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免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定海洋生物中河豚毒素

2015-06-21严忠雍张小军李奇富王莹柳家鹏龙举祝银杨会成

分析化学 2015年2期

严忠雍 张小军 李奇富 王莹 柳家鹏龙举 祝银 杨会成

1(浙江省海洋水产研究所,舟山316021)

2(江苏美正生物科技有限公司,无锡214135)

3(浙江省海洋渔业资源可持续利用技术研究重点实验室,舟山316021)

4(浙江省海洋开发研究院,舟山316021)

1 引言

河豚毒素(Tetrodotoxin,TTX)是一种天然海洋生物神经毒素,分布广泛,主要存在于河豚鱼中,圆尾鲎、蓝环章鱼、螺类等其它海洋生物中也有存在。河豚毒素毒性极强,食用0.5 mg 就可致人死亡,其带正电荷的胍基能伸入钠通道的离子选择过滤器,和通道内壁上的游离羧基结合,阻碍Na+进入,从而抑制神经冲动的传导,使人感觉神经麻痹,四肢瘫痪,呼吸困难,最后因呼吸抑制而死亡[1~4]。我国每年都有因食带有TTX 的海洋生物而导致中毒的事件发生。鉴于河豚毒素的严重危害,有必要建立一种简便、快速有效检测河豚毒素的方法。目前,河豚毒素的检测方法有生物测定法[5]、高效液相色谱法(HPLC)[6,7]、液相色谱串联质谱法(LC-MS)[8~11]及酶联免疫法(ELISA)[12]等。其中,生物测定法一般需要专门动物,适用性差,且操作繁琐,费时费力重复性差;酶联免疫法虽特异性强,但酶联免疫反应耗时长,操作难度较大;液相色谱串联质谱法灵敏度高,但现有的文献方法检出限偏高,前处理复杂,且采用的固相萃取技术净化样品不理想、易受基质干扰,回收率低。免疫亲和柱(IAC)是一种基于抗原抗体反应的新型层析柱,利用生物大分子具有对一类生物大分子特异识别和可逆结合的特性制作而成,具有独特的选择专一性和良好的吸附净化性能。……

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