陈秀梅，申 斌，李 萌，王桂芹

（吉林农业大学动物科学技术学院，吉林长春 130118）

水产动物对蛋白质的需求实际上就是对必需氨基酸的需求，蛋白质营养平衡实际上是氨基酸的平衡。所谓饲料必需氨基酸的平衡是指饲料中各种必需氨基酸在数量和比例上要同水产动物肌肉或鱼体的数量和比例相符合，一般是指与最佳生产水平的需要量相平衡。目前在鱼粉日益短缺且广泛利用植物蛋白源造成饲料氨基酸不平衡的问题日益突出，对于调控饲料氨基酸的平衡促进鱼体生长已经做了很多工作。 叶元土等（1999）、刘永坚等（2002）、朱选等（2008）分别在草鱼及南美白对虾饲料中添加晶体或包膜氨基酸，显著促进了鱼虾的生长，改善其适口性，提高对蛋白质的利用率，同时可适当降低饲料蛋白质水平。为了更加明确可量化的饲料必需氨基酸平衡程度和鱼类生长的对应关系，本试验以框镜鲤肌肉必需氨基酸的组成和含量为参比，用灰度关联分析来量化饲料和鱼体必需氨基酸的平衡程度，探讨植物蛋白质为主要蛋白源的框镜鲤饲料中按比例添加赖氨酸和蛋氨酸对其生长和体成分的影响，为其生产上的应用提供科学的理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验饲料 本试验选用鱼粉为主要蛋白源，以鱼油、大豆油、糊精和面粉为能源、纤维素为填充物配制的半精制日粮为对照组，蛋白质含量为33%，各试验组以混合植物蛋白质为蛋白源，分别添加不同水平的微囊蛋氨酸和微囊赖氨酸 （均购自北京市星火元科技有限公司，含量各为50%），配成等氮（31%粗蛋白质）等能（17 MJ/kg）的不同氨基酸平衡程度（0.7649、0.7048、0.7220、0.7370、0.7591、0.7780、0.8008）的六种饲料。 采用灰色关联分析法计算必需氨基酸 （EAA）（苏氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸+胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸、赖氨酸、组氨酸、色氨酸和精氨酸）的平衡关联度，即饲料中10种EAA的模式与鱼体所需的10种EAA模式的接近程度，其中框镜鲤对10种EAA需要量以实测的框镜鲤肌肉EAA组成为依据，饲料原料的10种EAA的组成亦为实测数据（杨元昊等，1999）。

饲料原料经粉碎过60目筛，按配方称重、均匀混合，挤压成直径为1.5 mm颗粒，晒干后置于-4℃保存、备用。饲料配方及营养水平见表1。

1.2 饲养管理 在试验前2周，挑选规格整齐的框镜鲤鱼种1000尾置于网箱中进行驯养，全部摄食配合饲料。试验开始前停食24 h，从驯养鱼中随机取鱼放置在室内水族箱中（80 cm×60 cm×50 cm），每种饲料 3个重复，每个重复放养30尾鱼，持续饲养8周，试验期间记录死鱼并称重。在试验结束前停食24 h，每个重复称重，并从中随机取5尾鱼的白肌，-20℃保存，用于营养成分测定。

1.3 测定指标

表1 试验饲料组成及营养水平（干物质基础）

1.3.1 生长性能指标

平均增重率/%=100×（Wt－W0＋Wd）/W0；

式中：W0和 Wt为试验初始和试验结束时的鱼体总质量，g；Wd为死鱼的总质量，g。

生长离散/%=100×S/X；

式中：S为体重标准差；X为平均鱼体质量。

脏体比/%=（Wv/W）×100；

式中：Wv为内脏质量，g；W为每尾鱼的体质量，g。

肥满度/（g/cm3）=（W/L3）×100；

式中：W为每尾鱼的体质量，g；L为每尾鱼的体长，cm。

1.3.2 营养成分测定方法 水分测定采用105℃恒温烘干失水法（GB/T 6435-1994），粗蛋白质测定采用微量凯氏定氮法（GB/T 6432-1994），粗灰分测定采用550℃灼烧法 （GB/T 6438-1992），粗脂肪测定采用索氏抽提法 （GB/T 6433-1994），能量测定选用弹式热量计，氨基酸含量测定选用氨基酸分析仪。

1.4 数据处理 采用SPSS 16.0软件进行单因素方差分析，用Duncan’s多重比较分析组间差异显著性程度。试验数据均以“平均值±标准差”表示。

2 结果

2.1 饲料氨基酸平衡程度对框镜鲤生长的影响由表2可知，随着饲料中赖氨酸和蛋氨酸的添加，饲料必需氨基酸平衡关联度对框镜鲤末重、平均增重率和特定生长率有相同的影响趋势。当饲料必需氨基酸平衡关联度增加到0.7591（4组）时，1、2、3组平均增重率分别提高 35.86%、31.76%、19.67%（P ＜ 0.05），较对照组降低12.68%（P＜0.05），随着饲料必需氨基酸平衡关联度继续增加至 0.7780（5组）和 0.8008（6组）时，末重与对照组均无显著差异，但都显著高于其他各试验组（P＜0.05）。

表2 饲料氨基酸平衡程度对框镜鲤生长性能的影响

随着饲料氨基酸平衡程度的增大，各试验组生长离散程度显著降低（P＜0.05），当饲料氨基酸平衡关联度为0.7370（3组）时，生长离散显著高于饲料氨基酸平衡关联度为0.7048（1组），当增大到0.7591（4组）时，生长离散显著降低且降低3.25%，继续升高，则差异不显著，且与对照组差异不显著。各试验组及与对照组间的肥满度和脏体比差异不显著。

2.2 饲料氨基酸平衡程度对框镜鲤白肌营养成分的影响 由表3可见，随着饲料中赖氨酸和蛋氨酸的添加，饲料必需氨基酸平衡关联度对框镜鲤白肌水分和灰分无显著影响（P＞0.05）。随着饲料氨基酸平衡程度的增大，各试组白肌蛋白质有增加的趋势，当饲料氨基酸平衡关联度为0.7780（5组）和0.8008（6组）时，蛋白质较对照组提高了3.00%和3.06%（P＜0.05）。

表3 饲料氨基酸平衡程度对框镜鲤白肌常规营养成分的影响 %

随着饲料氨基酸平衡程度的增大，白肌脂肪有显著降低的趋势。当饲料氨基酸平衡关联度增加到0.7370（3组）时，白肌脂肪显著增加，当饲料氨基酸平衡关联度继续增加，各组间白肌脂肪及与对照组均无显著差异。

由表4可知，随着饲料中赖氨酸和蛋氨酸的添加，饲料必需氨基酸平衡关联度对框镜鲤白肌赖氨酸和必需氨基酸有显著影响（P＜0.05），但其他必需氨基酸无显著差异。

随着饲料氨基酸平衡程度的增大，各试验组白肌赖氨酸有增加的趋势，但差异不显著。

3 讨论

3.1 饲料氨基酸平衡程度对框镜鲤生长的影响饲料中不同种类的氨基酸与鱼体氨基酸组成比例越接近，鱼类利用氨基酸的效率就越高，越有利于鱼体的生长。本试验以框镜鲤肌肉的必需氨基酸的组成比例和含量为参照，通过灰度关联分析，按照满足两个限制性氨基酸，按比例梯度降低进行添加，量化必需氨基酸的平衡程度，同时考虑两个半必需氨基酸的含量和比例，结果随着平衡关联度的增大，鱼类显著增长，同时高于高蛋白的对照组，表明这种量化是可行的，生产上可推广使用。有研究证明，无鱼粉饲料氨基酸的平衡能促进鱼类的生长。林香信等（2012）运用氨基酸的平衡性调整无鱼粉饲料配方，提高罗非鱼的生长性能。叶元土等（1999）在草鱼饲料中使用多种饲料原料的合理配比或者在饲料中添加晶体氨基酸，使得饲料氨基酸的组成更趋平衡，从而促进鱼类的生长。于海瑞（2012）在罗非鱼实用饲料中添加蛋氨酸和赖氨酸。王吉桥等（2010）在以不同比例的玉米蛋白、棉籽粕和豆粕为蛋白源的花鱼骨饲料中添加赖氨酸、蛋氨酸和精氨酸，使得饲料的氨基酸平衡，促进鱼类的生长。谭芳芳等（2010）、王爱民等（2006）分别在草鱼和异育银鲫饲料中补充微囊赖氨酸和蛋氨酸均证明这一点。

表4 饲料氨基酸平衡程度对框镜鲤肌肉中必需氨基酸含量的影响 %

3.2 饲料氨基酸平衡程度对框镜鲤白肌营养成分的影响 鱼体的营养组成反映鱼类的营养水平和生理状态。鱼体的营养组成相对恒定，但亦随着饲料营养水平、食物组成等的变化而变化。在饲料中添加赖氨酸和蛋氨酸，随着饲料氨基酸平衡程度的增大，各试验组白肌蛋白质有增加的趋势，当饲料氨基酸平衡关联度为0.7780（5组）和0.8008（6组）时，框镜鲤的蛋白质显著高于对照组。表明饲料氨基酸越平衡，蛋白质沉积越好。朱选等（2009）在罗非鱼饲料中添加赖氨酸及蛋氨酸，沈晓芝等（2007）、刘永坚等（2002）分别在鲤鱼和草鱼饲料中添加外源蛋氨酸或赖氨酸，都能够提高鱼肌肉中粗蛋白质含量。但亦有Alaml等（2005）在日本对虾日粮中同时补充赖氨酸和蛋氨酸、Meng和 Robinson（1998）在斑点叉尾的饲料中添加蛋氨酸却没有影响肌肉蛋白质含量。可见氨基酸的添加要量化为平衡的程度才可比较。本试验各试验组随着饲料氨基酸平衡程度的增大，白肌脂肪有显著降低的趋势，当饲料氨基酸平衡关联度增加到0.7370（3组）时，白肌脂肪显著降低，表明平衡的氨基酸更多的用于蛋白质的沉积。Alaml和Teshima（2005）在日本对虾日粮中同时补充赖氨酸及蛋氨酸亦发现对虾脂肪有显著性下降的变化。

本试验对鱼肌肉中氨基酸组成的分析表明，当饲料必需氨基酸平衡关联度增加到0.7370（3组）时，框镜鲤的白肌赖氨酸和必需氨基酸显著增加且与对照组差异不显著。Tarik等（2006）在大西洋鲑饲料中添加赖氨酸可显著增加肌肉蛋白中赖氨酸的含量。同样Hellandl和Barbara（2006）在大西洋比目鱼饲粮中以谷朊粉替代不同质量比例鱼粉，发现配方氨基酸组成的改变会直接影响全鱼蛋白的某些氨基酸组成比例。也可能与饲粮氨基酸变化范围有关，Hellandl和 Barbara （2006）发现，在配方中以谷朊粉部分替代鱼粉，当赖氨酸质量分数从4.0降低到3.6，大西洋比目鱼的全鱼赖氨酸含量下降，但低剂量补充外源氨基酸不会对鱼体相应氨基酸产生明显影响。本试验当饲料中添加赖氨酸和蛋氨酸调节必需氨基酸的平衡关联度为0.7591时，赖氨酸和必需氨基酸才显著增加，所以，在本试验条件下，可适当降低饲料的蛋白含量，降低饲料成本。

4 结论

以植物蛋白质为主要蛋白源的框镜鲤配合饲料，按比例添加赖氨酸和蛋氨酸，以鱼体肌肉必需氨基酸的组成和比例为标准，采用灰色关联分析法计算饲料中10种EAA的模式与鱼体所需的10种EAA模式（组成和比例）的接近程度。在本试验的条件下，当饲料必需氨基酸的平衡关联度为0.7591时，框镜鲤生长率提高35.86%，生长离散降低3.25%，饲料粗蛋白质含量可降低1.56%，降低饲料成本，可在生产中应用和推广。

[1]村井武四.氨基酸平衡对鲤鱼种饲料利用率的影响 [J].水利渔业，1988，5：26 ～ 30.

[2]林香信，陆鹏，颜孙安，等.无鱼粉蛋白饲料氨基酸平衡对罗非鱼生长的影响[J].农学学报，2012，2（5）：62 ～ 66.

[3]刘永坚，田丽霞，刘栋辉，等.实用饲料补充结晶或包膜赖氨酸对草鱼生长、血清游离氨基酸和肌肉蛋白质合成率的影响[J].水产学报，2002，26（3）：253～259.

[4]沈晓芝，周洪琪，华雪铭，等.羟基蛋氨酸钙对鲤生长性能和白肌营养组成的影响[J].上海水产大学学报，2007，16（2）：118 ～ 123.

[5]谭芳芳，叶元土，肖顺应，等.补充微囊赖氨酸和蛋氨酸对草鱼生长性能的影响[J].动物营养学报，2010，22（3）：804 ～ 810.

[6]王爱民，李朝霞，吕林兰，等.氨基酸平衡模式在异育银鲫饲料中的应用研究[J].饲料工业，2006，27（16）：24 ～ 29.

[7]王吉桥，程爱香，闰有利，等.混合植物蛋白添加晶体氨基酸替代鱼粉的饲料对花鲭鱼种生长和免疫指标的影响[J].水产学杂志，2010，2（1）：15～23.

[8]杨元昊，邢西谋，罗晓川.渔用饲料中必需氯基酸平衡效果的微机方法研究[J].淡水渔业，I999，29（6）：7 ～ 8.

[9]叶元土，林仕梅，罗莉，等.饲料必需氯基酸平衡效果对草鱼生长的影响[J].饲料工业，1999，20（3）：39 ～ 41.

[10]于海瑞，张琴，姜燕，等.饲料中补充赖氨酸和蛋氨酸对罗非鱼生长和消化率的影响[J].渔业科学进展，2012，33（4）：114 ～ 120.

[11]朱选，曹俊明，蓝汉冰，等.日粮添加不同形式赖氨酸对南美白对虾生长及肌肉成分影响的研究[J].饲料工业，2008，2（4）：16 ～ 18.

[12]朱选，曹傻明，许丰孟，等.饲料中添加赖氨酸及蛋氨酸对罗非鱼生长的影响[J].食品与生物技术学报，2009，28：466 ～ 473.

[13]Alam M S，Teshima S.Supplemental effects of coated methionine and/or lysine to soy protein isolate diet for juvenile kuruma shrimp Marsupenaeus japonicus[J].Aquaculture，2005，248（1～4）：13 ～ 19.

[14]Hauler R C，Carter C G.Reevaluation of the quantitative dietary lysine requirements of fish[J].Reviews in Fisheries Science，2001，9（3）：l33 ～ 163.

[15]Hellandl S J，Barbara G H.Replacement of fish meal with wheat gluten in diets for Atlantic halibut （Hippoglossus hippoglossus）：Effect on whole body amino acid concentrations[J].Aquaculture，2006，261（1）：1363 ～ 1370.

[16]Meng H L，Robinson E H.Effects of supplemental lysine and methionine in low protein diets on weight gain and body composition of young channel catfish Ictalurus punctatus[J].Aquaculture，1998，163（1）：297 ～ 307.

[17]Tarik A，Muriel M，Wilfried O.Protein and lysine requirements for maintenance and for tissue accretion in Atlantic Salmon（Salmo salar）fry[J].Aquaculture，2006，261（1）：369 ～ 383.■