侯迎梅 金 敏 张 稳 霍雅文 周歧存

(宁波大学海洋学院鱼类营养研究室，宁波315211)



三疣梭子蟹幼蟹的维生素C需要量

侯迎梅 金 敏 张 稳 霍雅文 周歧存*

(宁波大学海洋学院鱼类营养研究室，宁波315211)

本试验通过研究饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹生长、抗氧化性能以及非特异性免疫的影响，旨在确定三疣梭子蟹幼蟹的维生素C需要量。试验配制维生素C含量分别为1.91、18.89、36.76、78.42、156.49和315.97 mg/kg的6种等能等氮的试验饲料，以初始体重为(5.65±0.25) g的三疣梭子蟹幼蟹为试验对象，饲养于室外水泥池的长方形塑料筐中，进行为期8周的养殖试验。每种试验饲料投喂60只幼蟹，每20只幼蟹作为1个重复。结果显示：当饲料中维生素C含量从1.91 mg/kg增加到36.76 mg/kg时，增重率和特定生长率显著上升(P<0.05)；当维生素C含量为从156.49 mg/kg增加到315.97 mg/kg时，增重率和特定生长率显著降低(P<0.05)。1.91 mg/kg组的存活率显著低于其他各组(P<0.05)。1.91 mg/kg组的饲料系数显著高于其他各组(P<0.05)，以饲料中维生素C含量为78.42 mg/kg时饲料系数最低。饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹的蜕壳率及全蟹粗蛋白质、水分和粗灰分含量均没有产生显著影响(P>0.05)，随着饲料中维生素C含量的增加，全蟹粗脂肪含量基本上呈升高的趋势，315.97 mg/kg组显著高于其他各组(P<0.05)。血清中总蛋白、葡萄糖含量不受饲料中维生素C含量的显著影响(P>0.05)。1.91 mg/kg组血清中总胆固醇含量显著高于其他各组(P<0.05)。36.76 mg/kg组血清中甘油三酯含量最高，显著高于156.49 mg/kg组(P<0.05)。血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性变化趋势一致，均以36.76 mg/kg组最高，并显著高于其他各组(P<0.05)；同时，1.91、18.89、78.42 mg/kg组血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性显著高于156.49、315.97 mg/kg组(P<0.05)。血清谷丙转氨酶/谷草转氨酶以36.76 mg/kg组最低，显著低于78.42和315.97 mg/kg组(P<0.05)。饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹血清中溶菌酶活性没有显著影响(P>0.05)。血清中碱性磷酸酶活性随着饲料中维生素C含量的增加而升高，315.97 mg/kg组显著高于其他各组(P<0.05)。随着饲料中维生素C 含量从1.91 mg/kg增加到78.42 mg/kg，血清中超氧化物歧化酶活性显著升高(P<0.05)，而随着饲料中维生素C含量的进一步增加，血清中超氧化物歧化酶活性无显著变化(P>0.05)。1.91 mg/kg组血清中丙二醛含量显著高于其他各组(P<0.05)。以特定生长率为评价指标，通过折线模型分析得出三疣梭子蟹幼蟹对维生素C的需要量为42.60 mg/kg(饲料干重)。

维生素C；三疣梭子蟹；生长；抗氧化性能；非特异性免疫

三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)因其具有肉质好、生长快、产量高、环境适应能力强等优点，颇受广大消费者和养殖户的青睐，是我国重要的海产经济蟹类。近年来，随着养殖规模的扩大以及集约化程度的提高，水产养殖环境日趋恶化，导致越来越多疾病的暴发，三疣梭子蟹的病害问题受到人们的广泛重视。除了采用药物防治和优化养殖环境外，提高三疣梭子蟹自身的免疫力对病害的防治有着重要意义。近年来，一些研究者通过添加营养素(如维生素C等)及免疫增强剂等手段，增强养殖动物的非特异性免疫力，更具实际应用价值[1]。

维生素C不仅是维持甲壳动物正常生长、繁殖和健康等所必需的营养素，而且对其维持正常代谢活动、以及治疗组织创伤、抵御疾病侵袭具有重要意义[2]。近年来，很多学者研究了维生素C对对虾生长的影响，徐志昌等[3]认为维生素C能够促进中国对虾生长以及提高存活率，适量的维生素C能促进对虾的蜕壳。处于变态期的虾要经历形态学和生化过程的很大变化，此时对维生素C的需求比非变态期的虾要高；此外，虾类在蜕皮时胶原蛋白形成很快，这需要更多的维生素C作为辅助因子[4]。同时，维生素C影响甲壳类最外层的硬化，此硬化层是由一种外壳蛋白和苯醌通过交联作用而形成，而体内苯醌的形成需要维生素C的参与[5]。研究发现，饲料中添加一定量的维生素C能显著提高南美白对虾的成活率[6]。养殖实践中已证明提高饲料中维生素C的含量能增强鱼、虾和蟹对环境污染物、刺激物的耐受力以及对病菌的免疫力。王伟庆等[7]报道，注射金黄色葡萄球菌后，中国对虾细胞的吞噬能力随饲料中维生素C含量的增加而增强。增加饲料中维生素C的含量能增强虾蟹类的抗应激能力，饲料中的维生素C能够提高中国对虾对缺氧的耐受力[7]。刘晓玲等[8]研究表明，与镉中毒对照组相比，添加维生素C组能延缓河蟹肝胰腺中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、过氧化氢酶(catalase，CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶活性的降低时间，减小其降低幅度[9]。目前，关于维生素C与河蟹、对虾的生长和抗病力关系的试验很多，但是关于三疣梭子蟹的却很少，如何提高三疣梭子蟹的抗病力成了营养学研究者关注的重要问题之一。本试验旨在研究饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹生长、抗氧化性能及非特异性免疫的影响，以确定三疣梭子蟹幼蟹对饲料中维生素C的需要量，为甲壳动物营养免疫学积累基础资料。

1 材料与方法

1.1 试验饲料配制

以秘鲁红鱼粉、豆粕、小麦蛋白粉和磷虾粉为蛋白质源，鱼油、豆油和大豆卵磷脂为主要脂肪源，并补充矿物质预混料、维生素预混料等以满足幼蟹的营养需求，配制基础饲料(表1)，然后在基础饲料中分别添加0、20、40、80、160和320 mg/kg的维生素C，配制成6种等氮等能的试验饲料，实测各试验饲料中维生素C含量分别为1.91、18.89、36.76、78.42、156.49、315.97 mg/kg。所有原料粉碎后过80目筛，混匀后添加油脂和水(30%原料混合物干重)，以双螺杆挤条机挤压并经饲料颗粒机制成2种规格(直径3 mm，长度5 mm；直径5 mm，长度7 mm)的颗粒饲料，饲料90 ℃熟化30 min，阴凉处风干，用封口袋包装后于-20 ℃下保存待用。

1.2 饲养管理

养殖试验在宁波市象山县东陈乡鑫亿梭子蟹水产公司进行，试验用三疣梭子蟹幼蟹购自宁波兢业育苗厂，幼蟹置于水泥池中暂养。本试验采用单体筐养的方式，塑料养殖筐规格为80 cm×40 cm×40 cm，养殖筐中间设置一隔板，隔板两边各放一装有沙子的沙盒，作为蟹子的栖息场所，沙盒规格为25 cm×15 cm×10 cm。挑选360只初始体重为(5.65±0.25) g的幼蟹，随机分配于180只养殖筐中(2只/筐)，养殖筐随机分组，每种试验饲料投喂60只幼蟹，每20只幼蟹作为1个重复。试验开始前统一用基础饲料驯化1周，试验开始后每种试验饲料每天投喂2次(07:00、17:00)，每天投喂量控制在幼蟹体重的6%～8%，每天早晨捞取残饵和蜕壳，记录死亡量、投饵量和蜕壳次数。所有养殖筐置于1个水泥池(70.0 m×80.0 m×0.6 m)中，池底铺设充氧管不间断充氧，试验期间水温26～30 ℃，溶解氧浓度6.5～7.0 mg/L，氨氮浓度≤0.5 mg/L，pH 7.8～8.2，盐度26‰～28‰，2～3 d换水1次，每次换水量约为30%，试验期为8周。

1.3 样品采集、分析与计算

试验结束时，清点每组存活的幼蟹数量。停食24 h后取样，每组幼蟹分别称重，并随机取4只幼蟹从第3步足抽取血液，分别放入1.5 mL离心管中，4 ℃静置过夜，3 000 r/min离心8 min，取上清，用于血清生化指标测定。另外，每个组随机取4只幼蟹进行蟹体常规营养成分分析。

表1 基础饲料组成及营养水平(干物质基础)

1)每千克维生素预混料含有Contained the following per kg of vitamin premix：硫胺素 aneurine 40 mg，核黄素 lactoflavin 80 mg，盐酸吡哆醇 puridoxine hydrochloride 120 mg，VK 40 mg，肌醇 inositol 4 000 mg，D-泛酸钙D-calcium pantothenate 600 mg，叶酸 folic acid 8 mg，生物素 biotin 4 mg，VE 200 mg，氯化胆碱 choline chloride 6 000 mg，尼克酸 nicotinic acid 400 mg，β-胡萝卜素 beta carotene 96 mg，钙化醇 calciferol 12 mg，氰钴胺素 cobalamine 0.8 mg。

2)每千克矿物质预混料含有Contained the following per kg of mineral premix：Ca(H2PO4)2·H2O 12 500 mg，K2HPO4·3H2O 8 400 mg，Ca3(PO4)211 550 mg，CaCO314 500 mg，KI 15 mg，MgSO413 000 mg，ZnSO41.5 mg，MnSO465 mg，CoCl2·6H2O 40 mg，CuSO425 mg，FeSO4630 mg，NaHSeO30.5 mg。

1.3.1 生长及饲料利用指标

增重率(WGR,%)=100×

(终末体重-初始体重)/初始体重；

特定生长率(SGR,%/d)=100×

(ln终末体重-ln初始体重)/试验天数；

饲料系数(FCR)=饲料摄入量(干重)/

幼蟹体增重(湿重)；

脱壳率(MR,%)=100×2×蜕壳次数/

(开始时蟹个数+结束时蟹个数)；

存活率(SR，%)=100×开始时蟹个数/

结束时蟹个数。

1.3.2 常规营养成分分析

用于常规营养成分分析的饲料和幼蟹样品置于105 ℃烘箱中至恒重，测定方法参照AOAC(1995)。水分含量为烘干前后样品的质量变化量；粗蛋白质含量采用凯氏定氮仪(FOSS，Tecator，Hoganas，瑞典)测定样品的总氮后通过总氮量乘以6.25而得；粗脂肪含量采用索氏抽提仪(Soxtec System HT6，Tecator，瑞典)测定；粗灰分含量采用灼烧法测定，样品置于马福炉中550 ℃下灼烧8 h至恒重。所有指标均重复测定2次，若同一样品测定结果相对偏差大于2%，则增加重复数，采用相对偏差2%以内的2个测定值的平均值作为测定结果。维生素C含量测定采用高效液相色谱法。

1.3.3 血清健康指标

血清中总蛋白(total protein,TP)、总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、葡萄糖(glucose，GLU)含量和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)活性送往宁波大学附属医院检测。

1.3.4 非特异性免疫指标

血清溶菌酶(lysozyme,LSZ)活性采用Hultmark等[10]的改进方法进行。以溶壁微球菌冻干粉为底物，用0.1 mol/L的磷酸钾盐缓冲液(pH=6.4)配制成一定浓度的底物悬液(570 nm处的吸光度值为0.3)，在此法规定条件下，LSZ活性计算公式如下：

LSZ(U/mL)=(A0-A)/A。

式中：A0为反应之前菌悬液的吸光度值；A为反应之后菌悬液的吸光度值。

血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，AKP)活性采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定。

1.3.5 抗氧化指标

血清SOD活性和丙二醛(MDA)含量采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定。

1.4 统计分析

采用SPSS 16.0对所有数据进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，若组间差异显著(P<0.05)，则进行Tukey’s多重比较。分析结果均用“平均值±标准误”表示。

2 结 果

2.1 生长与饲料利用指标

由表2可知，维生素C含量从1.91 mg/kg上升到36.76 mg/kg时，增重率和特定生长率显著升高(P<0.05)；当维生素C含量从36.76 mg/kg上升到156.49 mg/kg时，增重率和特定生长率未发生显著变化(P>0.05)；当维生素C含量为从156.49 mg/kg增加到315.97 mg/kg时，增重率和特定生长率显著降低(P<0.05)。以特定生长率为评价指标，通过折线模型回归方程y=0.011 2x+3.847 3(R2=0.916 8，x<36.76)和y=-0.001 1x+4.371 3(R2=0.864 0，x>36.76)，得出三疣梭子蟹幼蟹的维生素C需要量为42.60 mg/kg(饲料干重)(图1)。饲料中未添加维生素C组(1.91 mg/kg组)的存活率显著低于各添加组(P<0.05)。饲料系数随着维生素C含量的增加呈波动变化，饲料中未添加维生素C组的饲料系数显著高于各添加组(P<0.05)，以饲料中维生素C含量为78.42 mg/kg时饲料系数最低。

表2 各组三疣梭子蟹幼蟹的生长与饲料利用指标

同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

图1 饲料中维生素C含量与三疣梭子蟹

2.2 全蟹常规营养成分

由表3可知，饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹全蟹水分、粗灰分和粗蛋白质含量均没有显著影响(P>0.05)。随着维生素C含量的增加，全蟹粗脂肪含量基本上呈升高的趋势，在维生素C含量为315.97 mg/kg时，全蟹粗脂肪含量最高，显著高于其他各组(P<0.05)。

2.3 血清健康指标

由表4可知，饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹血清中TP和GLU含量没有显著影响(P>0.05)，而对血清中TC、TG含量及ALT和AST活性有显著影响(P<0.05)。饲料中未添加维生素C组血清中TC含量显著高于各添加组(P<0.05)。36.76 mg/kg组血清中TG含量最高，显著高于156.49 mg/kg组(P<0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。血清中ALT和AST活性变化趋势一致，均以36.76 mg/kg组最高，并显著高于其他各组(P<0.05)；同时，1.91、18.89、78.42 mg/kg组血清中ALT和AST活性显著高于156.49、315.97 mg/kg组(P<0.05)。血清中ALT/AST以36.76 mg/kg组最低，显著低于78.42和315.97 mg/kg组(P<0.05)。

表3 各组三疣梭子蟹幼蟹的全蟹常规营养成分

表4 各组三疣梭子蟹幼蟹的血清健康指标

2.4 非特异性免疫指标

由表5可知，饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹血清中LSZ活性没有显著影响(P>0.05)，但是在一定范围内，增加维生素C含量可提高血清中LSZ活性。血清中AKP活性随着饲料中维生素C含量的增加而升高，315.97 mg/kg组显著高于其他各组(P<0.05)。

2.5 抗氧化指标

由表6可知，随着饲料中维生素C含量从1.91 mg/kg增加到78.42 mg/kg，血清中SOD活性显著升高(P<0.05)，而随着饲料中维生素C含量的进一步增加，血清中SOD活性无显著变化(P>0.05)。饲料中未添加维生素C组血清中MDA含量显著高于各添加组(P<0.05)，各添加组间无显著差异(P>0.05)。

表5 各组三疣梭子蟹幼蟹的非特异性免疫指标

表6 各组三疣梭子蟹幼蟹的抗氧化指标

3 讨 论

本试验结果表明，饲料中添加适量的维生素C对三疣梭子蟹幼蟹具有显著的促生长作用，当饲料中添加20～160 mg/kg维生素C(饲料中维生素C含量为36.76～156.49 mg/kg)时，增重率和特定生长率显著高于未添加维生素C组，但是过量添加维生素C(饲料中维生素C含量为315.97 mg/kg时)增重率和特定生长率非但没有增加，反而显著下降，说明过量的维生素C抑制其生长。饲料中维生素C含量显著影响三疣梭子蟹幼蟹的存活率，未添加维生素C组的存活率显著低于各添加组。而刘襄河等[11]对南美白对虾的研究结果表明，当水体中的维生素C含量增加到0.9 g/m3时，对虾的存活率有显著提高，进一步提高水体中维生素C的含量，存活率无显著变化，与本试验结果相似。饲料中添加适量的维生素C对三疣梭子蟹幼蟹对饲料的利用有一定的促进作用，饲料中维生素C含量为78.42 mg/kg时饲料系数最低，显著低于未添加维生素C组。但饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹的蜕壳率未产生显著影响。综上所述，饲料中维生素C含量为36.76～78.42 mg/kg时，三疣梭子蟹幼蟹生长和饲料利用较好，这与Moe等[12]对斑节对虾的研究结果一致。然而，周歧存等[13]对凡纳滨对虾的研究表明，饲料中维生素C添加量为150 mg/kg时，对虾的生长性能最好；宋理平等[14]对中国对虾的研究结果表明，饲料中维生素C添加量为300 mg/kg时，对虾的存活率最高，生长情况最好，或高或低都不利于对虾的生长；周立斌等[15]研究表明，花鲈获得最佳生长性能时饲料中维生素C添加量为103 mg/kg左右。不同研究结果存在差异的原因可能与研究的物种、维生素C添加形式不同有关。

对三疣梭子蟹幼蟹全蟹常规营养成分的分析表明，三疣梭子蟹幼蟹全蟹粗蛋白质、粗灰分和水分含量不受饲料中维生素C含量的影响，但饲料中维生素C含量显著影响全蟹粗脂肪含量，饲料中维生素C含量增加会使全蟹粗脂肪含量增加，这也许是由于维生素C参与体脂肪代谢的结果，其作用机理有待进一步研究[16]。

血液指标被广泛地用来评价动物的健康状况、营养状况及对环境的适应状况，是重要的生理、病理和毒理学指标[17-18]。血清中TP含量反映了动物的营养与代谢状况，也间接反映了机体免疫水平的高低。刘栋辉等[19]的研究表明添加维生素C磷酸酯能够显著提高斑节对虾血清中TP含量。本试验发现，除156.49 mg/kg组以外，其他各组血清中TP含量均高于未添加维生素C组，说明维生素C能促进机体蛋白质的合成，进而提高三疣梭子蟹对蛋白质的消化和吸收。血清胆固醇是体内重要的脂类物质，它不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸、维生素D以及甾体激素的原料，胆固醇含量的高低反映了脂类吸收状况，同时也可以反映肝脏脂肪代谢状况[20]。不同程度的脂肪肝与肝脏内TG积聚的量有关。徐文[21]研究显示，高TG增加脂肪肝的患病率，而单纯的高TC对脂肪肝的产生没有多大影响，脂肪肝与TG、TC含量之间的关系还有待进一步的研究。本试验中，三疣梭子蟹幼蟹血清中TC含量随着维生素C含量的增加而降低，可能是维生素C促进了三疣梭子蟹肝胰腺脂肪代谢，其机理有待进一步研究；血清中TG含量随着饲料中维生素C含量的增加基本上呈降低的趋势，说明维生素C可以降低血清中TG的含量。血糖是反映动物糖代谢和全身组织细胞功能状态以及内分泌机能的一个重要指标。本试验结果表明，饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹血清中GLU含量没有产生显著影响。血清中ALT和AST活性的变化与肝细胞的炎症、变性和坏死密切相关，是反映肝细胞受损伤的主要敏感指标[22]。长期严重脂肪肝可因肝脏内代谢紊乱或者脂变使得肝细胞压迫肝窦引起肝细胞缺血坏死，导致肝脏ALT活性升高，诱发肝纤维化及肝硬化[23]。本试验中血清ALT和AST活性基本上随着饲料中维生素C含量的增加呈降低的趋势，说明维生素C可以抑制ALT和AST活性的升高，防止肝脏受到损伤。

LSZ是吞噬细胞杀菌的物质基础，在甲壳类动物的免疫防御中起重要作用。它能够水解革兰氏阳性细菌的细胞壁，破坏入侵体内的异物，从而担负起机体防御的功能[24]。王文靖等[25]研究表明，大剂量投喂维生素C 后，凡纳滨对虾的LSZ活性得到提高；陈亚坤[26]研究表明，饲料中添加适量维生素C可以提高南美白对虾的LSZ活性；宋理平等[14]的研究表明，饲料中添加适量维生素C后能够提高中国对虾幼虾的LSZ活性，而本试验结果表明，饲料中维生素C含量对三疣梭子蟹幼蟹血清中LSZ活性没有显著影响，但是LSZ活性随着饲料中维生素C含量的增加先升高，在78.42 mg/kg组达到最大值，随后有降低的趋势。这可能与试验对象、试验对象的生长阶段和饲养环境不同有关，具体原因有待进一步研究。

AKP可催化所有的磷酸单酯及磷酸基团的转移反应，它直接参与磷的代谢，亦与DNA、RNA、蛋白质、脂质等代谢有关，它对钙质吸取、磷酸钙沉积、骨骼形成、甲壳素分泌及形成都有重要的作用；虾蟹类等甲壳动物在生长过程中都要经历蜕壳过程，该酶对虾蟹类的生存、生长有特别重要的意义[27-28]。本试验结果显示，饲料中添加维生素C可以提高三疣梭子蟹幼蟹血清中AKP活性，当维生素C含量增加到315.97 mg/kg时，血清中AKP活性显著提高。这与艾春香等[29]对中华绒螯蟹的研究结果一致，其认为饲料中添加适量的维生素C后，可刺激细胞内的AKP活性增强，随后释放到血清中，使血清中的AKP活性也增强，促进中华绒螯蟹细胞中的物质代谢，进而促进中华绒螯蟹生长，也间接增强了其非特异性免疫能力。

SOD是生物体内一种重要的抗氧化防御酶，其基本功能是清除由代谢产生的活性氧，控制自由基引起质膜过氧化[30]。当虾蟹类机体受到轻度逆境胁迫时，SOD活性被诱导，而受重度逆境胁迫时，其活性则被抑制。SOD活性可以作为虾蟹类免疫反应的一个重要指标[31-32]。艾春香等[33]研究表明，饲料中添加维生素C后，河蟹不同组织中SOD的活性显著降低，当维生素C添加量为50～100 mg/kg时，可有效地增强河蟹的非特异性免疫能力。MDA是膜脂质过氧化的最终分解产物，其含量的高低可以反映机体遭受过氧化损害的程度。本试验结果显示，血清中SOD活性随着饲料中维生素C含量增加而升高，而血清中MDA含量随着饲料中维生素C含量增加而降低，且各添加组血清中MDA含量显著低于未添加维生素C组。这说明维生素C对三疣梭子蟹抗氧化系统有一定的影响，维生素C可有效提高机体抗氧化酶活性和降低脂质过氧化物MDA对机体的损害，从而增强机体的抗氧化功能。这与胡毅等[34]对青鱼幼鱼的研究结果、邢克智等[35]对点带石斑鱼的研究结果相一致。但是也有学者认为，维生素C既发挥其调节机体新陈代谢的生理功能，又发挥其较强的抗氧化保护作用，而动物体内的两大抗氧化体系的作用是协同的，动物体为了保持自身自由基的产生和清除达到动态平衡，SOD的活性就相应地降低了。艾春香等[28]认为随着维生素C添加量的增加，中华绒螯蟹血清中SOD活性显著降低，表明维生素C作为天然抗氧化剂在中华绒螯蟹体内发挥了很大的作用。

综上所述，饲料中添加适量的维生素C可以促进三疣梭子蟹幼蟹的生长，并可以改善其对饲料的利用，饲料中维生素C含量为36.76～78.42 mg/kg时，三疣梭子蟹的生长较好，饲料利用率较高。与此同时，饲料中适宜含量的维生素C能显著提高血清中AKP活性，而对LSZ活性没有显著影响。饲料中维生素C含量为36.76～78.42 mg/kg时，可以提高三疣梭子蟹幼蟹的抗氧化性能，降低血清中MDA含量。

4 结 论

以特定生长率为评价指标，通过折线模型分析得出三疣梭子蟹幼蟹对维生素C的需要量为42.60 mg/kg(饲料干重)。

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*Corresponding author, professor, E-mail: zhouqicun@nbu.edu.cn

(责任编辑 菅景颖)

Dietary Vitamin C Requirement of Juvenile Swimming Crab (Portunustrituberculatus)

HOU Yingmei JI Min ZHANG Wen HUO Yawen ZHOU Qicun*

(LaboratoryofFishNutrition,SchoolofMarineSciences,NingboUniversity,Ningbo315211,China)

An 8-week feeding trial was conducted to evaluate the effects of dietary vitamin C content on growth, anti-oxidant ability and non-specific immune of juvenile swimming crab (Portunustrituberculatus), in order to determine the dietary vitamin C requirement of juvenile swimming crab. Six iso-nitrogenous and iso-energetic diets were formulated to contain 1.91, 18.89, 36.76, 78.42, 156.49 and 315.97 mg/kg vitamin C in diets, respectively. Juvenile swimming crabs with an initial body weight of (5.65±0.25) g were selected as experimental animals and all of them were cultured in rectangle plastic baskets in out-door cement. Each of experimental diet was fed 60 juvenile swimming crabs, and each 20 of them as a replicate. Results showed that the weight gain rate and specific growth rate were significantly increased when dietary vitamin C content increased from 1.91 to 36.76 mg/kg (P<0.05). However, the weight gain rate and specific growth rate were significantly decreased when dietary vitamin C content increased from 156.49 to 315.97 mg/kg (P<0.05). Moreover, The survival rate in 1.91 mg/kg group was significantly lower than that in other groups (P<0.05). The feed conservation rate in 1.91 mg/kg group was significantly higher than that in other groups (P<0.05), and crabs fed the diet contained 78.42 mg/kg vitamin C had the lowest feed conservation rate. Molting rate, and crude protein, moisture and ash contents in whole-body were not significantly influenced by dietary vitamin C content (P>0.05). With the dietary vitamin C content increasing, the crude lipid content in whole-body showed an increased trend, and that in 315.97 mg/kg group was significantly higher than that in other groups (P<0.05). Total protein and glucose contents in serum were not significantly affected by dietary vitamin C content (P>0.05). Serum total cholesterol content in 1.91 mg/kg group was significantly higher than that in other groups (P<0.05). Crabs fed the diet contained 36.76 mg/kg vitamin C had the highest serum triglyceride content, and significantly higher than that in 156.49 mg/kg group (P<0.05). Serum alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase activities had the same change trend, the highest values of them all found in 36.76 mg/kg group, and significantly higher than those in other groups (P<0.05). Meanwhile, the serum alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase activities in 1.91, 18.89 and 78.42 mg/kg groups were significantly higher than those in 156.49 and 315.97 mg/kg groups (P<0.05). Serum alanine aminotransferase/aspartate aminotransferase in 36.76 mg/kg group was the lowest, and significantly lower than that in 78.42 and 315.97 mg/kg groups (P<0.05). Lysozyme activity in serum was not significantly affected by dietary vitamin C content (P>0.05). Alkaline phosphatase activity in serum was increased with the increase of dietary vitamin C content and it in 315.97 mg/kg group was significantly higher than that in other groups (P<0.05). Superoxide dismutase activity in serum was significantly increased with dietary vitamin C content increased from 1.91 to 78.42 mg/kg, however, further increased the dietary vitamin C content, the difference was not significant (P>0.05). Serum malondialdehyde content in 1.91 mg/kg group was significantly higher than that in other groups (P<0.05). Base on broken-line model analysis of the SGR as an evaluation index, the vitamin C requirement of juvenile swimming crab is 42.60 mg/kg dry matter of diet.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2015, 27(12)：3772-3781]

vitamin C; swimming crab (Portunustribueculatus); growth; anti-oxidant ability; non-specific immune

10.3969/j.issn.1006-267x.2015.12.016

2015-05-08

国家自然科学基金项目(41476125)；宁波市海洋蟹类创新团队(2011B81003)

侯迎梅(1991—)，女，安徽阜阳人，硕士研究生，从事水生动物营养与饲料研究。E-mail: 531103788@qq.com

*通信作者：周歧存，教授，博士生导师，E-mail: zhouqicun@nbu.edu.cn

S963

A

1006-267X(2015)12-3772-10