陈晓红，朱学涛

(1、连云港市社会福利中心，江苏 连云港222003；2、连云港市第一人民医院检验科，江苏 连云港222002)

粪便潜血试验(fecal occult blood test,FOBT)是消化道出血的一个重要筛选指标，当消化道有少量出血时，因消化道的作用可使红细胞溶解破坏，肉眼或显微镜检测不到，采用化学法或免疫法等方法方能证实出血的试验。粪便潜血试验是测定消化道出血的一种方法，筛检消化道肿瘤的有效手段[1]。血红蛋白单克隆抗体测定的免疫法与传统的化学法相比，灵敏度、特异性都有了很大的提高，且不受饮食或相关药物(铁剂)等影响，已被广泛地应用于临床。化学法对人血红蛋白的特异性差，受其它动物血红蛋白和其它因素的干扰，强调试验前三天内禁食动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物铁剂、中药以免假阳性的产生。但在实际工作中，有时临床有消化道出血现象，而免疫法检测结果出现阴性结果，文献报道不同的检测潜血试验的方法在临床上存在着差异[2,3]，为了探讨免疫法和化学法检测消化道出血的应用价值，选择了2014年9月-2015年4月本院108例经内窥镜检查诊断有消化道出血疾病的患者，112例健康体检者。18例呕吐伴胃出血患者。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料与检测方法

1.1.1 免疫法 金标层析法为免疫法中的代表方法，单克隆Hb免疫夹心法检测人Hb金标试纸条，杭州艾博生物医药有限公司生产，批号：2014050016。

1.1.2 化学法 匹拉米洞法为化学法中的代表方法，珠海贝索生物技术有限公司生产，批号：215011。

1.1.3 免疫法和化学法同时检测为双联法，也称序贯法。

1.2 对象

1.2.1 112例健康体检者，血常规检查无贫血和血小板减少，癌胚抗原(CEA)正常，无痔疮。

1.2.2 经内窥镜检查确诊有消化道出血的139例患者(包括胃肠溃疡、出血、肿瘤、息肉)。

1.2.3 121例呕吐胃黏膜损伤出血患者的胃内容物。患者主要为重症监护患者、脑外伤、脑梗死、肺部严重感染，化疗患者化疗药物副作用引起肠胃反应。

2 结果

2.1 健康体检者与消化道出血患者粪便免疫法和化学法潜血试验检测结果比较 上消化道出血样本中62例阳性样本，有8例患者的样本呈现黑色柏油样，用免疫法检测为阴性，而化学法为强阳性。见表1。

表1 粪便免疫法和化学法潜血试验检测结果比较(%)

2.2 胃内容物免疫法和化学法潜血试验检测结果比较 121例样本中有75例为黏液包裹的咖啡色样本。见表2。

表2 胃内容物免疫法和化学法潜血试验检测结果比较(%)

3 讨论

从表1可以看出健康人对照组在正常饮食情况下留取粪便样本，免疫法和化学法的检测结果一样均检测出2例阳性标本，且2例阳性重叠，检出率为1.8%。

经随访得知，1例体检者留取粪便前一天曾出现鼻出血现象，1例体检者近几日早刷牙有较为严重的牙龈出血现象，均是由于部分血液被吞咽，进入消化道。

使用免疫法检测Hb，上消化道出血患者粪便样本中，免疫法Hb检出率43.2%，化学法Hb检出率53.2%；下消化道出血患者粪便样本中，免疫法Hb检出率50.0%，化学法Hb检出率64.3%，免疫法和化学法同时测定，以其中一项阳性即诊断为阳性，上消化道出血患者阳性检出率55.9%，下消化道出血患者阳性检出率67.9%。上消化道出血患者免疫法的阳性检出率低，是因为Hb在消化道中，受肠内细菌和消化酶的作用而变性，导致其抗原性降低，由于体液中的蛋白成分阻碍抗原抗体反应，而出现假阴性结果[4]。张锡莲报道胃酸对胃液匹拉米洞法潜血试验有一定的影响[5]，但红细胞破裂释放的Hb，经胃酸作用的血基质仍然可与匹拉米洞反应，结果为阳性，本文上消化道出血患者化学法的阳性检出率为53.2%，免疫法的阳性检出率为43.2%，为了解决此差别，国内外学者对Hb以外的血液成分也作出了深入研究，如转铁蛋白、结合胆红素、纤维蛋白原、卟啉铁、卟啉衍生物等。有研究报道，糖化血红蛋白以及触珠蛋白对胶体金单克隆抗体法检测Hb也有一定的影响[6,7]。

免疫法和化学法同时检测结果与内窥镜检查确定有消化道出血者进行比较可以看出，其符合率较低，分别为55.9%和67.9%。一方面可能受肠内细菌作用的影响，有些Hb被分解或在上消化道被胃液消化。另一方面与粪便的采集方法关系密切相关，粪便中混有的血液与尿液中混有的血液不同，尿液中的血液是在溶液中的均匀体，而粪便中是不均匀地分布在固体粪便内，检测的样本只是整个样本的很少一部分。因此潜血试验检查应严格按照操作规程执行[8]，连续检查3d，并挑取外表及内层粪便，收集后应迅速检查，避免时间过长造成灵敏度降低。

另外与患者的疾病的特点也有重要关联，如溃疡病患者呈间断性阳性，也是造成与临床符合率降低的原因之一。

从表2还可以看出121例胃内容物的检测结果，121例样本中有75例为黏液包裹的咖啡色样本，免疫法和化学法同时测定95例(78.5%)阳性，92例(76.0%)化学法呈现阳性，而免疫法只有71例(58.7%)呈现阳性。出现此种现象主要是由于胃内容物样本本身的特点造成的，由于胃内容物往往夹杂着许多胃黏液，样本呈现黏稠状，将红细胞包裹在黏液中，使用免疫法很难挑取到黏液内部样本，操作者的不同挑取部位也有着很大的差别。化学法使用的试剂是液体的，可以和样本很好地和样本混合，使夹杂在黏液内的标本呈现阳性结果。

化学法在对上消化道出血样本检测时，62例阳性样本中，有8例患者的样本呈现黑色柏油样，用免疫法检测为阴性，而化学法为强阳性。这种现象可能是大量的出血由于抗原过高，反应呈现带现象，而出现假阴性结果，虽然可以稀释样本可以再次检测，并且要求使用低渗缓冲液稀释，操作过程繁琐，且稀释的比例难以控制。使用化学法作为消化道出血检测的有效补充，特别是上消化道出血造成的颜色深的粪便有实用价值，与免疫法起到互补作用。

潜血试验对于判别消化道是否有出血有重要意义，免疫法检测Hb特异性好、灵敏度高、干扰因素少、操作简便、污染小，但由于大量出血造成带现象，而出现假阴性结果，黏稠的样本检出阳性率低。化学法的灵敏度较高，但特异性较差，可以弥补免疫法中对特殊样本的不足，特别是上消化道大量出血黑色柏油样粪便，在胃内容物黏稠样本检测也可得到较好结果，因此免疫法还不能够完全取代化学法检测。总之，化学法和免疫法检测Hb均具有独特的临床意义，在临床应用中应了解互补关系，正确选用，合理分析和科学选择不同的检测方法，对疾病诊断至关重要。

[1]姜佳丽,万晓萍.粪便潜血试验的临床应用[J].中华内科杂志,2012,51(2):93-94.

[2]胡冬华,刘琼,李琴.单克隆抗体法检测粪便隐血的临床应用探讨[J].实验与检验医学,2008,26(4):453-454.

[3]黄胜,梁华英,何艳,等.三种粪便隐血试验的临床应用评价[J].实验与检验医学,2011,29(1):69-70.

[4]内田夫,他.关于免疫学便潜血反应的基础研究[J].临床检查仪器.试剂,1998,11(2):167-172.

[5]张锡莲.胃酸对胃液匹拉米洞法潜血试验的影响[J].实验与检验医学,2011,29(3):305.

[6]马金霞,刘秀华,潘世扬.糖化血红蛋白对金免疫隐血试验的干扰分析[J].临床检验杂志,2001,19(5):315-316.

[7]仇祝强,宫凌娟,刘雪芹.触珠蛋白对便潜血单克隆抗体法检测的影响[J].上海医学检验杂志,2000,15(1):25.

[8]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:302.