朱欣瑶，周庆璋，田文洪，刘春国,，董小岩，吴小兵,，喻长远



比较不同血清型AAV携带HBV基因组建立乙肝小鼠模型效果

朱欣瑶1，周庆璋2,3，田文洪2，刘春国1,3，董小岩3，吴小兵1,3，喻长远1

1 北京化工大学生命科学与技术学院，北京 102600 2 吉林大学生命科学学院，吉林长春 130012 3 北京五加和分子医学研究所，北京 100176

朱欣瑶, 周庆璋, 田文洪, 等. 比较不同血清型AAV携带HBV基因组建立乙肝小鼠模型效果. 生物工程学报, 2015, 31(12): 1764–1772.Zhu XY, Zhou QZ, Tian WH, et al. Comparison of HBV persistent infection mice models by different serotypes of AAVs carrying HBV genomes. Chin J Biotech, 2015, 31(12): 1764–1772.

近年来，用8型腺相关病毒携带1.3拷贝HBV (Hepatitis B virus) 基因组建立的HBV持续感染小鼠模型受到越来越多的关注。本研究比较了除AAV8之外的其他4种血清型重组腺相关病毒 (Recombinant adeno-associated virus，rAAV) 建立乙肝小鼠模型效果。首先，将携带1.3拷贝ayw亚型HBV基因组的1型、2型、5型、8型、9型腺相关病毒分别以1×1011vg/只(Viral genome，vg) 的剂量尾静脉注射C57BL/6J小鼠；利用 ELISA 方法监测小鼠血清中HBeAg和HBsAg表达水平；用定量PCR方法检测小鼠血清和肝脏中 HBV DNA 拷贝数；用免疫组化方法检测小鼠肝脏中HBcAg的表达；用HE染色检测小鼠肝脏病理变化。结果显示，在持续8周中，5组小鼠血清中都检测到HBeAg和HBsAg的表达，血清和肝脏中均检测到HBV DNA的存在。HBeAg、HBsAg、HBV DNA表达水平高低依次为AAV8>AAV9>AAV1>AAV5>AAV2。5组小鼠用免疫组化方法都检测到肝脏中HBcAg表达，HE染色病理检测均观察到不同程度的肝损伤。本研究扩大了能用于建立乙肝小鼠持续感染模型可选择的AAV载体种类，发现虽然AAV1、2、5、9的建模效果不如AAV8，但它们都可以介导建立持续感染的乙肝小鼠模型，建模效果依次为AAV8>AAV9>AAV1>AAV5>AAV2。其中AAV9介导的建模效果与AAV8载体最为接近，可以替代AAV8载体用于有效地建立HBV持续感染的小鼠模型。

动物模型，乙型肝……