梁云浩，曹琛福，叶奕优，花群义，张彩虹，曾少灵，陶　虹，廖立珊，刘建利，唐　勇，吕建强＊（.深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，广东深圳58045；.暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室，广东广州5063）



非洲猪瘟病毒p72蛋白的真核表达及反应原性鉴定

梁云浩1，2，曹琛福1，叶奕优1，花群义1，张彩虹1，曾少灵1，陶虹1，廖立珊1，刘建利1，唐勇2，吕建强1＊
（1.深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，广东深圳518045；2.暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室，广东广州510632）

摘 要：将p72基因克隆到载体pFast Bac/NT-TOPO上，转化大肠埃希菌DH5α。将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72，转化大肠埃希菌DH10Bac，获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72。通过脂质体介导，将bacmid-p72转染sf9细胞，获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞，72h后收集细胞，超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示，重组蛋白大小约78ku，且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应。说明表达的重组蛋白为可溶性的，并具有良好的反应原性。

关键词：非洲猪瘟病毒；p72蛋白；脂质体介导；重组杆状病毒

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是一种猪的急性传染病，因猪感染非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起。非洲猪瘟的主要临床症状有高热、皮下有红斑、精神萎靡、进食减少，眼角结膜出现炎症，排泄物中有血丝等［1］。健康猪感染强毒株后3d～7d，出现临床症状，4d～10d后感染猪死亡，病死率接近100%。弱毒株感染后，患猪能够依赖自身免疫系统逐渐康复，但将终生携带非洲猪瘟病毒，成为非洲猪瘟的传染源。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物传染病［2］。……