MTA2对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响
2015-06-01郑树艳黄永望
陈 磊,郑树艳,黄永望*
(1.天津医科大学第二医院耳鼻喉科,天津300060;2.天津市津南区咸水沽医院耳鼻喉科)
MTA2对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响
陈 磊1,郑树艳2,黄永望1*
(1.天津医科大学第二医院耳鼻喉科,天津300060;2.天津市津南区咸水沽医院耳鼻喉科)
目的 研究转移相关基因2(Metastasis-associated gene 2,MTA2)对喉癌细胞系Hep-2的增殖、迁移和侵袭的影响。方法 采用化学合成的针对MTA2基因的小干扰RNA(siRNA-MTA2)下调该基因的表达,采用Real time-PCR(RT-PCR)和Western blot检测转染效果,通过MTT、细胞划痕实验和Transwell法分别检测MTA2对Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 将siRNA-MTA2转染入Hep-2后,Hep-2细胞中MTA2mRNA和蛋白表达水平都明显降低,细胞增殖能力显著降低,细胞的迁移和侵袭能力显著降低。结论 在喉癌细胞系Hep-2中MTA2与恶性增殖和侵袭性相关,有望成为喉癌早期诊断、分子治疗的靶点。
喉癌;RNA;小分子干扰;转移相关基因2;Hep-2细胞
(Chin J Lab Diagn,2015,19:0883)
喉癌是头颈部常见上皮来源的恶性肿瘤,由于原癌基因的过表达,同时伴随抑癌基因的突变缺失,从而使肿瘤细胞逃避了正常生长的调控机制。MTA2(Metastasis-associatedgene 2,MTA2)是一个新发现的促癌基因,可以调节细胞骨架的构建,还可以调节肿瘤细胞凋亡。在一些恶性肿瘤中高表达,如肺癌、乳腺癌等[1,2]。但有关MTA2对喉癌细胞系Hep-2生物学行为的影响(细胞的增殖、迁移和侵袭)等的尚鲜见报道。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞系及其培养 喉癌细胞系Hep-2购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库。Hep-2细胞于含10%胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)的培养液中,在5%CO2、37°C条件下培养。
1.1.2 主要试剂及仪器 针对MTA2基因的小干扰RNA(siRNA-MTA2)以及体外化学合成的siRNA购自上海吉玛公司,阴性对照(sicontrol)由上海吉玛公司赠送。……
