罗二梅， 张家文，胡笑轲，唐明乔，宇 丽*

(暨南大学 1.医学院 生物化学系； 2.理工学院 土木工程系， 广东 广州 510632)

研究论文

共培养人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)和兔关节软骨细胞诱导hUC-MSCs分化成软骨细胞

罗二梅1， 张家文1，胡笑轲1，唐明乔2*，宇 丽1*

(暨南大学 1.医学院 生物化学系； 2.理工学院 土木工程系， 广东 广州 510632)

目的探讨兔膝关节软骨细胞和人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的共培养对hUC-MSCs成软骨诱导分化的影响及共培养的最佳比例。方法分离培养hUC-MSCs和兔膝关节软骨细胞并鉴定其特异性。在Transwell体系中，按1∶4，1∶3，1∶2，1∶1，2∶1，3∶1及4∶1 的比例(hUC-MSCs：兔膝关节软骨细胞)共培养。倒置相差显微镜观察细胞的形态与增殖；甲苯胺蓝染色及免疫荧光染色分别检测葡萄糖胺聚糖(GAG)和Ⅱ型胶原(COL2A1)(蛋白水平定性)；并对各组细胞爬片进行GAG、COL2A1定量检测；同时用实时定量荧光PCR(pPCR)检测GAG、COL2A1 mRNA表达，观察共培养前后细胞的基质分泌情况。结果共培养 21 d 后，阳性对照组和实验组细胞甲苯胺蓝染色及免疫荧光反应均呈阳性；GAG、COL2A1含量及mRNA表达量1∶4实验组均要高于其他实验组和阳性对照组。结论hUC-MSCs和兔关节软骨细胞的共培养可明显促进hUC-MSCs向软骨样细胞诱导分化，且最佳共培养比例为1∶4。

Transwell小室；人脐带间充质干细胞；兔膝关节软骨细胞；共培养；成软骨诱导

近年来，细胞生物学和生物材料技术的高速发展使组织工程在软骨缺损修复中的治疗应用成为可能[1]。目前，软骨细胞和间充质干细胞都被认为可用于构造新生软骨组织。但软骨细胞表型不易维持，容易去分化，因此，其临床应用性受到限制。……