赵 敏

丹参酮ⅡA乳剂对小鼠脑缺血的保护作用

赵 敏

目的 探讨丹参酮ⅡA对脑损伤、脑缺血或脑缺血再灌注诱导的小鼠的保护作用。方法 采用小鼠断头模型、小鼠脑卒中模型、小鼠脑缺血再灌注模型，观察丹参酮ⅡA注射乳剂对小鼠断头后存活时间、喘气次数，小鼠脑卒中后的神经行为，小鼠脑缺血再灌注后脑内SOD活性、MDA含量的影响。结果 丹参酮ⅡA能延长小鼠断头后的存活时间、增加断头后的喘气次数，改善脑卒中小鼠的神经行为，提高脑缺血再灌注损伤后小鼠脑组织中SOD酶活性，降低MDA含量。结论 丹参酮ⅡA注射乳剂对小鼠脑缺血及脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

丹参酮ⅡA注射乳剂；脑缺血；脑缺血再灌注

为了解决丹参酮ⅡA不溶于水，成盐后注射给药不易透过血脑屏障，将丹参酮ⅡA做成微乳制剂，在不改变其理化性质的基础上，保持其原有的脂溶性和穿过脂双层生物膜、透过血脑屏障的能力。[1，2]本文利用小鼠脑缺血及脑缺血再灌注模型[3]，观察丹参酮ⅡA对脑缺血的保护作用，探讨其作用机制。

1 准备

丹参酮ⅡA注射乳剂（0.3mg/mL），用5%葡萄糖注射液稀释至所需浓度[4]，MDA、SOD 试剂盒[5]。昆明种小鼠，体质量 18～24g。CL-7200全自动生化分析仪。所有实验数据均以表示，采用SPSS18.0统计软件进行数据处理，组间比较采用LSD检验，以P＜0.05为差异有显著性。

2 方法

2.1 小鼠断头喘气模型 取小鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。实验组分别尾静脉TanⅡA注射乳剂7.8、3.9、1.9mg/kg；阳性对照组尾静脉注射TanⅡA磺酸钠注射液5.2mg/kg；空白对照组尾静脉注射等容量的5%葡萄糖注射液20mL/kg。[6]给药10min后，迅速从小鼠双耳后颈部断头，观察小鼠喘气次数及喘气的时间，实验结果进行LSD检验。

2.2 小鼠脑卒中模型 取小鼠雄性50只，分组、给药同“2.1”。给药后10min小鼠用乙醚浅麻醉，分离两侧颈总动脉及迷走神经，左侧颈总动脉连同迷走神经下置一根直径为0.2mm的细钢丝，结扎后钢丝抽出，右侧颈总动脉及迷走神经完全结扎。术后每0.5小时记录1次，并计算3次分数总和。[7]

评分标准：①毛蓬乱竖起，动作缓慢或活动减少，触耳反应加强，眼睑下垂，脑卒中指数各1分，总计4分；②头翘起，眼球固定，后肢向外向后伸展，转圈，抽搐或痉挛，脑卒中指数各3分，总计15分；③昏迷，脑卒中指数为6分。

2.3 小鼠脑缺血再灌注模型 取小鼠雄性60只，随机均分成6组，实验组与阳性对照组分组与给药剂量同“2.1”，假模型组及模型组尾静脉注射等容量的5%葡萄糖注射液20mL/kg。给药后10min，各组小鼠用乙醚麻醉，分离两侧颈总动脉并结扎，结扎20min后松开，恢复颈总动脉血流，小鼠术后缝合并继续饲养。连续给药3d，每天1次。假模型组只分离双侧颈总动脉而不结扎。末次给药后30min将小鼠处死，取脑，测定MDA的含量及SOD酶活性。[8-10]

3 结果

实验2.1：TanⅡA注射乳剂7.8、3.9mg/kg可以显著延长小鼠断头后的存活时间，增加喘气次数，与空白对照组比较差异显著（P＜0.05，P＜0.01）。

实验2.2：小鼠脑卒中后脑卒中指数明显增加；TanⅡA预防给药后，小鼠脑卒中指数明显降低，丹参酮各剂量组脑卒中指数与模型组比较差异均有显著性（P＜0.05，P＜0.01）。

实验2.3：小鼠在脑缺血再灌注后，脑组织SOD活性明显下降，MDA含量显著升高，模型组与假手术组比较差异显著（P＜0.01）。与模型组比较，TanⅡA注射乳剂7.8、3.9mg/kg的脑组织SOD活性显著上升（P＜0.05，P＜0.01），MDA 含量极显著下降（P＜0.01）。

4 讨论

自由基损伤也是防治脑缺血再灌注损伤的机理之一。MDA是自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的产物，它的含量反映氧自由基的水平及脂质过氧化的程度。此外，MDA可与核酸及蛋白质发生交联，使之受损。因此，MDA不仅是细胞损伤的代谢产物，而且也是导致细胞损伤的机制之一。SOD酶可以催化超氧自由基发生岐化反应，能够清除氧自由基，保护生物膜免受自由基的攻击损害。

本次试验结果可见，TanⅡA注射乳剂对脑缺血及脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，该作用的产生可能与其抑制脂质过氧化反应有关。

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Protective effects of TanⅡA emulsion against cerebral ischemia in mice

Zhao Min
(Shangqiu City First People's Hospital,Henan,476000)

ObJective To investigate TanⅡ A brain inJury,cerebral ischemia or cerebral ischemia-reperfusion in mice induced protection.Methods decapitated mice model of stroke model in mice,mice with cerebral ischemia-reperfusion model was TanⅡA inJectable emulsion survival time of mice after decapitation,breathing frequency,neural behaviors mice after stroke,the small cerebral ischemia brain SOD activity,MDA content after reperfusion.Results TanⅡA inJectable emulsion can prolong the survival time of mice after decapitation,and increase the number of breath after decapitation,improve neurobehavioral stroke in mice,increased SOD activity,decreased MDA content.Conclusion TanⅡA emulsion inJection of mice with cerebral ischemia and cerebral ischemia-reperfusion inJury in rats.

TanⅡA；cerebral ischemia；cerebral ischemia-reperfusion

R285

B

作者单位：476000河南省商丘市第一人民医院药剂科