苏敏 李桃 刘殿骏 王振新

1(中国科学院长春应用化学研究所，电分析化学国家重点实验室，长春130022)

2(中国科学院大学，北京100049)

1 引言

蛋白酶是水解蛋白质肽键的一类酶的总称，凝血酶是一种重要的蛋白酶，主要参与血液凝结级联反应，使血液凝结成块阻止血液流失［1］。凝血酶与血栓栓塞性疾病的诊断和治疗密切相关［2］，以凝血酶为靶点的抗凝血药物是临床用于治疗血栓的主要药物［3］，开发高效、价格低廉的抗凝血药物是目前药物学研究热点［4，5］。

微阵列生物芯片技术可以在一张芯片上集成多种生物化学反应，能够实现对生物活性物质高效快速地测试和分析［6，7］。固定蛋白酶或蛋白酶特异底物的微阵列芯片可以同时分析多种抑制剂与蛋白酶之间的作用机理和作用效率［8，9］。Uttamchandani 等用蛋白微阵列芯片同时检测了3 种化合物对4 种半胱氨酸蛋白酶的抑制效率［10］;Neumann 等用小分子微阵列芯片从近10 万个有机小分子中筛选出了6 种能与凝血酶活性位点结合的化合物［11］。迄今为止，仍鲜有使用多肽微阵列芯片在血液样品中筛选凝血酶抑制剂的报道。

本研究利用多肽微阵列芯片反应平台，荧光(Fluorescence)和共振光散射(Resonance Light Scattering，RLS)双检测手段，在血液样品中检测凝血酶抑制剂的抑制效率。双通路检测手段提高了检测结果的准确性，在加标血清和血浆中检测并比较了5 种化合物对凝血酶的抑制能力，并研究了在血浆中两种抑制剂对凝血酶抑制作用的可逆性。

2 实验部分

2.1 仪器……

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