张 朕,朱泽兴,张树明△(1.山西医科大学研究生学院，太原 030001；.中国人民解放军第二炮兵总医院骨科，北京 100088)



·临床研究·

冰点渗透压仪定量二甲基亚砜标准曲线的建立*

张 朕1,2,朱泽兴2,张树明2△(1.山西医科大学研究生学院，太原 030001；2.中国人民解放军第二炮兵总医院骨科，北京 100088)

渗透压； 二甲基亚砜； 定量； 标准曲线

二甲基亚砜(DMSO,又名二甲亚砜)是一种由二甲基硫化物氧化合成的、无色吸湿性液体，最初来源于木浆加工废品。其化学结构使其具有高极性，硫-氧键确定DMSO的极性性质，以溶解难溶性药物的能力，其完全溶于水、常用的有机溶剂和不饱和烃[1]。此外，DMSO的化学结构使其能够通过提高渗透性而不影响皮肤和身体膜的形态特征渗透膜屏障，其优良的渗透性使其在日常生产生活中得到广泛应用[2-3]。同时，早在1972年，DMSO就被作为渗透性冷冻保护剂应用。有报道，DMSO利用其渗透特性，通过保持冻融过程中蛋白质和磷脂膜的完整性来发挥作用[4-6]。因为DMSO本身具有毒性，其检测一直是各个领域的研究方向。目前，对DMSO的检测方法包括气相色谱法、紫外线检测仪法、磁共振法、高效液相色谱法等，适用于检测各种不同的溶剂中的DMSO[7-12]。作者在研究离断肢体冷冻保护剂的渗透性时，利用微透析技术将冷冻保护剂从离断肢体中透析出来，而在检测生理盐水中的DMSO时，以上很多方法并不适用或有严重的缺陷[13]。而利用联合检测技术可以得到比较纯净的样品，从而认为溶质和溶剂的成分是明确的，故选择利用渗透压的区别来定量生理盐水中的DMSO。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 DMSO由Sigma公司生产，浓度大于或等于99.5%，细胞级；生理盐水由大冢制药生产。微量加样枪由BIO-DL公司生产，误差0.01%，不精确率0.32%；冰点渗透压仪为德国Löser公司生产的OM806型，重复性(±0.5%)，测量范围：0～2 500 mOsm/kg H2O。检测仪器、器皿均经专业人员校准。

1.2 方法 所有操作均在第二炮兵总医院检验科完成，室温恒定17.9 ℃。以DMSO为溶质，生理盐水为溶剂，依次配制体积比浓度为1%～15%v/v DMSO的溶液，每个样品100 μL液体，每个浓度分别滴定6个样品；另配制100 μL浓度为1%v/v DMSO 6个样品，依次成倍稀释，得到浓度为0.5%v/v、0.25%v/v、0.125%v/v、0.062 5%v/v、0.031 25%v/v DMSO的溶液。利用冰点渗透压仪检测，每次检测结束后擦拭检测探针。

1.3 统计学处理 利用SPSS 17.0软件进行配对样品t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

图1 滴定标准浓度DMSO渗透压结果

表1 滴定标准浓度DMSO渗透压统计描述(mOsm/kg H2O)

图2 拟合曲线图

3 讨 论

当一种溶质加入到一种纯溶剂中时，溶液会发生四种变化，即冰点降低、沸点升高、渗透压升高、蒸汽压降低，这些变化被称为稀溶质的依数性；而在物理化学中，任何溶液，如果其单位体积溶液所溶解的溶质的颗粒总数相同，则引起溶液冰点下降的数值亦相同，此被称为拉乌尔冰点原理，既渗透压摩尔浓度与冰点温度下降值为线性关系[15]。冰点渗透压仪就是利用以上理论通过检测溶液冰点的变化来测定其渗透压的仪器，单位为mOsm/kg H2O。

将本文结果应用于研究离断肢体冷冻保护剂的渗透性，利用微透析(MD)将冷冻保护剂从离断肢体中透析出来，灌流液为生理盐水，当DMSO的浓度不足时，回收样品的渗透压与生理盐水的渗透压一致，结果并未受组织内生物小分子物质的影响；当提高DMSO的浓度时，回收样品的渗透压开始随时间的变化而升高，所有可以推断MD探针在断肢中透析的小分子生理成分并不足以改变回收透析液的渗透压，该实验方法具有其可行性。

本文通过对滴定标准浓度DMSO(溶剂为生理盐水)通过冰点渗透压仪进行检测，认为该检测方法简单、便捷、有效、费用低，得到其回归方程公式2，敏感性s=0.1%v/v，检测范围为0.1%～10%v/v，区分度d=0.1%v/v，不精确度c=±2.35%，在检测范围内。而随着DMSO的体积浓度提高，溶液渗透压随之提高，该方法亦可用于其他溶质、溶剂明确的、单一溶质为变量的溶液检测中。

志谢：第二炮兵总医院检验科在本实验过程中所提供的帮助。

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全军“十一五”医药卫生科研基金资助项目(08G051)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.08.029

A

1672-9455(2015)08-1101-02

2014-11-10

2014-11-21)

△通讯作者，E-mail:zsmep@tom.com。