谢娜娜

摘要：清洁验证是进行遗留物质清除，较小交叉污染的一项验证性活动。清洁验证对于有效减小内毒素以及微生物等方面的风险具有重要的意义。对于玻璃、不锈钢以及塑料等不同材质容器采用不同菌种进行回收率对比分析，论述了在清洁验证中不同材质容器回收率之间的关系，为提升清洁验证工作的效果以及方法科学化提供了重要的参考。结论表明，无细胞百白破联合疫苗及伤寒Vi多糖疫苗生产过程中对与产品相接触的塑料、玻璃、硅胶、不锈钢表面进行取样采用的取样方法是有效的。

关键词：清洁验证；不同材质；容器；回收率

中图分类号：TQ460文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2015）06（a）-0000-00

清洁验证活动要以可是实行较强的文件作为证据的一项验证活动，其主要目的是对去除生产过程中遗留物质的方法的有效性进行证明，并能够最大程度减少微生物以及内毒素交叉污染。回收率的验证则主要是针对不同的清洁验证对象对清洁中所采用的取样方案进行的验证活动。实践过程中，验证不同材质的容器对于相同物质取样的有效性。文中主要是验证了卡介苗等不同产品生产过程中与容器表明接触取样时，所应用取样方案的科学性与有效性。

1.基本概念界定

1.1 清洁验证

验证方案是为了能够得到相应的数据，在实施过程中以操作性文件为基本依据，对清除容器上的残留物所使用的方法的有效性进行证明的实验过程。其主要目的是尽量减少交叉污染的风险，在验证过程中一般都采用不同的容器，针对特定的验证对象进行对比分析，找出最优的方案以及相应的流程。

1.2 回收率

容器使用后，会受到一定的污染，因此进行取样方式有效性的考察方案验证要对回收率进行必要的统计与研究。本例子主要考核在不同容器中回收率的数据对比。

1.3 其他概念

被测物，在清洁验证活动中主要指的是最难清洁的残留物；检测限（LOD），样品浓度分析过程中，可以被检测到但不需要量化到精确值的最低量。定量限一般认为是在样品浓度检测过程中，检测结果的精确性以及准确度要能够有最低的保证（或者成为保证的最低量）；产品接触表面，在清洁验证活动中，与产品生产直接相关、与工艺过程直接相关等具有接触的任何生产设备、容器等都属于产品接触表面的范畴（文章主要分析的是容器表面）；线性指的是在一定的检测范围内，验证过程获取数据的能力。基本概念厘清后，对于验证过程方案的确定以及验证过程的准确实施以及效果评价具有重要的意义。

2 验证方案的确定

2.1 验证方案的期间准备阶段

首先是目标残留物的确定，根据选择的基本依据，一般而言都是采用在生产过程中最难以清洁的物质或者化学活性最强物质作为待检测的目标残留物；其次要正确选择合理的取样方案，目前业内通常的取样方案有最终淋洗水取样以及擦拭取样两种方案，在本次验证中采用测定被测物的TOC浓度。制备被测物的稀释液，并提交用于做TOC浓度检测，测出稀释液的TOC浓度。根据这些检测结果，可以计算出未稀释被测物的TOC浓度，并可用于之后回收率研究的TOC浓度计算；最后对检测的数据与实际的规定值进行对比分析，确定取样方案的有效性与科学性。

2.2 验证方案的技术要求

明确的验证方案对于整体的验证过程具有重要的指导意义，在验证方案起草中，要能够包含以下几个方面的内容。验证方案要符合验证的技术需求，验证必须符合科学、合理的检验要求，能够为清洁验证中残留物的检验方法提供必要的依据；同时要根据残留物的种类以及技术需求确定验证的阈值大小，最后要能够形成验证小组，有效实施对于项目的验证，并申请项目编码。

3 不同材质容器回收率分析

3.1 验证过程中的原则要求

在验证过程中，要能够严格遵守以下的原则性要求，保证验证的科学与准确性。所有的数据均需填入对应表格中，并签署姓名和日期；实施本方案的人员均需在附件1的签名页签名；在执行本方案过程中遇到的所有不符合性或异常情况均需记录到附件12不符合性描述中。所有的不符合项均需经由QMS.MA8.3.0-S001《不符合性控制指南》处理；方案实施结束后，制作一份总结报告和数据分析，内容包括测试数据或结果的总结、数据分析和验证方案的结论；完成方案执行可能需要复印方案的数据页。 按实际需要复印并在每页附件右上角注明页码，书写方式为“X of Y”，X代表第几页，Y代表总页数。标注页码号的人员必须在页码号后面签名并写上日期；接受此验证要求，在实施过程中实施结果应符合本方案中所有部分的可接受标准，所有不符合项及纠正措施均有记录。验证“通过”或“失败”取决于本方案中指定的可接受标准。

3.2 验证过程

首先进行被测物信息的等级，以进行数据处理，其次进行被测物TOC浓度测定，在此过程中需要完成的工作主要由以下几个方面，首先是被测物稀释液的制备，用WFI作稀释剂，制备一组被测物稀释液（如，1：100， 1：10，000， 1：100，000，共3份样品），尽量使被测物稀释液的TOC浓度在TOC分析仪的线性操作范围内。在一个洁净的TOC采样瓶中加入约40 ml的WFI，并做相应编号，作为空白对照，同时将已编号的TOC采样瓶送去做TOC浓度检测，最后进行最大倍数稀释液的检测，如果检测结果大于1 ppm C，应考虑是否放 弃检测其它被测物稀释液，以避免其它倍数稀释液超出TOC分析仪的检测限度，造成仪器损坏进行最大倍数稀释液的检测，如果检测结果大于1 ppm C，应考虑是否放 弃检测其它被测物稀释液，以避免其它倍数稀释液超出TOC分析仪的检测限度，造成仪器损坏进行最大倍数稀释液的检测，如果检测结果大于1 ppm C，应考虑是否放 弃检测其它被测物稀释液，以避免其它倍数稀释液超出TOC分析仪的检测限度，造成仪器损坏。

同时要进行被测物TOC浓度分析，收集的数据并记录，如果没有一个样品的TOC浓度在分析仪的线性操作范围内，则重复操作，直至制备的被测物稀释液TOC浓度在分析仪的线性操作范围内。用各个样品的TOC浓度减掉空白对照TOC浓度，校正所有检测值。

3.3 回收率检测

使用微量移液器，吸取制备的被测物稀释液1ml，均匀滴在设备样板上，每种浓度滴三块样板。将样板置于超净工作台中，使其过夜干燥（最少12小时但不超过36小时）。稀释液应均匀分布于样板上。均匀滴加稀释液的方法。如图1所示

图1 均匀滴加稀释液法示意图

取与样板数量等量的TOC采样瓶，取制备的被测物稀释液1ml加入到TOC采样瓶中，用注射用水补充TOC采样瓶内溶液量至40ml。标记样品做为被测物稀释液阳性对照。 按照检验方法，对于浓度为10、20及40 ppm C的每份被测物稀释液，都应获取3份阳性对照样品（总共9份）将所有样品涡旋30秒以确保溶液混匀；提交阳性对照样品进行TOC浓度检测；获取阳性对照结果并填至数据表。

4 数据处理及分析

质量检定室使用提供的样品进行本试验。试验结果记录在附件上，并反馈给验证组。结果由验证组进行评估。未符合可接受标准的试验结果应标明“失败”，并进行调查确定失败原因。调查，根本原因，纠正和预防措施，以及结论应在不符合性记录中进行概述。在达到以下验收标准的情况下，该方案可以被认为已完成：已经附上所有支持测试结果的数据。所有产生失败步骤的偏差已经得到解决和批准，并且已经附在文件中。所有参与执行此方案的人员都在签名栏中签名。对于可接受标准进行计算，分析在不锈钢、玻璃等不同材质下的回收率。通过统计分析得知，不同材质的清洁验证回收率在50-120%之间，符合验证的目的。不同材质回收率测定表格如图2所示。

图2不同材质回收率测定表

5 结论

为了证明在生产过程中对与产品相接触的塑料、玻璃、硅胶、不锈钢表面进行取样采用的取样方法是有效的。采用了熟料、玻璃、不锈钢扥各不同容器对卡介苗等生产过程中最难清除的残留物进行了清洁验证分析。验证过程中，首先需要取确定最难清洁残留物，在此基础上根据验证方案进行溶液的制备以及浓度的检测，根据验证工艺要求，与可接受标准进行比较，结论表明，不锈钢等几种不同材质的容器回收率都符合验证要求。

参考文献

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