邓毅 吴雪峰 雷鸣 吴建华

对比检测血清中抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关节炎的诊断价值评估

邓毅 吴雪峰 雷鸣 吴建华

目的探讨检测血清中抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)抗体对类风湿关节炎(RA)的诊断价值。方法 收集RA患者86例(RA组)、非RA患者44例(非RA组)和健康体检者32例(对照组), 分别采用酶联免疫吸附法检测抗-CCP抗体水平, 并以免疫透射比浊法检测类风湿因子(RF), 比较各组的检测结果。结果 RA组的抗-CCP抗体及RF水平均显著高于非RA组与对照组(P＜0.05)；RA组的抗-CCP灵敏度为69.77％, 显著低于RF的灵敏度81.40％(P＜0.05)；抗-CCP对RA的诊断特异度与阳性预测值显著高于RF(P＜0.05)；抗-CCP联合RF的灵敏度、特异度及阴性预测值均获得显著提高, 与单项检测相比, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 血清抗-CCP抗体检测对于RA的诊断具有较高的特异性,联合RF检测能够提高诊断准确率与敏感性。

类风湿关节炎；抗环瓜氨酸肽抗体；临床诊断

类风湿关节炎(RA)是临床常见自身免疫性疾病, 主要特征为对称性关节滑膜炎, 如不及时治疗可诱发关节强直、畸形甚至是功能丧失等[1］。故早期诊断并予以有效治疗对于延缓或者逆转关节破坏, 改善临床预后至关重要。由于RA早期发展迅速, 病情复杂, 对于缺乏典型临床表现以及X线特征且类风湿因子(RF)检测为阴性者, 早期临床诊断难度较大,导致患者丧失最佳治疗时机[2］。抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)抗体是近年临床推出的RF诊断敏感指标, 本院通过比较RA与非RA疾病以及健康志愿者的血清抗-CCP抗体以及RF水平,探讨了抗-CCP抗体检测对RA的诊断价值, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2012年1月～2014年1月, 本院门诊或住院的RA患者86例作为RA组, 其中, 男29例, 女57例,年龄22～85岁, 平均年龄(46.33±13.26)岁。同期就诊的非RA患者44例作为非RA组, 其中, 男12例, 女32例, 年龄20～79岁, 平均年龄(45.53±11.79)岁, 包括8例结缔组织病,6例系统性红斑狼疮,6例干燥综合征,5例系统性硬化症,5例强直性脊柱炎,5例痛风,5例骨性关节炎,4例自身免疫性肝病。同期健康体检者32例作为对照组, 其中, 男11例,女21例, 年龄23～81岁, 平均年龄(44.91±13.03)岁。三组年龄与性别构成差异均无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 所有受试者均晨取空腹静脉血3 ml, 常规分离血清并收集编号, 置于-20℃低温冰箱中保存待检。

1.2.1 抗-CCP抗体检测 采用酶联免疫吸附法(ELISA)间接法进行抗-CCP抗体的检测, 试剂盒由上海富纯中南生物技术有限公司生产。取待测血清标本, 以缓冲液按照1∶101进行稀释, 然后取经稀释后的待测血清标本、阳性与阴性质控样本以及标准参照品100 μl, 分别加入到96孔板的反应微孔之中, 在室温条件下孵育60 min, 然后进行洗涤3次, 再向每孔中加入碱性磷酸酶标记抗体100 μl, 在室温条件下孵育30 min, 再加入100 μl显色剂进行显色30 min, 最后加入100 μl反应终止液终止反应。置于酶标仪中在450 nm以及620 nm双波长下测定吸收光度值(OD)。对于抗体浓度高于曲线范围的, 再次稀释血清标本重新测定。操作均严格按照试剂说明书以及实验室操作规程执行, 以抗-CCP抗体≥25 RU/ml判定为阳性。

1.2.2 RF检测 以免疫速率散射比浊法进行RF检测, 仪器为罗氏公司生产的Modular DPP型全自动生化分析仪, 试剂盒由上海捷门生物技术合作公司提供, 操作严格按照说明书以及实验室操作规程执行, 以RF≥25 IU/ml判定为阳性。

1.2.3 抗-CCP抗体联合RF检测 以抗-CCP抗体和RF中任意一项或者两项均为阳性判定为联合检测阳性, 两项均为阴性时判定为阴性。

1.3 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(％)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组检测结果比较 RA组的抗-CCP抗体及RF水平均显著高于非RA组与对照组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.2 各组的阳性检出率与诊断效能比较 抗-CCP抗体对RA的诊断灵敏度显著低于RF, 差异具有统计学意义(P＜0.05)；但特异度与阳性预测值显著高于RF, 差异具有统计学意义(P＜0.05)；将抗-CCP抗体与RF联合检测后, 灵敏度、特异度及阴性预测值均获得显著提高, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表1 各组检测结果比较(±s)

表1 各组检测结果比较(±s)

注：与非RA组和对照组比较,aP＜0.05

组别 例数 抗-CCP抗体(RU/ml) RF(IU/ml) RA组 86 288.91±133.52a 128.31±45.79a非RA组 44 3.63±1.18 6.92±4.33对照组 32 2.42±0.85 4.12±2.09

表2 各组的阳性检出率与诊断效能比较(n)

3 讨论

RA主要是由于体内IgG分子变性, 导致机体生成抗变形IgG自身抗体, 即RF而发病。RF能够与变性IgG相结合形成免疫复合物大量沉积在关节滑膜上, 导致补体激活, 诱发慢性以及渐进性免疫炎症损伤, 诱发RA[3］。因此, RF检测是临床诊断RA的常用血清指标, 阳性率可到70％左右。但临床研究发现, 在系统性红斑狼疮、慢性肺结核以及干燥综合征等疾病中也可检出RF阳性, 甚至在部分健康人群中也可检出滴度较低的RF。故血清RF检测对于RA虽然具有较高的灵敏度, 但特异度较低, 极易发生误诊[4］。

近年来, 临床通过检测血清抗-CCP抗体进行RA的诊断, 诸多研究证实了其具有较高的特异性[5］。本研究中, 血清抗-CCP抗体检测对于RA的诊断特异度达93.18％, 阳性预测值达95.24％, 充分体现了其良好的诊断效能, 认为检测血清抗-CCP抗体对于RA的诊断以及病情严重程度判断具有重要预测价值。此外, 本研究还发现, 将抗-CCP抗体检测与RF检测联合应用后, 灵敏度提高至91.86％, 特异度、阳性及阴性预测值分别达77.27％、88.76％、82.93％, 诊断效能得以提高。认为将两者联合检测有利于提高RA的诊断灵敏度, 提高诊断准确率。

综上所述, 血清抗-CCP抗体检测对于RA的诊断具有较高的特异性, 联合RF检测能够提高诊断灵敏度以及准确度, 降低误诊或漏诊率, 为临床诊断与治疗决策提供可靠信息, 具有重要临床应用价值。

[1]葛艳玲, 宋慧, 赵育靖, 等.单独检测抗环瓜氨酸肽抗体以诊断类风湿关节炎.中国实验诊断学,2014,18(1):94-97.

[2]邢桂芝, 马丽明, 安媛, 等.联合检测类风湿因子与抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关节炎的诊断价值.中国实验诊断学,2014,18(6):990-992.

[3]刘志昌, 肖游君, 劳敏曦, 等.抗环瓜氨酸肽抗体与类风湿关节炎患者成纤维样.中国病理生理杂志,2013,29(12):2278-2282,2292.

[4]邓连瑞, 徐江霞, 漆坚, 等.抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子对类风湿关节炎的诊断价值.山东医药,2013,53(9):85-87.

[5]岳涛, 程鹏, 范晓蕾, 等.抗环瓜氨酸肽抗体和关节磁共振成像对早期类风湿关节炎的意义.中华医学杂志,2011,91(23):1633-1636.

Diagnostic value evaluation of serum anti-cyclic citrullinated peptide antibody by contrast detection for rheumatoid arthritis

DENG Yi, WU Xue-feng, LEI Ming, et al. Department of Inspection, Changshu City the First People’s Hospital, Changshu415003, China

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of serum anti-cyclic citrullinated peptide (anti-CCP) antibody detection for rheumatoid arthritis (RA).MethodsThere were86 RA patients (RA group),44 non-RA patients (non-RA group), and32 health physical examination people (control group). The level of anti-CCP antibody was detected by enzyme linked immunosorbent assay, and rheumatoid factor (RF) was detected by immunity transmission turbidity. The detection results of every group were compared.ResultsThe Anti -CCP antibody and RF levels of the RA group were significantly higher than those in the non-RA group and the control group (P<0.05). The sensitivity of anti-CCP of the RA group was69.77％, which was obviously lower than81.40％ of RF (P<0.05). Anti-CCP had higher diagnostic specificity and positive predicted value for RA than RF (P<0.05). The sensitivity, specificity, and negative predicted value of anti-CCP combined with RF were all significantly increased. It had a statistically significant difference from single detection (P<0.05).ConclusionSerum anti-CCP antibody detection has high specificity for the diagnosis of RA, and its combination with RF in detection can improve the accuracy and sensitivity of diagnosis.

Rheumatoid arthritis; Anti-cyclic citrullinated peptide antibody; Clinical diagnosis

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.02.004

2014-10-27］

415003 常德市第一人民医院检验科

吴雪峰