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多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV 检测方法的建立

2015-06-18温青娜周玲玲杨菊凤林祥群

动物医学进展 2015年6期
关键词:检测

温青娜,周玲玲,申 红,杨菊凤,林祥群

(1.河南科技学院,河南新乡 453000;2.广东中大南海海洋生物技术工程中心有限公司,广东广州 510330;3.石河子大学,新疆石河子 832003;4.山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊 261061;5.石河子职业技术师范学院,新疆石河子 832003)

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起猪的一种接触性病毒性传染病,典型症状为怀孕母猪流产、早产、产死胎和木乃伊胎增多,仔猪主要为呼吸困难、高死产率等特征。自我国首次分离到PRRSV以来,该病先后在国内的多个省市暴发和流行,给我国养猪业造成巨大的经济损失,成为危害当今养猪业的主要疫病之一[1]。PRRSV有欧洲型、美洲型毒株。起初,欧洲型只发生在欧洲,而美洲型则只限制在亚洲和北美。但是近年来,PRRSV打破了原有地理因素的限制,在欧洲、北美和亚洲地区,欧洲型及美洲型PRRSV已经被同时监测到[2]。近年来国内也有欧洲型PRRSV发病的报道[3]。此外,也有人们从组织病料中分离出疑似欧洲型PRRSV疫苗株的报道[4]。国内猪场中欧洲型PRRSV的阳性检出加剧了我国猪繁殖与呼吸综合征的鉴别与防控难度。美洲型和欧洲型PRRSV的基因序列同源性不是很高,但二者在基因组结构组成、功能和生物学特征等方面均具有一致性[4]。目前,国内猪繁殖与呼吸综合征毒株主要是以美洲型为主,经典毒株与高致病性变异毒株并存,同时欧洲型也有感染,且呈上升趋势[5]。目前国内尚未有鉴别检测不同型别PRRSV的报道。本研究根据多重实时荧光定量PCR的原理,建立一种快速鉴别美洲型、欧洲型和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测方法,针对猪群中的不同型别的PRRSV进行检测,具有良好的临床应用价值。……

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