董春玲

（秦皇岛市海港区动物卫生监督所，河北秦皇岛066000）

羊在整个生长发育过程中都不断受到寄生虫病的侵袭。寄生虫不仅消耗羊的营养，降低羊对饲料的利用，提高养殖成本，降低饲料报酬等，引起的经济损失是其他任何疾病不能相比的，而且还会降低其产品的品质，影响羊的体质为其他的疾病打开门户，严重时甚至引起羊只死亡，给养殖户造成重大的经济损失，极大的制约了养羊业的发展和农户养羊的积极性。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物

海港区某羊场波尔山羊100只。

1.1.2 试验仪器

载玻片、盖玻片、小木棒、烧杯、铜筛或多层纱布、胶头滴管、显微镜、铁丝环、网兜、虫卵计数器、培养皿、测微器、300毫升容量瓶、离心机、离心管、塑料袋。

1.1.3 试剂

50%甘油水、饱和硫酸锌溶液（100毫升水中加入硫酸锌33克）、饱和食盐水（100毫升沸水中加入38克食盐，使其溶解，以纱布过滤冷却后，如有结晶析出即成饱和溶液）、卢戈氏碘液、明矾苏木素（有甲乙二液合成：甲液以苏木素1.0克，无水乙醇12毫升配成；乙液以明矾1.0溶于240毫升蒸馏水内，使用前以甲液2～3滴加入乙液数毫升中即可）、石炭酸复红染色液（碱性复红4克、95%酒精20毫升、苯酚8毫升、蒸馏水100毫升）、甲醛、木炭末、1.6%氢氧化钠溶液。

1.2 方法

1.2.1 粪便检查法

1.2.1.1 粪便的采集

清晨采集新鲜羊粪便，1份/羊，放于塑料袋中，编号后带回实验室检查。

1.2.1.2 直接涂片法

首先在载玻片上加50%甘油水数滴，再以小木棒取新鲜粪便少许，与玻片上的甘油水混合均匀，去掉大块粉渣，将粪便涂成薄膜，其厚度以能透视书报上的字迹为度，然后加盖玻片，置显微镜下检查，检查时应顺序地查遍盖玻片下所有部分。检查中发现有虫卵数量不多的，因此每份粪样作了3～5片进行检查。

1.2.1.3 漂浮法

利用比重大于虫卵的饱和硫酸锌溶液与粪混匀，铜筛过滤，用吸管吸取滤液于两个离心管中，平衡后离心，1500转/分钟，离心5分钟。然后用铁丝环沾取上层液面镜检。

1.2.1.4 沉淀法

利用虫卵比重大于水的特性，取10克粪便置于烧杯中，先加少量水，充分搅拌将粪捣成糊状，再加常水适量继续搅拌，通过粪筛滤到另一容器内然后加满常水，静置15分钟，再倾去上清液。如此反复用水洗沉淀数次，直到上层液体透明为止。最后倾去上清液，用胶头滴管吸取沉淀于载玻片上，加盖玻片镜检。检出比重较大的肝片吸虫卵。

1.2.1.5 虫卵计数法一

麦克马斯特氏法，此法先要用载玻片和一个盖玻片做成虫卵计数器，即在盖玻片上刻长宽各1厘米的方格，再在大方格内刻100个小方格，载玻片与盖玻片间填上1.5毫米厚的玻条，并以粘合剂粘合。计数时取粪便2克置研钵中，先加入10毫升水，搅匀，再加饱和食盐水50毫升，混匀后立即吸取粪液充满计数室，静置2分钟，镜检记录计数室的虫卵数。虫卵数乘以200即为每克粪便中虫卵数。该法适用于线虫。

1.2.1.6 虫卵计数法二

片形吸虫虫卵计数法，称取羊粪10克，置于300毫升的容量瓶中。加入少量1.6%氢氧化钠溶液，静置过夜，次日，将粪块搅碎，再加入1.6%氢氧化钠至300毫升刻度处。再摇匀，立即吸取7.5毫升粪液注入到离心管内，在离心机内以每分钟1000转离心2分钟，倾去上层液体，换加饱和盐水，再次离心后，再倾去上层液体，再换加饱和盐水，如此反复操作，直到上层液体完全清澈为止。倾去上层液体，即将沉渣全部分别滴于数张载玻片上，检查全部的载玻片上的虫卵并计数，以总数乘以4，即为每克粪便中的肝片吸虫虫卵数。

1.2.2 血液检查法

1.2.2.1 血液的采集

采集颈静脉血液，1份/羊，放于装有抗凝剂的试管中，编号后带回实验室检查。

1.2.2.2 血液中蠕虫检查

取新鲜血液一滴于玻片上，覆以盖片在低倍镜下检查。血中幼虫较多时可做推片经明矾苏木素染色后检查。血中幼虫较少可采一大滴，在载玻片上略加涂布，待其自然干燥，使结成一层厚血膜，而后将此玻片反转，血膜面向下，斜浸入一小杯蒸馏水中，待其完全溶血，取出晾干，在浸入甲醛中固定10分钟，晾干后以明矾苏木素染色，待白细胞的核染成深紫色，取出以蒸馏水冲洗2分钟，显微镜下检查。血中幼虫很少时，可采血于离心机中，加入5%醋酸溶液以溶血，待溶血完成后离心，取沉淀渣检查。

1.2.2.3 血液内原虫的检查-鲜血压滴标本检查

将采出的血液滴于载玻片上，加等量生理盐水，混合均匀后，加盖片，立即放低倍显微镜下检查。用于伊氏锥虫和附红细胞体的检查。

1.2.2.4 血液内原虫的检查-涂片染色标本检查

采血，滴于载玻片一端，按常规推制成血片，并使其晾干。滴甲醛2滴于血膜上，使其固定，染色（姬氏染色法取姬氏染色粉0.5克，中性纯甘油25.0毫升，无水中性甲醛25.0毫升。先将姬氏染色粉置研钵中，加少量甘油充分研磨，再加再磨，直到甘油全部加完为止。将其倒入100毫升容量的棕色小口试剂瓶中；在研钵中加少量的甲醛以冲洗甘油染液，冲洗液仍倾入上述瓶中，再加再洗再倾入，直至25毫升甲醛全部用完为止。塞紧瓶口，充分摇匀，而后将瓶置于65℃温箱中24小时，并不断摇动，此即为原液。染色时将原液2.0毫升加到中性蒸馏水100毫升中，即为染液。染液加与血膜上染色30分钟后，用水洗5分钟，晾干，镜检。）用油镜检查。用于泰勒虫等多种寄生虫的检查。

2 结果与分析

2.1 粪便检查

2.1.1 直接涂片法

在显微镜下发现虫卵种类有消化道圆线虫卵，鞭虫卵，感染率分别为82%、18%。

2.1.2 漂浮法

在显微镜下发现虫卵种类有消化道圆线虫卵，鞭虫卵。感染率分别为100%、38%。

消化道圆线虫卵：显微镜下观察三种圆线虫卵两端都无“塞”且在虫卵内都未形成幼虫，虫卵长度大于60微米小于85微米的是捻转胃虫卵，虫卵长度大于90微米且有16～32卵胚细胞，其中略大的是马歇尔线虫虫卵，而略小的是奥斯特线虫卵。

鞭虫卵：显微镜下观察虫卵呈纺锤形黄褐色，大小为50～54×22～23微米，卵壳厚，虫卵两端各有一个“塞”，即为鞭虫卵。

2.1.3 沉淀法

在显微镜下发现虫卵种类有消化道圆线虫卵，鞭虫卵，肝片吸虫卵。感染率分别为100%、38%、25%。

肝片吸虫卵：长椭圆形,大小为130～150微米×63～90微米，黄褐色，有小盖，卵内充满卵黄细胞，卵细胞不易看清。

2.1.4 虫卵计数法（一）-麦克马斯特氏法

在每克粪便中查到有10052个消化道圆线虫卵，感染程度是重度感染。

2.1.5 虫卵计数法（二）-片形吸虫虫卵计数法

在每克粪便中查到有386个肝片吸虫卵，感染程度是轻度感染。

2.2 血液检查

2.2.1 血液中蠕虫检查

在血液中没有查到蠕虫感染。

2.2.2 鲜血压滴标本检查

没有查到伊氏锥虫、查到附红细胞体感染。

2.2.3 血液内原虫的检查-涂片染色标本检查

仅查到有泰勒虫感染，感染率为35%。

以上各种方法的检查，结果汇总见下表。

抽检一百只波尔山羊的寄生虫感染情况

3 讨论

本次调查中证明了该羊场中的波尔山羊体内寄生虫主要为圆线虫，其次为肝片吸虫和鞭虫，其中圆线虫在每克粪便中查到10052个圆线虫卵，属于重度感染，应该给予驱虫，但并没有引起发病，造成羊的死亡，因此还没有造成宏观上的经济损失，但由于寄生虫病是一种慢性、消耗性的疾病，不会在短时间内造成大面积的发病、死亡，只是在消耗体内营养，尤其是影响生长发育、生长缓慢、消瘦、抵抗力下降、降低饲料报酬,造成重大的微观上的经济损失，也是对牧场的羊造成损失比较严重的一个根源。

3.1 在各种检查方法中，各自的优点

3.1.1 在粪便检查法中，直接涂片法的优点就是操作简单、迅速，在短时间内就可以出现结果，缺点是结果不完全且检出率低，通过此法检查到的虫卵有消化道圆线虫卵和鞭虫卵，感染率分别是82%、18%。

3.1.2 沉淀法的优点是检查出来的结果检出率高，缺点是操作复杂，需要很长的时间，通过此法检查到的虫卵有消化道圆线虫卵，鞭虫卵，肝片吸虫卵。感染率分别为100%、38%、25%。

3.1.3 漂浮法只能检查出比重小于所使用的漂浮液，该法的优缺点介于直接涂片法和沉淀法两者之间，要比直接涂片法检出率高，但又没有沉淀法检出的结果完全，通过此法检查到的虫卵有消化道圆线虫卵，鞭虫卵。感染率分别为100%、38%。

3.1.4 虫卵计数法一-麦克马斯特氏法可粗略的推断动物寄生虫感染程度，但有局限性，仅适用于线虫卵的计数。

3.1.5 虫卵计数法二-片形吸虫虫卵计数法用于比重较大的片形吸虫卵，操作时间相对于麦克马斯特氏法要稍长。

3.1.6 血液检查法中，血液中蠕虫检查要根据幼虫的多少运用不同的方法，首先要考虑幼虫较多，其次在考虑较少，最后考虑很少。

3.1.7 血液内原虫的检查-鲜血压滴标本检查操作简单，节省时间，但检查出的结果仅限于伊氏锥虫和附红体细胞，具有局限性。

3.1.8 血液内原虫的检查-涂片染色标本检查，此法中使用的试剂材料较多，时间要长，但检查出来的结果完善。

通过此次调查，大致总结出该地区秋季羊体肥大，粪中虫卵占优势，这预示着羊体内的幼虫变成成虫的数量在陆续增加。主要危害较大的消化道寄生虫：圆线虫和附红细胞体还在威胁着养羊业的发展，仍然未得到有效的控制。

寄生虫病的传播和流行，必须具备传染来源、传播途径和易感动物三个基本环节，切断或控制其中任一个环节，就可以有效地防制某种寄生虫病的发生与流行。此外，寄生虫病的传播和流行，还受到自然因素和社会因素的影响和制约。

3.2 加强寄生虫病防治工作

3.2.1 制订寄生虫病防治的长期规划

根据本次调查的结果和不同寄生虫病的流行程度及其分布特点，应对该地区制订重点寄生虫病防治的长期规划，将把对其前后盘吸虫、华支睾吸虫防治作为重点领域，把对人类健康危害较大的肝吸虫病作为重点防治的寄生虫病，从而保证该地区寄生虫病防治工作有计划、有重点地开展。

3.2.2 大力开展寄生虫病防治知识的宣传

寄生虫病的传播和流行与人们的行为密切相关。有必要通过各种宣传途径和方式，引导和教育群众逐步改变不利于健康的生产、生活习惯和饮食、卫生习惯，特别要加强对中小学生、妇女和农牧民群众的宣传教育工作，提高群众的防病意识和自我保护能力，减轻寄生虫病的危害。

3.2.3 逐步加大该地区寄生虫病防治力度

针对对人类危害较大的，感染率较高的多种寄生虫病的现状，采取有效的干预措施，把寄生虫病防治工作与农业、农村和农民问题紧密联系起来，实施重点寄生虫病综合防治。通过开展重点寄生虫病综合防治项目，逐步压缩流行范围，防止因人员流动和物质交流的频繁而造成寄生虫病的传播。

3.2.4 进一步降低线虫感染率

国内外寄生虫病防治经验证明，采取以药物驱虫为主，结合开展健康教育、改水改厕等综合防治措施，对于消除传染源，降低寄生虫感染率有显著成效。按照“因地制宜、分类指导、科学防治”的原则，在寄生虫感染率较大的重度流行区，每年有计划地开展集体驱虫治疗；在中度感染率的流行区，可采取对重点人群每年进行驱虫治疗的防治策略，进一步降低人群感染率，保障人民群众身体健康。

3.2.5 加强重点寄生虫病防治的应用性科研

建立和完善寄生虫病的监测体系，研究制订重点寄生虫病的防治标准、技术规范和工作方案，使寄生虫病防治工作科学、系统、规范地进行，保证我国寄生虫病防治工作的可持续发展。