朱真，万建青，杨挺英，康凯

(中国兽医药品监察所，北京 100081)



支原体培养基质控菌株菌种代次与生长曲线研究

朱真，万建青*，杨挺英，康凯

(中国兽医药品监察所，北京 100081)

为探究支原体液体培养基和固体培养基质控菌猪鼻支原体生长规律，以活菌浓度，菌液pH值为指标，比较了不同代次与不同传代方式猪鼻支原体生长情况。结果显示：3%与10%浓度传代，0～48 h内，活菌浓度持续上升，菌液pH值持续下降，3%浓度传代的支原体生长较均匀，更利于菌种生长；1～5代支原体活菌浓度无显著差异；通过0.3 mL菌液加9.7 mL培养基传代，20组菌液平均浓度为(24.4±5.7)×108CFU/mL，通过0.9 mL菌液加29.1 mL培养基传代，菌液平均浓度为(7.2±2.1)×108CFU/mL，两种浓度差异极显著，前种传代方式更有利于支原体生长。本次试验为支原体液体和固体培养基的质控工作标准化提供参考。

猪鼻支原体；培养基质控；菌种代次；生长曲线

支原体污染是细胞培养过程中常见和棘手的污染源，培养法是支原体检验的常用方法[1-3]。国内已有通过生长滴度测定法，获得牛支原体OF2株、山羊支原体山羊肺炎亚种分离株M1601在不同培养基中生长曲线的报道[4-5]，也有人通过活菌计数测定法获得人型支原体(Mh)生长曲线[6]。测定不同时刻牛支原体的OD值和pH，亦可绘制该株牛支原体的生长曲线，但只能是在一定程度上反映生长趋势，而无法进行计量描述，有一定局限性[7]。

猪鼻支原体(CVCC361)作为支原体液体培养基和支原体固体培养基的质控菌株[8]，其生长曲线于2012年被国内学者绘制完成，但就培养基质控菌株的标准化工作而言，其传代次数、菌液接种适宜比例、生长滴度变化等还需进一步考证[9]。……