林锦何，叶翰江

（惠州市惠阳区水果生产办公室,广东 惠州516211）

芒果POD基因片段的克隆及序列分析

林锦何，叶翰江

（惠州市惠阳区水果生产办公室,广东 惠州516211）

摘要：通过改进的热硼酸法提取“Keitt”品种芒果果皮中的RNA,以提取的RNA为模板进行逆转录为cDNA，并以此为模板设计POD基因简并引物,进行RT-PCR,得到的扩增产物经纯化后与PMD-18载体连接,转化大肠杆菌,任意挑选阳性克隆,进行序列分析,得到芒果POD基因特异片段.通过DNA-Star软件对几种亲源关系较近的物种进行氨基酸序列同源性比对,芒果POD基因与柑桔、龙眼、可可、梨的POD基因的相似性分别为：89%、87%、88%、77%,说明克隆得到的片段为芒果POD基因片段.

关键词：芒果；POD基因；cDNA克隆；序列分析

芒果（Mangifera indica L.）为漆树科芒果属热带常绿果树,原产印度及马来西亚等地区,在我国主要集中分布于海南、广东、广西、云南等南方省区.芒果由于果实味道甜美、风味独特而深受人们喜爱.芒果作为跃变型热带亚热带水果,采收期正值高温多雨季节,不仅会加速采后果实的完熟,而且也极易使采后果实受病原微生物的侵染导致腐烂,降低其耐贮性,造成较大损耗［1］.

过氧化物酶（Peroxidase,POD）基因是植物次生代谢物质合成的关键基因［2］,在植物木质素和木栓质的合成［3-5］、参与生长素的降解［6］、参与活性氧代谢［7］、参与植物组织褐变、参与植物对外界不良胁迫的应答［8-12］等过程中,具有许多非常重要的生理功能［13］.目前对芒果POD基因的克隆国内尚未有相关的报道,为此,笔者通过克隆芒果POD基因……