张 亮，于 澜，叶 伟，李璞媛，张芳琳，程林峰

汉滩病毒（Hantaan virus,HTNV）隶属于布尼亚病毒科汉坦病毒属。1976年，韩国学者李镐汪于该国疫区汉滩河流域黑线姬鼠的肺组织中首次成功分离该病毒[1]。该病毒主要宿主为鼠类等啮齿类动物，一般通过动物排泄物污染而经由呼吸道、消化道及破损的皮肤等途径传播给人类，引起肾综合征出血热（hemorrhagic feverwith renalsyndrome,HFRS）[2]，主要临床表现为发热、出血和急性肾损伤[3]。我国是世界上HFRS疫情最严重的国家之一，具有流行范围广、发病人数多、病死率高等特点[4-5]。由于HFRS的宿主广泛，传播途径多，到目前为止临床上尚缺乏特异有效的治疗药物，因此其防治任务十分艰巨。近年来，国内外虽已研制出HFRS的灭活疫苗，但从应用情况来看，该类疫苗仍存在一些不足：主要是其诱导机体产生中和抗体的能力较弱，刺激机体产生的细胞免疫应答欠佳以及存在一定的安全性隐患等缺点[6]。因此，HFRS新型基因工程疫苗的研发一直是HFRS预防领域的研究热点。

在HFRS基因工程疫苗的研究中，目前主要是利用HTNV包膜糖蛋白（glycoprotein,GP）和核衣壳蛋白（nucleocapsid protein,NP）作为抗原组分[7]。GP是HTNVM基因编码的重要结构蛋白，由Gn和Gc两个糖蛋白组成，研究表明，HTNV的多数中和抗原位点集中在GP上，但是GP的免疫原性相对较弱，刺激机体产生的中和抗体出现较晚，且滴度不高，而中和抗体在抗HTNV感染中至关重要[8]；NP由病毒S基因编码，虽然免疫原性强，但其中和抗原位点少，主要刺激机体产生特异性细胞免疫应答[9-10]。本课题组前期研究发现，NP的抗原位点主要位于HTNVS基因0.7 kb片段（即编码NP氨基端aa1～274片段，S0.7）上，且该截短片段与完整NP对机体的免疫效果基本相同[11]。……