朱梅（荆州市传染病（胸科）医院麻醉科，湖北 荆州434000）

万绍华（长江大学医学院，湖北 荆州434023）

肺缺血再灌注损伤常见于肺移植、体外循环、肺动脉切除重建、失血性休克等，炎性反应在肺缺血再灌注损伤中起重要作用［1］。丙泊酚是常用的镇静催眠药、麻醉药，在临床上被广泛应用于各种麻醉。研究表明，丙泊酚可影响多种细胞因子和炎症反应通路，具有抗氧自由基、抗脂质过氧化反应的功能及减轻炎症反应的作用［2］。本实验通过观察丙泊酚对肺组织中炎性介质和脂质过氧化的变化，进一步探讨丙泊酚对肺缺血再灌注损伤炎性反应的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

健康雄性SD大鼠30只，体质量210～280g，由长江大学医学院实验动物中心提供。丙泊酚注射液由AstraZeneca公司提供。肿瘤坏死因子－α（TNF－α）、IL－6、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）测定试剂盒购自博士德公司。722型光栅分光光度计。

1.2 方法

1.2.1 模型建立 依照文献［3］，3%戊巴比妥钠25mg／kg腹腔注射麻醉，气管切开插管后接小动物呼吸机，通气频率60～70次／min，潮气量10ml／kg，呼吸比2∶1。持续心电监测。于左第5肋间左前侧开胸，暴露左肺门，肝素2mg／kg腹腔注射，5min后，用微血管夹夹闭左肺门，同时潮气量减少1／3。缺血90min后开放，恢复原潮气量，再灌注2h后处死动物，提取肺泡灌洗液（BALF），留取左肺组织标本。

1.2.2 动物分组 随机将实验大鼠分为3组，每组10只。假手术对照组（A组）：左肺门游离后不夹闭；肺缺血再灌注组（B组）：夹闭左肺门90min后开放，机械通气2h；丙泊酚预处理组（C组）：左肺门夹闭前20min，经尾静脉注射丙泊酚20mg／kg。肺缺血再灌注组给予同体积的生理盐水。

1.2.3 指标测定 采用酶联免疫吸附（ELISA）测定BALF中的TNF－α、IL－6的含量；选取部分肺组织置于玻璃匀浆器制备肺组织匀浆，采用722型光栅分光光度计测定SOD、MDA含量。剩下肺组织称重，80℃下烘干24h再称其重量，两者之比为肺组织湿干质量比（W／D）。

1.3 统计学分析

计量资料以（±s）表示，两样本均数比较采用t检验。P＜0.05代表差异有统计学意义。

2 结果

与假手术组（A组）比较，肺缺血再灌注组（B组）BALF中TNF－α、IL－6和肺组织 W／D均增高，SOD含量明显下降，MDA含量明显上升，差异均有统计学意义（P＜0.01）。给予丙泊酚预处理（C组），与肺缺血再灌注组相比，BALF中TNF－α、IL－6和肺组织 W／D均降低，肺组织SOD含量明显升高，MDA含量明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 各组大鼠BALF中TNF－α、IL－6以及肺组织W／D、SOD和MDA的比较

3 讨论

研究表明，在肺缺血再灌注损伤中，细胞因子等炎性介质的异常释放是重要环节［4］。TNF－α和IL－6的作用极为重要，TNF－α是主要炎性介质，IL－6是由单核巨噬细胞分泌的多效应细胞因子，它能引起其他炎性介质如TNF－α等进一步释放，加重全身性炎症反应。本研究观察到肺缺血再灌注组BALF中TNF－α、IL－6较假手术组增高，也表明再灌注期间炎性反应增强。

目前认为肺缺血再灌注损伤与血管内皮细胞功能的失调密切有关，表现为损伤后血管通透性增加［4］。肺W／D用来评价肺水含量，其增高反映血管通透性的增加。本研究发现肺缺血再灌注损伤和丙泊酚预处理组肺W／D明显增高，亦表明再灌注期间肺血管损伤后通透性增加，肺水肿加重。

在缺血和再灌注时，机体或细胞内自由基的产生和抗氧化防御之间严重失衡，导致活性氧在机体或细胞内蓄积而引起细胞毒性反应，从而导致组织损伤的过程［5］。本研究观察到再灌注后肺组织SOD含量明显下降，MDA含量明显上升，与文献［2］一致。表明缺血再灌注后肺组织内氧自由基的产生与清除的动态平衡遭到破坏，进而破坏肺内皮细胞及细胞器膜结构和功能，最终引起肺水肿、出血、渗出等损害。

本研究观察到，丙泊酚能够降低再灌大鼠BALF中TNF－α、IL－6含量和肺组织W／D比值，提高肺组织中SOD水平，降低MDA含量，表明丙泊酚能够减轻缺血再灌注损伤后的炎性反应，发挥对缺血再灌注后肺损伤的保护作用。有研究表明，丙泊酚可调节FMLP受体而抑制细胞内钙离子浓度增加，也可直接抑制电压依赖性钙离子通道或内质网储备的钙离子释放［6－7］。目前普遍认为丙泊酚具有抗自由基、抑制脂质过氧化反应的作用，降低自由基损害，丙泊酚可能通过抗击脑缺血再灌注后自由基损伤而起到保护作用。还有实验证明丙泊酚能抑制缺血再灌注后神经元凋亡，阻止延迟性神经元死亡［8］。此外，丙泊酚的大豆油溶剂－长链甘油三酯（LCT）也可参与丙泊酚的抑制作用，LCT可能利用其脂溶特性，直接与膜NADPH结合，延迟NADPH氧化酶复合物形成，抑制黏附、吞噬作用和呼吸爆发［9］。

综上所述，缺血再灌注肺损伤实质是一种炎症损伤。丙泊酚主要通过抑制缺血再灌注过程中TNF－α、IL－6等炎性介质的释放，减轻肺血管损伤，降低肺毛细血管的通透性，降低脂质过氧化水平，减轻炎症反应及肺水肿，从而对肺缺血再灌注产生保护作用。

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［5］Konishi T.Brain oxidative stress as basic target of antioxidant traditional oriental medicines［J］.Neurochem Res，2009，34（4）：711－716.

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［8］Kodaka M，Mori T，Tanaka K，et al.Depressive effects of propofol on apoptotic injury and delayed neuronal death after forebrain ischemia in the ratcomparison with nitrous oxide－oxygen－isoflurane［J］.Masui，2000，49：130－138.

［9］Heine J，Jaeger K，Osthaus A，et al.Anaesthesia w ith propofol decreases FMLP－induced neutrophil respiratory burst but not phagocytosis compared with isoflurane［J］.Br J Anaesth，2000，85（3）：424－430.