红鳍东方鲀防御素db-1基因的原核表达分析

2015-02-17徐进仇雪梅高长富王秀利

大连海洋大学学报 2015年1期

徐进，仇雪梅，高长富，王秀利

(大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室，辽宁大连116023)

近年来，水产养殖业中抗生素滥用现象十分严重，诱发了“超级细菌”［1］等多抗性细菌和抗生素残留等一系列问题，对人类的健康以及生态平衡造成了严重影响。因此，开发生产新型的抗菌、抗病原微生物制品具有深远的意义。

防御素 (defensin)是机体非特异性免疫的重要组成部分，是一种富含半胱氨酸的小分子阳离子多肽，相对分子质量为2000～6000。根据其分子内二硫键的不同，将其分为α-防御素、β-防御素、θ-防御素、昆虫防御素和植物防御素［2］。防御素广泛存在于动植物体内，在抵抗体外病原微生物入侵方面起着重要作用，对细菌［3］、真菌［4］和包膜病毒［5］等具有广谱抗性。鱼类的防御素对革兰氏阴性菌和阳性菌都有较好的抑菌杀菌功效［6］，同时还可以增强鱼体的免疫反应［7］，提高免疫力。鱼类防御素本身是一种鱼源多肽，无耐药性［8］，也不会引发生态问题，是海洋鱼类中值得开发的一种资源。然而，从鱼体中直接提取该蛋白操作复杂、成本高、产量少，不能大规模产业化生产，限制了此类蛋白的拓展应用前景。

本研究中，通过原核表达方法在大肠杆菌中高效表达红鳍东方鲀Takifugu rubripes防御素db-1基因，可快速、高效、大量获得这种重组防御素蛋白，该蛋白可作为杀菌抑菌制剂和免疫增强剂，为鱼类的健康养殖、可持续发展奠定基础。