响应面优化诱导子促进印楝悬浮细胞培养产印楝素的研究
2015-04-13张云竹方佳钟秋平
张云竹++方佳++钟秋平



摘 要 通过单因素实验法研究了水杨酸(SA)、萘乙酸(NAA)、壳聚糖(CTS)、吲哚丁酸(IBA)、茉莉酸(JA)、激动素(KT)和甲基茉莉酸(MJ) 等7种诱导剂对印楝悬浮细胞培养产印楝素的作用,筛选出SA、NAA、CTS、IBA等4种刺激效果明显的诱导剂,利用响应面法优化了该4种诱导剂的最佳组合为SA 92.00 mg/L、NAA 6.0 mg/L、CTS5 4.0 mg/L和IBA 3.0 mg/L,得到印楝素含量的实际值为8.61 mg/g,与理论预测值8.69的相对误差为0.92%。回归方程的预测值和实验值差异不显著,所得回归方程模型拟合情况良好,符合要求。
关键词 印楝 ;细胞悬浮培养 ;印楝素 ;响应面
分类号 S722.7
印楝(Azadirachta indica A. Juss)是一种极其安全的药用资源植物[1],在农业、医药、环保、化妆及食品中应用广泛[2-4]。起药用效果的主要是印楝籽通过次级代谢产生的印楝素,不仅具有高效杀虫、拒食等功效,还能抑制生长发育、胃毒、呼吸和昆虫激素分泌等,并具有降低昆虫生育能力和杀灭微生物等作用[5-9]。但印楝籽1 a只产1次,数量有限,不能长久保存,且印楝籽中的印楝素含量受种源、降雨、种子形态、采样期和组培条件等因素的影响[10-11]。由于从印楝籽中提取印楝素具有局限性,因此采用悬浮细胞培养规模化开发印楝素则是行之有效的方法。梁军等[12]建立了印楝悬浮细胞培养体系,Balaji等[13]考察了生物及非生物诱导子对印楝悬浮细胞培养产印楝素的影响。考虑到诱导子之间存在协同效应,本试验研究不同诱导子如SA、NAA、CTS、IBA、JA、KT及MJ对印楝悬浮细胞培养产印楝素的影响,选择最优诱导剂,并考察它们之间相互作用的效果,以期为提高悬浮培养细胞的印楝素产量提供依据。……
