腺病毒转染与蛋白负载在促进树突状细胞成熟中的作用对比
2014-12-03崔慧霞张文陆
崔慧霞,张文陆
(辽宁医学院1.护理学院基护教研室;2.附属第一医院综合八病区,辽宁 锦州 121001)
肿瘤生物治疗已成为继手术、放疗、化疗后的第四大治疗模式。其中,树突状细胞(dendritic cell,DC)是肿瘤生物治疗研究的热点。DC是功能最强的专职性抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC),可将抗原信息以主要组织相容性复合体(major histocompability complex,MHC)-抗原肽复合体的形式提呈给初始T淋巴细胞,从而诱导其成为特异性的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL),因此DC是机体免疫反应的始动者[1]。不成熟的DC抗原提呈能力较弱,成熟的DC才具有强大的抗原提呈能力。因此,在体外诱导培养的DC中常加入某些刺激剂以促进其成熟。为了促进DC对特异性抗原的提呈,在培养的过程中常加入抗原蛋白或编码蛋白的腺病毒,而这2种刺激剂中的哪一种更能促进DC的成熟,已有文献说法不一,故本研究拟比较腺病毒转染和蛋白负载在促进DC成熟中的作用。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
新鲜外周血来源于健康志愿者;表达人乳腺珠蛋白(mammaglobin&x100ccf;A,MGBA)的重组腺病毒Ad&x100ccf;MGBA和空腺病毒Ad&x100ccf;null为本研究室构建;人重组乳腺珠蛋白购自台湾Abnova公司;重组人粒单核细胞集落刺激因子(granulocyte&x100ccf;macrophage colony&x100ccf;stimulating factor,GM&x100ccf;CSF)、重组人肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor&x100ccf;α,TNF&x100ccf;α)、重组人白细胞介素4(interleukin&x100ccf;4,IL&x100ccf;4)均购自厦门特宝公司;淋巴细胞分离液购自天津灏洋生物技术有限公司;IL&x100ccf;12p70ELISA检测试剂盒购自达科为生物科技有限公司;藻红蛋白(phycoerethrin,PE)标记的鼠抗人CD80、别藻青蛋白(allophycocyanin,APC)标记的鼠抗人CD83、异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的鼠抗人CD86及相应的同型对照抗体均购自美国BD公司。
1.2 方法
1.2.1 DC的培养及……
