唐 娜，孙翠平，王玉茂，刘吉山，张 倩，贾 锐，谢金文，李书光，苗立中，沈志强，＊

（1.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州 256600；2.山东绿都生物科技有限公司，山东滨州 256600）

2014年春季，羊小反刍兽疫（Peste des petits ruminants，PPR）在我国呈现暴发、流行态势［1］，迅速蔓延到全国多个省、市、自治区，引起全国广泛关注。小反刍兽疫俗称羊瘟，是由小反刍兽疫病毒（Peste des petits ruminants virus，PPRV）引起的一种急性病毒性传染病，主要感染山羊、绵羊等小反刍动物，以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征，发病率和病死率均高，与由产气荚膜梭菌（Clostridiumperfringens）引起的羊梭菌性疾病共同成为2014年影响国内养羊业的两大主要传染病［2］。

研究发现，春季接诊病羊临床诊断中，羊小反刍兽疫与产气荚膜梭菌性疾病临床症状相似，都可表现腹泻、死亡，临床剖检可见出血性肠炎，胃黏膜出血坏死、肾脏变软等病变［3-4］。这一方面提示存在小反刍兽疫与产气荚膜梭菌共同感染或继发感染的可能，另一方面也给两种疫病的鉴别诊断提出了更高的要求。鉴于此，本实验室根据2014年流行的小反刍兽疫病毒N蛋白和产气荚膜梭菌α毒素编码的两段基因序列特点，综合应用RNA／DNA提取技术和PCR／RT-PCR技术，建立了鉴别羊小反刍兽疫病毒与产气荚膜梭菌的双重PCR检测方法，为进一步开展羊小反刍兽疫与产气荚膜梭菌病的诊断与防控研究和诊断试剂开发应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 毒株和菌株 试验所用的PPRV毒株来自天康畜牧生物技术股份有限公司生产的小反刍兽疫活疫苗，所用产气荚膜梭菌株为购自中国兽医微生物菌种保藏管理中心的CVCC C57-1菌株。……