项创造性技术，它具有快速、灵敏、高通量、特异性强、自动化程度高、重复性好、准确定量等特点[7]。实时荧光定量PCR技术被广泛应用于医学诊断、海关检验检疫、国防军事、新型农业、基础研究等领域[8，9]，尤其在动物医学病理和分子生物学研究领域应用十分广泛[10]。……