任　方，易　忠，米晓云，魏　婕，马文戈，郭会玲，苗书魁，汪丽群，王　延，薛　英，黄　炯，魏玉荣＊（.新疆畜牧科学院兽医研究所，新疆乌鲁木齐830000；.新疆维吾尔自治区动物卫生监督所，新疆乌鲁木齐830063；3.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐83005）



泰勒虫重组抗原Tams1-spag 基因原核表达与纯化

任方1，3，易忠1，米晓云1，魏婕1，马文戈1，郭会玲1，苗书魁1，汪丽群2，王延1，薛英1，黄炯1，魏玉荣1＊
（1.新疆畜牧科学院兽医研究所，新疆乌鲁木齐830000；2.新疆维吾尔自治区动物卫生监督所，新疆乌鲁木齐830063；3.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐830052）

摘 要：为了在低成本的情况下，得到高浓度、高纯度的环形泰勒虫表面重组抗原的融合蛋白，设定表达过程中不同的OD600nm、IPTG浓度与诱导时间，探索最佳表达条件。通过KCl染色法切胶后分别经透析袋电洗脱法与快速离心法回收目的蛋白。对上述试验的蛋白样品进行SDS-PAGE和Western blot检测。结果表明，在OD600nm=1时加入浓度为1mmol/L IPTG，过夜诱导时，重组蛋白的表达量最大。在KCl染色法切胶回收目的条带的基础上，电洗脱法与快速离心法均能得到同等浓度的高纯度目的蛋白，经Western blot检测重组蛋白的生物活性没有改变，仍具有良好的反应原性。

关键词：环形泰勒虫；重组蛋白；原核表达；蛋白纯化

环形泰勒虫病是由寄生于动物红细胞、淋巴细胞及巨噬细胞内的环形泰勒虫（Theileria annulata）引发的一种蜱传急性、热性血液原虫病。此病呈地方流行性，表现为急性经过。不仅发病率与病死率较高，当病畜耐过此病或治愈后，体内仍存在低水平的虫体，导致抵抗力下降，或其他疾病暴发时再次诱发此病［1］。……