嵇海澄 李孝壁 李 琴 姜 涛 胡春勇

江苏豪森药业股份有限公司，江苏连云港 222000

甲磺酸伊马替尼（imatinib mesylate）化学名称为4-（4-甲基-1-哌嗪)甲基-N-4-甲基-3-4-（3-吡啶）-2-嘧啶氨基苯基-苯甲酰胺甲磺酸盐，是瑞士诺华公司（Novartis）研发的酪氨酸激酶抑制剂类药物。2001 年5 月10 日，伊马替尼以“具有突破性的抗肿瘤机制”获得美国FDA 的特快审批，商品名为“Gleevec”（格列卫），并于2001 年11 月7 日欧盟批准格列卫上市，最初用于α-干扰素给药失败胚细胞危象病期、慢性病期、加速病期的粒细胞白血病（慢性骨髓血癌）临床治疗用药。随后，美国FDA 又批准了伊马替尼的第二个适用症，用于治疗胃肠道间质细胞瘤的治疗。作为罕见病用药，经过全球广泛的临床使用后，获得了医学界的高度评价，于2002 年12 月23 日正式取得美国FDA 的全面认可，批准作为慢性粒细胞白血病一线治疗用药，从而被医学界誉为近年“有重大突破性”的抗肿瘤靶向小分子口服药物制剂[1-2]。二甲胺是广泛存在于自然环境和食品中，与自然界中存在的亚硝酸根易形成具有很强的动物致癌性和致突变型的N-亚硝基化合物[3-4]，对人及动物有很大的危害，故此有必要对二甲胺进行严格控制。另外二甲胺是甲磺酸伊马替尼合成工艺过程中不可避免要产生的副产物，为了有效保证药品质量，有必要对甲磺酸伊马替尼原料药中可能残留的二甲胺进行严格控制。离子色谱[5-8]是作为有效分离和检测阴、阳离子的液相色谱方法，已经被广泛的应用在食品、药品、化工、化妆品等多个行业，作为一种有效的分离手段，2010 年版中国药典二部附录对离子色谱法的原理、应用及要求进行了相关描述和规定[9-10]，而且离子色谱在药物中使用的越来越多[11-14]。本论文根据二甲胺的特性，建立了离子色谱测定二甲胺残留的方法，该方法快速、准确，可对甲磺酸伊马替尼的质量进行有效的控制。

1 仪器与试剂

仪器：电子分析天平，梅特勒XS105；热电DIONEX ISC-2100 离子色谱，Dionex CERS500 抑制 器，DS6 Heated Conductivity Cell 电 导 检 测 器；CHROMELEON 6.8 化学工作站；色谱柱：阳离子交换色谱柱（Dionex IonPac CS12A 4×250mm）。

试剂：盐酸二甲胺为国药集团化学试剂股份有限公司；甲磺酸为SIGMA-ALDRICH，纯化水由本公司生产。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

照离子色谱法（中国药典2010 年版二部附录V J）测定。用阳离子交换色谱柱（Dionex IonPac CS12A 4mm×250mm）；采用以20mmol/L 甲磺酸溶液作为为流动相，流速为1.0mL/min；柱温为30℃；检测器为电导检测器，检测方式为抑制电导检测，检测器温度为35℃。

2.2 专属性试验

考虑到样品中含有一定量的常规离子会干扰测定，我们将Li+、Ca2+、Mg2+、Na+、K+、NH4+及二甲胺按一定比例混合。各离子的分离情况见表1，专属性图见图1。从表和图中可以看出常规阳离子不干扰二甲胺的测定，说明该方法的专属性很好。

表1 方法专属性

图1 方法专属性色谱图

2.3 定量限与检测限

在上述色谱条件下，精密称取盐酸二甲胺适量，置量瓶中，用水溶解，制成储备液。逐步稀释储备液，分别进样至信噪比（峰高／基线噪声）3±1 为检测限，至信噪比10±2 为定量限，见表2。

表2 二甲胺的检测限与定量限

2.4 线性关系试验

按照标准限度浓度配制线性试验溶液，二甲胺在0.10 ～9.84μg/mL，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，线性回归方程为：A=0.1279C-0.0016，相关系数r=1.0000，说明本方法线性良好，见表3。

表3 线性关系

2.5 重复性

精密称取盐酸二甲胺适量，用水溶解并定量稀释制成每1 毫升含二甲胺约3μg 的溶液，作为对照品溶液。按上述色谱条件，连续6 针进样对照品溶液，记录色谱图，计算峰面积的相对标准偏差RSD，见表4。

表4 重复性

由表可见，二甲胺的峰面积的RSD 为0.11%，表明方法的重现性好。

2.6 回收率测定

精密称取盐酸二甲胺21.31mg，置50mL 量瓶中，用水溶解稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ～100mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为二甲胺含量母液备用。

表5 回收率测定

以二甲胺含量限度（0.05%）的浓度为基准100%，分别精密量取上述母液1.0mL、2.5mL、5.0mL、7.5mL 置 含 基 质 样 品 的20mL 量 瓶 中，用水稀释至刻度，分别配制成限度为50%、100%和150%的溶液各三份，作为供试品溶液。另精密称取盐酸二甲胺适量，用水溶解并定量稀释制成每1mL 含二甲胺约3μg 的溶液，分别精密量取上述溶液各25μL 注入离子色谱仪，记录色谱图，测量峰面积，采用外标法计算回收率，结果见表5。

样品测定的平均回收率为97.5%，RSD 为1.8%（n=9），表明该方法检测甲磺酸伊马替尼中二甲胺含量准确、可靠。

3 讨论

本研究建立了二甲胺的测定方法，并通过对二甲胺的专属性、检测限、定量限，线性范围，重复性、回收率等项目的考察，充分说明本文确定的方法能有效、准确的测定甲磺酸伊马替尼中可能残留的二甲胺。

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