张 莉 张九红 陕西省中医医院(西安 710003)

复方菟丝子胶囊质量标准研究

张 莉 张九红 陕西省中医医院(西安 710003)

目的:建立复方菟丝子胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)对主要药材进行鉴别；采用超高效液相色谱法(UPLC)测定君药菟丝子中金丝桃苷的含量。结果：金丝桃苷的含量在0.002112～0.02112μg范围内，峰面积值与进样量呈良好线性关系。平均加样回收率为102.11%，RSD为 1.48%。结论:定性定量方法简便、准确，准属性强，重现性好，能有效控制该制剂的质量。

复方菟丝子胶囊由菟丝子、人参、黄芪、当归、川芎等十味药物组成，该药具有健脾补肾、益气养血之功，应用于脾肾两虚、气血不足，症见面色萎黄、倦怠乏力、腰膝酸软、头晕心悸等病症。本实验采用薄层色谱法对复方菟丝子胶囊的质量进行质量控制性探究，对处方中人参、黄芪、当归、川芎进行TLC方法的检测；对菟丝子中的金丝桃苷则利用高效液相色谱进行含量测定，并对其方法学进行考察，旨在为该产品的质量控制提供客观的定性定量评价方法。

1 仪器与试药 1.1仪 器 沃特斯UPLC H-CLSS型超高效液相色谱仪，PDA紫外可见检测器，Empower化学工作站，B1210E-MT 超声仪(美国BRASON ULTRASONICS公司)、电子天平(METTLER TOLE DO New classic MF型)、WS70-1型红外快速干燥箱、FW135型粉碎机、四孔水浴锅。

1.2 试药对照品 金丝桃苷(批号：100736-201337)、当归(批号：120927-200613)、人参(批号：121045-200604)、川芎(批号：120918-200809)、黄芪(批号：120974-200609)均购自中国药品生物制品检定所。样品自制批号分别为140301、140302、140303。水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果 2.1 TLC鉴别 人参：取10g作为供试品，取人参对照药材1g，取人参阴性样品10g，按参考文献1中方法制备与显色[1]。黄芪鉴别：取本品5g，黄芪对照药材1g，黄芪阴性样品10g，按2.1法制备。当归和川芎的鉴别：按参考文献2中方法制备[2]。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无相同颜色的斑点出现。说明本法专属性较好，收入标准。

2.2含量测定色谱条件 色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱(50mm×2.1mm，1.7μm)；流动相: 乙腈-0.1%磷酸(13:87)；检测波长：360nm；进样量：1μL；流速：0.3mL。理论塔板数按金丝桃苷计应不低于5000[3,4]。

制备溶液：对照品的制备：精密称取一定量的金丝桃苷对照品，添加一定比例的甲醇制成10.56μg/mL浓度的对照品溶液。供试品溶液：取金丝桃苷4粒(约1.0g)，研细后防置于锥形瓶中，加入80%甲醇25mL，制成的溶液加塞密封，以33 kHz，250 W的超声仪器处理1h，放冷，再次称量，不足者加80%甲醇补足，摇匀。通过0.22μm微孔滤膜对供试品进行滤过，即得所需溶液。菟丝子空白溶液：称取菟丝子空白样品1.0g，同供试品溶液制备方法制备，即得。

关于适用性与专属性的系统试验：将上述所得液体各取1.0μL，分别进样，在已经测定的色谱条件下进行标记。通过标记发现，当供试品与对照品溶液主峰相同时，色谱峰会出现近似的显现，阴性对照无吸收，对测定结果无干扰。

2.3 结 果 线性范围的考察精密吸取上述对照品溶液(10.56μg/mL)，在液相色谱仪中分别加入0.2μL、0.4μL、0.8μL、1.2μL、1.6μL、2μL的液体，根据峰面积对进样量进行回归计算，得回归方程y=9e+0.6x-724.17，R2=1。金丝桃苷含量在0.002112～0.02112μg范围内，说明进样量与峰面积值具有良好的线性关系。精密度试验：严格吸取1.0μL对照品溶液，反复进样6次，测定，结果RSD(%)=0.32，结果表明，精密度良好。重现性试验取同一批号样品6份，按照2.2项下的方法，制成供试品液，各精密吸取量1.0μL，注入液相色谱仪，测定金丝桃苷含量，结果显示RSD(%)=0.75，表明本方法重现性好。稳定性试验精密称取样品约1g，按2.2项下方法制备供试品溶液，室温放置，分别在0h、2h、4h、6h、8h、10h各进样1 次，测定，结果RSD(%)=0.84，表明本品在10h内稳定。

加样回收率试验称取已知含量(0.0858mg/g)的样品共六份，每份约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加入浓度为10.56 ug/ml对照品溶液5ml，按供试品溶液制备方法制成加样回收样品，按上述色谱条件测定，记录色谱图，计算回收率，结果见表1。

表1 金丝桃苷回收情况

取三个批次的样品(140301、140302、140303)，结果测定三批样品的含量分别为0.085mg/g、0.078mg/g、0.081 mg/g。

3 讨 论 复方菟丝子胶囊为口服制剂，具有健脾补肾、益气养血之功，因此对方中的人参、黄芪、当归、川芎等主要药物进行鉴别研究，对菟丝子中的金丝桃苷进行了含量测定的方法学研究，可以控制本品的内在质量。参照文献对本品中的淫羊藿和女贞子进行薄层鉴别，但结果显示分离效果不太好，斑点不清晰，因此该两种药材暂不纳入标准。本制剂中川芎和当归同为伞形科植物，所含化学成分相似，故对方中当归或川芎进行专属鉴别难度较大，因此选择两者共有成分鉴别当归和川芎。由于不同批次样品不一样，因此含有金丝桃苷含量有所差异，根据实验结果，以每克菟丝子含金丝桃苷(C21H20O12)不少于0.065mg为宜。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010:8，283.

[2] 杨 丽，胡昌江，周 维，等．川芎配方颗粒质量标准研究[J]．中国药业，2012，21(10) :28-29．

[3] 李秋红，王晓蕾，李延利，等.HPLC测定菟丝子炮制前后金丝桃苷和槲皮素的含量[J].中成药，2009，31(9)：1394.

[4] 赵 华, 李新莉, 王秦勇.正交设计优选盐炙菟丝子最佳炮制工艺研究[J] .陕西中医，2012, 33(9) :12-18.

(收稿2014-09-03；修回2014-10-15)

薄层色谱法 高效液相色谱法 @复方菟丝子胶囊

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A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.02.050