麦静愔，汪美凤，候天禄，平 键，陈高峰，成 扬

黄芪总黄酮（Total flavonoids of astragalus，TFA）是从黄芪中分离的主要活性成分，具有保肝、免疫调节、抗氧化、抗细胞凋亡、抗病毒和抗肿瘤等多种生物学作用[1]。肝硬化是在肝炎病毒、酒精、血吸虫、工业毒物、药物等致病因子的有害刺激作用下，发生肝细胞损伤、弥漫性变性坏死、肝细胞结节状再生，肝脏呈进行性、弥漫性纤维病变，纤维结缔组织增生、分割包绕形成假小叶，肝脏缩小、变硬，形成肝硬化，出现肝功能减退、门脉高压、腹水等表现。如何逆转肝硬化仍然是临床面临的难题[2]。本课题组前期研究发现TFA能够降低肝硬化大鼠肝组织羟脯氨酸水平，减轻肝窦狭窄，抑制假小叶形成，表明TFA具有较好的抗肝纤维化作用[3]。本研究采用二甲基亚硝胺（DMN）诱导经典的肝硬化大鼠模型，应用TFA干预，以观察肝硬化大鼠肝组织脂肪酸转位酶（Fatty acid translocase，FAT）和环氧化酶2（Cyclooxygenase 2）表达的变化。

1 材料与方法

1.1 实验动物、药物与试剂 53只SPF级雄性SD大鼠，体质量（150±10）克，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，饲养于我校实验动物中心SPF实验室，普通饮食，自由饮水。TFA纯度为80%，由我校中药学院提供。DMN购自日本东京化成工业株式会社。TRIzol总RNA抽提试剂购自美国Invitrogen公司。cDNA合成试剂盒和PCR试剂盒均为加拿大Fermentas公司产品。PCR引物委托上海捷瑞生物工程有限公司合成。SYBR Green EX Taq为德国Gierner公司产品。BCA试剂盒购自江苏碧云天生物技术研究所。抗环氧化酶2多克隆抗体和抗FAT单克隆抗体购自美国EPITOMICS公司。抗GAPDH抗体购自上海康成生物。Odyssey IRDye 680 conjugated山羊抗兔IgG、IRDye 800CW驴抗小鼠IgG、Odyssey Blocking Buffer均产自美国Li Cor公司。……