王世民，王彩蝶，张艳楠，苏　艳（.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐83005；.新疆农业大学食品科学与药学学院，新疆乌鲁木齐83005）



马流产沙门菌fimY 基因同源性分析及蛋白表达

王世民1，王彩蝶1，张艳楠2，苏艳1
（1.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐830052；2.新疆农业大学食品科学与药学学院，新疆乌鲁木齐830052）

摘 要：为对马群中沙门菌进行快速、准确检测，根据GenBank公布的沙门菌菌毛蛋白fimY基因为模板设计一对特异性引物，用PCR方法扩增fimY部分基因。将fimY目的基因亚克隆至PGEX-4T-2原核表达载体，转入BL21（DE3）感受态细胞后用IPTG进行诱导表达，并对目的蛋白进行反应性检测。结果表明，克隆fimY基因大小为490bp；成功构建fimY原核表达载体PGEX-fimY，经SDS-PAGE显示带有GST标签的目的蛋白大小为47ku，与预期相符；Western blot证明，目的蛋白fimY能够结合沙门菌标准阳性血清，为建立马流产沙门菌间接ELISA检测方法奠定了基础。

关键词：马流产沙门菌；fimY；抗原性；同源性

沙门菌血清型繁多，耐药性较为普遍，能够感染人和多种动物，对人类健康及畜牧业养殖造成很大危害［1-2］。但马流产沙门菌（Salmonella abortus equi）只感染马属动物，具有高度专嗜性，对其他动物无致病性［3］。马流产沙门菌主要危害孕马和幼驹，引起孕马流产、幼驹心肌炎等症状，马群感染后会迅速传播、流产率可达100%，对养马业造成很大的经济损失，严重阻碍了养马业的发展。目前对细菌性马流产的诊断标准依旧为传统血清凝集试验，该试验敏感性和准确性不高，试验周期长，结果判断有很大的主观性，已远远不能适应现代养马业的发展，需研究一种新方法来适应现代养马业的发展［4-7］。……