王 艳，刘晓辉，张学智，彭清林，王国春

（中日友好医院 风湿免疫科，北京 100029）

抗线粒体抗体（antimitochondrial antibody，AMA）由Maokey 等于1958 年首次于原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）患者血清中发现， 是人体内一种无种属特异性和器官特异性的自身抗体。 目前临床上常用的检测抗线粒体抗体的方法为间接免疫荧光法（IIF），其检测的是总的抗线粒体抗体；酶联免疫吸附法（ELISA）检测的是与PBC 高度相关的AMA-M2 亚型。 理论上讲，IIF 法和ELISA 法检测的结果应该具有一致性，但临床中经常出现不一致的结果：ELISA 法测得AMA-M2 阳性，IIF 法测得AMA 阴性。 这常给临床医生对结缔组织病（connective tissue disease，CTD）的病情评估和诊断带来一定的干扰。 因此，本文总结了2 种方法在实际临床检测中的相关性，以提高该抗体对临床诊断的价值。

1 资料与方法

1.1 观察对象

选取2011 年1 月～2013 年6 月在我院门诊及住院患者中， 使用2 种检测方法：IIF 检测AMA和ELISA 法检测AMA-M2 且诊断明确的患者共726 例。 记录患者的AMA 检测结果及临床诊断。检测标本均为血清标本。

1.2 检测方法

1.2.1 间接免疫荧光法（IIF 法）

采用Euroimmun 试剂盒检测AMA，严格按试剂盒说明书操作。①加样品：用样品缓冲液将待检血清按1：100 比例稀释混匀，加25μl 标准品及稀释好的血清于倒扣板上，盖片，温育30min。 ②加荧光标记的抗体：加入荧光标记的二抗体液25μl于倒扣板，盖片，置30min。③用封片剂封片。④使用Olympus BX-51 荧光显微镜读片。

1.2.2 酶联免疫吸附法（ELISA 法）

采用Euroimmun 试剂盒检测血清AMA-M2水平并严格按试剂盒说明书操作。 ①加样品：用样品稀释缓冲液将待检血清按1：200 比例稀释，分别将1～5 号标准品、 质控品及稀释血清100pl加入用靶抗原包被的微孔中，温育30min。……