吴颖虹，王仁杰，朱少波，刘小景，张珏，江金梅

(景德镇市第二人民医院，江西 景德镇333000)

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，发病率与病死率均较高[1]。而异黏蛋白(metadherin，MTDH)基因可激活多条刺激细胞增殖，侵袭，细胞生存和耐药的信号转导通路，可直接影响c-myc、Ha-ras等相应基因的表达水平[2]。本文重点研究了乳腺癌中MTDH的表达及与淋巴结转移二者关系，现报告如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 从江西景德镇市第二人民医院2008年1月-2013年1月收治的乳腺癌患者中抽取样本30例，其中24例伴有淋巴结转移，6例无淋巴结转移，本次所取的30例患者均分别取肿瘤处组织与癌旁的正常组织(大于5cm)，患者均为女性，年龄37~58岁，平均(30.21±1.8)岁，所选组织标本均经病理确认。

1.2 材料 试剂需用型兔抗人MTDH单克隆抗体，兔抗人雌激素受体蛋白(ER)、HER-2单克隆抗体、兔抗人孕激素受体(PR)以及相应的PV6000SP试剂盒，DAB显色试剂盒等，所有试剂与材料均来自于北京中山金桥生物技术公司。

1.3 方法 所有免疫组化组织切片均进行水化、脱蜡、加热修复抗原处理，并使用3%的过氧化氢甲醇溶液来削弱内源性氧化物酶活性，并在山羊血清封闭抗原内，依次滴加抗ER、MTDH、HER-2、PR等抗体过夜，生物素化二抗，DAB显色，苏木素复染后封片，结束后将其置于光镜下观察，用PBS缓冲液作阴性对照，用乳腺癌阳性标准作阳性对照，所有标本均经DAB染色后，可见细胞核、细胞膜、细胞质中有棕黄色颗粒沉着，从每例患者所选的标准的中选取5个高倍镜视野，在依照细胞染色程度与阳性染色细胞本身所占比例来作评分[3]。可将染色程度评分情况如下：0分：不着色；1分：淡黄色；2分：黄色；3分：棕褐色；阳性染色细胞百分比评分情况如下：0分：阳性细胞低于25%；1分：阳性细胞在25%~50%之间；2分：阳性细胞在50%~75%之间；3分：阳性细胞超过75%。将染色程度与阳性染色细胞百分比评分相加后的最终结果相加，低于2分为阴性，高于2分为阳性。

2 结果

2.1乳腺癌及癌旁乳腺组织中MTDH蛋白的表达30例乳腺癌患者中23例的组织内有检测到MTDH蛋白的表达，表达率为76.67%，另有9例患者的癌旁乳腺组织中有检测到MTDH蛋白的表达，表达率为30%。

2.2 阳性检出率情况 MTDH基因在淋巴结转移乳腺癌患者中的阳性检出率高达87.50%，而无淋巴结转移的乳腺癌患者中，MTDH阳性率为33.33%(P<0.05)。 见表 1。

表1 乳腺癌患者临床资料与MTDH基因表达关系

2.3 MTDH、ER、PR及HER-2之间的关系 MTDH、ER、PR及HER-2在乳腺癌组织内的表达为：在乳腺癌组织免疫组化检测内MTDH均表达在肿瘤细胞膜与细胞浆中(图1)。仅有极少部分表达在细胞核中，阳性检出率为76.67%；ER表达于癌细胞的细胞核与细胞浆，阳性率为91.67%(图2)；PR表达于癌细胞核与细胞浆，阳性率为63.64%(图3)；HER-2表达于细胞膜上，阳性率为83.33%(图4)。

图1 MTDH的表达

图2 ER的表达

图3 PR的表达

图4 Her-2的表达

3 讨论

最早发现MTDH是在人原始胚胎星形细胞中[4]，在人体的其它正常组织内完全无表达，但在肿瘤病变区内却呈高表达，与肿瘤的生长关系紧密[5]。此外，通过对小鼠体内噬菌体进行筛查，得知乳腺癌与MTDH之间关系紧密[6]。因MTDH重点定位在染色体8q22，齐全的MTDH基因有3611bp[7]，其中包括12个外显子与11个内含子，而第22与1968才是最主要的表达序列，最终编码产物为异黏蛋白[8]，属于高碱性Ib性跨膜蛋白，大部分均定位在51与72之间的氨基酸残基上[9]。

而MTDH大多表达在肿瘤细胞内胞膜与胞浆中，并与人体NF-κB内的p56产生作用，将NF-kB信号通路完全激活，赋予了NF-κB调节人体免疫、炎症反应、凋亡等多种功能[10]。此外，MTDH表达位置多是由细胞浆向细胞核发生转移，受TNF-α、HIF-1α等基因的影响较明显，此种转移与乳腺癌患者复发转移有紧密关联[11]。同时细胞浆向细胞核转移后，还会与病变肿瘤细胞内的P53基因产生作用，促使人体肿瘤细胞快速增殖[12]，使得乳腺癌疾病不断恶化，降低了患者生存时间[13]。本文中重点对乳腺癌中MTDH的表达与淋巴结转移之间的关系展开分析，结果表明，30例乳腺癌患者中23例的组织内有检测到MTDH蛋白的表达，表达率为76.67%，另有9例患者的癌旁乳腺组织中有检测到MTDH蛋白的表达，表达率为30%，乳腺癌患者淋巴结快速转移与体内的MTDH关系紧密(P<0.05)，若患者体内的MTDH基因检出率越高，说明发生淋巴结转移的概率越高，其可作为判断乳腺癌患者有无发生复发转移的重要指标。此外，MTDH不受ER、PR、HER-2等参数值的影响，ER在癌细胞中的阳性率为91.67%；PR在癌细胞中的阳性率为63.64%；HER-2在癌细胞中的阳性检出率为83.33%。可见，MTDH不受乳腺癌患者的年龄、ER、PR、HER-2等影响，而乳腺癌)MTDH高表达者发生复发转移的几率较大。这为临床中乳腺癌疾病的治疗和研究提供了更多的理论依据。

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