赵桂华，王洪法，仲维霞，崔 勇，尹 昆，徐 超，肖 婷

新疆喀什地区黑热病暴发的危险因素分析

赵桂华，王洪法，仲维霞，崔 勇，尹 昆，徐 超，肖 婷

目的 探讨新疆喀什地区黑热病暴发流行的危险因素。方法 采用病例对照研究，自制调查问卷，以基于利什曼原虫kDNA保守区PCR扩增的分子方法检测呈阳性感染的为病例组，按1∶3匹配选择年龄、性别、营养状况、职业、家庭收入与消费、受教育程度等方面差别无统计学意义(P>0.05)，且利什曼原虫感染检测呈阴性的健康人为对照组，对性别、环境和行为等10个潜在危险因素进行单因素和多因素logistic 回归分析。结果 75份易感人血样感染利什曼原虫阳性率为82.67%(62/75)。单因素分析显示：户外被叮咬、户外露宿习惯、邻居有黑热病患者、蚊帐及趋避剂杀虫剂的使用与当地易感人群感染利什曼原虫关系密切，危险比(RH)值和95%可信区间(95% CI)依次为7.296,(3.102，1.16)、15.429(5.876,8.995)、75.6(26.6,214.9)、0.311(0.132,0.733)、0.491(0.292,0.672)；多因素分析显示：户外被叮咬、邻居有黑热病患者是感染利什曼原虫的危险因素，使用蚊帐是保护性因素，RH值和95%CI为12.56(3.476,45.38)、140.987(37.59,528.8)、0.185(0.05,0.68)。结论 在该地区易感人群感染利什曼原虫率较高的情况下，对当地居民普及黑热病的危害及防御措施，及时确诊并彻底诊治黑热病患者，尽量避免户外被叮咬，养成使用蚊帐习惯是预防控制当地人源型黑热病感染暴发的有效措施。

黑热病；暴发；危险因素；logistic回归分析

新疆喀什地区是我国黑热病的重点流行区，上世纪50年代初一些严重的乡村患病率高达21.0/万，经过20多年的努力，1989年发病人数降至11例，基本控制了当地黑热病的流行[1]。然而自上世纪90年代以来, 新疆喀什地区由于防治经费不足和药物的缺乏，黑热病病人不能及时彻底的治疗，且对于无症状感染的人不能及时查出并给与治疗，他们可能成为了传染源，增加了周围人感染的机会；另外该地区农业人口多，经济落后，对黑热病的危害认识及重视程度不够，种种原因造成该地区存在黑热病大面积暴发的危险。目前新疆喀什地区已成为我国黑热病发病人数最多和发病率最高的地区，发病病例占新疆总病例数的90%，其中喀什市、疏附县、伽师县等最为严重，是我国目前内脏利什曼病的重点流行区，且不断发生黑热病死亡病例[2-5]；其特点是近家栖长管白蛉和吴氏白蛉为传播媒介，15岁以下的少年儿童为易感人群，呈家庭聚集性，主要分布于该地区的喀什市、疏附县、伽师县等古老的绿洲地带[6]。为探讨该地区黑热病暴发流行的危险因素，制定有针对性的预防控制措施，本研究在了解喀什市、疏附县、伽师县3县市易感人群感染利什曼原虫状况的基础上，对与当地黑热病暴发流行相关的经济、社会、行为等因素进行了调查分析，寻找主要的危险因素。

1 材料与方法

1.1 调查对象 本研究选择新疆喀什地区古老绿洲地带的喀什市、疏附县、伽师县易感人群作为调查对象，易感人群为2006—2009年期间既往发病病人家属及邻居，黑热病病人信息由喀什市疾控中心提供；对于易感人群进行采集静脉血样，共75份，其中疏附县的英吾斯坦乡12例，喀什市的浩罕乡27例、伯什克然木乡24例，伽师县12例。对这些血样进行利什曼原虫感染率检测，确定危险因素调查的病例组。对照组按1∶3匹配，选取与病例组在年龄分布、性别、营养状况、职业、家庭收入与消费、受教育程度等方面差别无统计学意义(P>0.05)的人群，且利什曼原虫感染呈阴性。对病例组和对照组均进行逐一入户调查，填写调查表。

1.2 易感人群携带利什曼原虫阳性率的检测 基于利什曼原虫kDNA(GenBank: AF169140.1)保守区选择两对特异引物(引物序列详见表1)PCR扩增特异条带的分子方法进行检测，两对引物同时扩增出特异条带的样品视为阳性，其它情况为阴性。

1.3 调查方法与内容 编制问卷调查表，有统一的调查员采用面对面调查。调查内容包括家庭的基本情况，患者就诊、治疗情况，社会因素、行为因素和居住环境等内容(详见表2)。

表1 PCR引物序列

1.4 调查数据的统计学分析 回收的调查表经审核合格后，采用SPSS21.0统计分析软件建立数据库进行单因素和多因素的logistic回归分析，定义因素引入标准为α=0.10，剔除标准为α=0.15。以危险度(hazard ratio,HR)值和P值作为分析指标。

2 结 果

2.1 易感人群利什曼原虫感染阳性率 用RV1-RV2，K13A-K13B两引物，对75份易感人群血样进行利什曼原虫阳性率检测，两对引物同时出现特异条带样品视为阳性，易感人群血样的阳性率为82.67%(62/75)(部分结果见图1)。

2.2 单因素logistic回归分析 62份检测为阳性的易感人作为危险因素调查的病例组，按1∶3匹配选取与病例组在年龄分布、性别、营养状况、职业、家庭收入与消费、受教育程度等方面差别无统计学意义(P>0.05)，且利什曼原虫感染呈阴性的186人作为对照组。对性别、年人均消费额、使用蚊帐情况、窗纱、户外叮咬情况、趋避剂杀虫剂使用、户外露宿习惯、邻居是否有黑热病患者等10个变量进行单因素logistic回归分析，结果显示，户外被叮咬、户外露宿习惯、邻居有黑热病患者是感染利什曼原虫的危险因素，而使用蚊帐及趋避剂杀虫剂则是保护性因素，见表3。

2.3 多因素logistic回归分析 对上述有统计学意义的因素进行多因素logistic回归分析，结果表明：使用蚊帐是保护性因素，而户外露宿习惯、邻居有黑热病患者是危险因素，见表4。

表2 调查因素及赋值

M: DL2000 DNA marker; 1,3,5,7,9,11,13,15,17,19,21: the PCR products of blood samples with primer RV1-RV2; 2,4,6,8,10,12,14,16,18,20,22: the PCR products of blood samples with primerK13A-K13B; Negative control: noLeishmaniainfected human blood samples (from Kashi City).

图1 新疆喀什地区部分乡镇易感人群(无感染症状)血样的PCR部分结果

Fig.1 Part of PCR results of asymptomatic human blood samples from part of townships of Kashi area, Xinjiang

3 讨 论

新疆喀什地区位于新疆南部边陲，经济落后，人们生活水平较低，是目前我国黑热病的主要流行区。该地区存在人源型和野生动物源黑热病，传播媒介(近家栖长管白蛉和吴氏白蛉)和保存宿主比较复杂，目前无有效的预防控制手段[7-8]。该地区黑热病的特点易感人群为15岁以下的少年儿童，呈家庭聚集性，主要分布于该地区的喀什市、疏附县、伽师县等古老的绿洲地带。所以本研究选择该地区黑热病流行较为严重的喀什市、疏附县、伽师县的青少年作为易感人群进行调查。 自上世纪90年代，我国黑热病人数呈上升趋势[9]。尤其是新疆喀什地区成为目前我国黑热病人数最多和发病率最高的地区，其中喀什市、疏附县、伽师县等最为严重，是我国目前内脏利什曼病的重点流行区，1998年发病人数达到167例，2005年为178 例，居全国之首[10-11]。疏附县尤为集中，占喀什地区总病例数的43.25%[3]；伽师县为人源型和荒漠型混合流行区，2008年感染病例为41例[8,12]；2003—2004年喀什市的部分地区的感染率为17.27%[13]。由于经济、当地时局等客观条件的限制，本研究仅采集3县市患病率高的地区共75份易感人群血样进行危险因素调查。本次调查结果表明75份易感人群血样有62份为利什曼原虫感染阳性，阳性率为82.67%(62/75)。以62份阳性利什曼原虫感染者为病例组，1∶3匹配选取与病例组在年龄分布、性别、营养状况、职业、家庭收入与消费、受教育程度等方面差别无统计学意义(P>0.05)，且利什曼原虫感染呈阴性的人群为对照组，进行当地感染利什曼原虫危险因素调查，结果显示性别、年人均消费额、家中是否饲养家畜、黄昏是否经常外出与黑热病暴发流行关系不大。黑热病流行区为贫困地区，生产方式和生活条件相似，都极其艰苦，防蚊防蛉意识薄弱，可利用的防护措施和工具有限[14]。本次调查97%的患儿父母为农民，家庭收入和支出相差不多，差别无统计学意义。本地区传播人源型黑热病的媒介有家栖性/近家栖性长管白蛉和吴氏白蛉，其传播力度远大于单一媒介作用。该地区地域广阔，用滞效短的药物进行喷洒后不能完全消灭和控制近家栖长管白蛉和吴氏白蛉的密度[15]。本次研究也充分说明了这点，因为虽然单因素分析表明趋避剂及杀虫剂的使用是保护性因素，但多因素分析将其剔除。

表3 利什曼原虫感染的危险因素单因素条件logistic回归分析结果

表4 利什曼原虫感染的危险因素单因素条件logistic回归分析结果

单因素和多因素分析显示，户外被叮咬和邻居有黑热病患者是感染利什曼原虫的主要危险因素，这与以往研究的当地黑热病的特点人是主要的传染源和保存宿主、呈家庭聚集性(即一户内多个成员同时发病或先后患病的情况颇为多见)、传播媒介为对趋避剂和杀虫剂防治无效的近家栖种群的长管白蛉和吴氏白蛉一致。因此趋避剂及杀虫剂的使用不能控制传播媒介对人群的叮咬，起不到保护性的作用，而使用蚊帐是感染利什曼原虫的保护性因素。因此，在目前黑热病疫情较为严重的情况下，养成良好的生活习惯，正确认识黑热病的危害及防御措施，及时确诊黑热病患者并对其彻底的诊治，尽量避免户外被叮咬，大力普及发放蚊帐是预防控制当地人群黑热病感染暴发的有效措施。

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Wang Hong-fa, Email: wang_hongfa@yahoo.com.cn

Risk factors of Kala-azar outbreak in Kashi Prefecture, Xinjiang, China

ZHAO Gui-hua,WANG Hong-fa,ZHONG Wei-xia,CUI Yong,YIN Kun,XU Chao,XIAO Ting

(ShandongAcademyofMedicalSciences,ShandongInstituteofParasiticDisease,Jining272033,China)

We investigated the risk factors of human-origin type Kala-azar outbreak in Kashi Prefecture, Xinjiang, China. A case-control study with self-made questionnaire was conducted. The case group included all cases of susceptible population who were positiveLeishmaniainfection by PCR on account of the conserved region ofLeishmaniakinetoplast DNA minicircles. The control group 1:3 matched healthy human were noLeishmaniainfection and no significant difference (P>0.05) at gender, age, nutritional status, occupation, the family income and consumption, and the education level. Ten potential risk factors such as gender, environment and behavior factors were analysed by single and multivariate logistic regression. The positive rate of 75 susceptible population samples was 82.67% (62/75). The single-variable logistic regression analysis showed that the factors such as outdoor bite, outdoor sleep habit, Kala-azar patients near dwelling place, and pesticide and mosquito net use were all closely related to the human-origin type Kala-azar outbreak. The hazard ratio (HR) values and 95% confidence interval (95%CI) were 7.296(3.102, 1.16), 15.429(5.876, 8.995), 75.6(26.6, 214.9), 0.311(0.132, 0.733), and 0.491(0.292, 0.672). Multivariate logistic regression analysis showed that outdoor bite and Kala-azar patients near dwelling place were the risk factor, the use of mosquito net was the protective factor to avoid the human-origin type Kala-azar outbreak, and the HR (95%CI) were 12.56 (3.476, 45.38), 140.987 (37.59, 528.8), and 0.185 (0.05, 0.68). Popularizing the harm of Kala-azar, diagnosis and treatment of Kala-azar patients thoroughly, no outdoor bite, and the broadly use of mosquito net are all effective measures for prevention and control of Kala-azar.

Kala-azar; outbreak; risk factors; logistic regression analysis

王洪法，Email: wang_hongfa@yahoo.com.cn

山东省医学科学院/山东省寄生虫病防治研究所,济宁 272033

Supported by the Project of Technology Innovation or Common Platform (No. 2008IPB202)

10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.06.021

R382.2

A

1002-2694(2015)06-0592-05

2014-10-18；

2015-01-30

创新或共性平台技术项目(No.2008IPB202)