李仕宁 广东省医疗器械质量监督检验所 （广州 510663）

0.引言

小型蒸汽灭菌器是指电加热产生蒸汽或外接蒸汽的，灭菌室容积不超过60L，不能装载一个灭菌单元（300mm×300mm×600mm）的灭菌器。其工作原理是产生高温高压饱和蒸汽作用于微生物一定时间后，使微生物蛋白质变性从而导致微生物死亡，以达到灭菌的目的。小型蒸汽灭菌器自动控制水平高，且大多带有预真空灭菌程序，广泛应用于眼科、口腔科、手术室、生化检验及生物医学研究单位的多种耐热耐湿医疗器械的消毒灭菌。

小型蒸汽灭菌器一般由灭菌室、隔热层、门体、电磁阀、真空泵、管路系统、电气系统、主控板、控制面板、水箱和外罩壳等组成。

根据特定灭菌负载范围和灭菌周期，小型蒸汽灭菌器可分为B、N、S 三种类型，如表1 所示。

小型蒸汽灭菌器灭菌过程的监测有三种方法，物理参数监测，化学指示物监测和生物指示物监测，YY 0646-2008《小型蒸汽灭菌器 自动控制型》标准有其对应的条款要求。

表1. 小型蒸汽灭菌器类型

1.物理参数监测

1.1 饱和蒸汽温度与时间中的几项物理参数可作为小型蒸汽灭菌器灭菌性能的评价指标。YY 0646-

2008 标准中5.11.1 和5.11.2 是对这几项参数的具体要求。

1.1.1 平衡时间

灭菌室达到灭菌温度开始到负载的各部分都达到灭菌温度所需要的时间。平衡时间可反映灭菌器内蒸汽是否能快速均匀地渗透到灭菌负载中，以达到预期的灭菌控制水平。

1.1.2 维持时间

维持时间即灭菌室内参考测量点及负载各部分的温度都连续保持在灭菌温度范围内的时间。在特定的灭菌温度下要维持相应的时间才能达到灭菌效果，此试验的目的是验证各灭菌程序的最小维持时间是否大于标准要求。

1.1.3 维持时间的蒸汽温度

此试验的目的是验证在维持时间内灭菌温度是否维持在限定值内，其均匀性和波动性是否满足要求。维持时间内的灭菌温度不能有负偏差，但也不能超过灭菌温度4˚C。

图1. 温度曲线图

1.2 试验方法

使用符合标准要求的温度测量和记录仪器进行试验，温度传感器的个数和布点位置根据不同的试验负载进行放置。根据灭菌器类型（B 型、S型或N 型），制造商声称的灭菌程序对应的灭菌负载情况，运行规定的各个适用的灭菌周期。这些试验可能用到的灭菌负载有实心负载（未包装、单层或双层包装）、小量多孔渗透性负载（单层或双层包装）、满载多孔渗透性负载（单层或双层包装）、小量多孔渗透性条状物（单层或双层包装）、B 类空腔负载，按标准6.11 进行试验。图1 为无线数据采集器采集的灭菌过程对应的温度曲线图。

1.3 判定原则

1.3.1 平衡时间

标准中规定：平衡时间应不超过15s；或如果同时满足下面两个条件，平衡时间不超过30s可接受：理论蒸汽温度在升温阶段的最后10˚C 范围内，上升速度低于8˚C/min 但大于1˚C/min，在升温阶段的最后10˚C 范围内，灭菌室、所有灭菌负载的测量温度和理论蒸汽温度之间相差不大于2˚C。

查看无线数据采集器所采集到的数据，判定试验是否满足标准的规定。

1.3.2 维持时间

标准中规定：当设定的灭菌温度为l21˚C、126˚C 和134˚C 时，维持时间应分别不小于15min、10min 和3min。

查看无线数据采集器所采集到的数据，判定试验是否满足标准的规定。

1.3.3 维持时间的蒸汽温度标准中规定：在整个维持时间内，所有的可用空间和负载内的测量温度应不低于灭菌温度；不超过灭菌温度4˚C；任意两点之间不超过2˚C。

查看无线数据采集器所采集到的数据，判定试验是否满足标准的规定。维持时间内的灭菌温度不能有负偏差，但也不能超过灭菌温度4˚C。

2.化学指示物监测

YY 0646-2008 标准中5.11.3 是对小型蒸汽灭菌器进行化学指示物试验的要求。将一个化学指示物放入A 类空腔负载过程挑战装置或B 类空腔负载过程挑战装置中，运行合适的灭菌周期（根据化学指示物的反应时间选择），灭菌结束后，检查化学指示物的颜色变化是否达到指示物制造商规定的灭菌条件。图2 为化学指示物试验前后的颜色对比图，灭菌结束后化学指示物的颜色变为黑色。

图2. 化学指示物

3.生物指示物监测

YY 0646-2008 标准的5.15 灭菌效果试验是使用生物指示物置于对应的灭菌负载中，运行灭菌周期后，取出生物指示物进行培养，检查其活性来判断灭菌器的灭菌效果。

对于不同类型的灭菌器按标准6.15 的规定方法进行测试。B 型灭菌器应选择6.15.2（A 类空腔负载）和6.15.5 满载多孔渗透性负载（双层包装）的试验方法； N 型灭菌器应选择6.15.1 实心负载的试验方法； S 型灭菌器根据制造商声称的灭菌负载不同选择标准6.15 中对应的试验方法。

实心负载灭菌效果试验至少使用符合GB18281.3 的灭菌指示物5 支，其中1 支作为阳性对照组，不进行灭菌，其他生物指示物放在适合位置进行灭菌，灭菌过后，经过灭菌的生物指示物处于制造商规定的培养条件下，该生物指示物是失活的，而阳性对照的生物指示物则应保持活性状态。

A 类空腔负载灭菌效果试验使用符合GB18281.1 染菌载体的生物指示物2 组，染菌载体的尺寸为36mm×6mm×0.7mm，其中一组作为阳性对照组，另一组放于A 类空腔负载过程挑战装置内进行灭菌。灭菌过后，经过灭菌的生物指示物处于制造商规定的培养条件下，该生物指示物是失活的，而阳性对照的生物指示物则应保持活性状态。

B 类空腔负载灭菌效果试验使用符合GB18281.1 染菌载体的生物指示物2 组，染菌载体的尺寸为36mm×6mm×0.7mm，其中一组作为阳性对照组，另一组放于B 类空腔负载过程挑战装置内，每支试验圆管内放置一个生物指示物，单端开口的试验圆管底部放置染菌载体，双端开口的试验圆管中间固定染菌载体。灭菌过后，经过灭菌的生物指示物处于制造商规定的培养条件下，该生物指示物是失活的，而阳性对照的生物指示物则应保持活性状态。

小量多孔渗透性负载灭菌效果试验、满载多孔渗透性负载灭菌效果试验和小量多孔渗透性条状物灭菌效果试验,均至少使用符合GB18281.3的灭菌指示物5 支，其中1 支作为阳性对照组，不进行灭菌，其他生物指示物放在适合位置进行灭菌，灭菌过后，经过灭菌的生物指示物处于制造商规定的培养条件下，该生物指示物是失活的，而阳性对照的生物指示物则应保持活性状态。

4.结语

灭菌过程中应根据负载类型的不同选择相应类别的灭菌器及灭菌程序。不同类型的灭菌周期只能应用于指定类型物品的灭菌。对于一个特定的负载，灭菌器的选择，灭菌周期的选择和介质的提供需要对应。B 型和S 型带有真空泵，B 型灭菌器可用于A 类空腔负载的灭菌，S 型灭菌器用于制造商规定的特殊灭菌物品，可能适用于A类空腔负载的灭菌，而N 型灭菌器不带真空泵，只可以用于无包装实心负载的灭菌。

[1] YY 0646-2008 小型蒸汽灭菌器 自动控制型[S]