胡志苹，黄志华，黄 诚

（赣南医学院基础医学院，江西赣州341000）

α7尼古丁受体（Alpha 7nicotinic receptor，α7nAChR）在抗炎免疫反应中扮演着重要的角色。有实验表明，乙酰胆碱（acetyl choline，ACh）可抑制体外培养的脂多糖刺激引起的巨噬细胞释放 TNF、IL－6、IL－1β及IL－18，刺激迷走神经可抑制大鼠肝脏TNF的合成，降低炎症免疫反应［1］，进一步的实验发现乙酰胆碱是通过与巨噬细胞膜上α7nAChR结合而发挥抑制炎性细胞因子的合成及分泌的作用［2］。小鼠外周血与脾组织的淋巴细胞可表达mAChRs和nAChRs［3］，本实验也发现小鼠免疫细胞上有α7nAChR的表达［4］。以上实验结果提示，α7nAChR可能参与了电针（electroacupuncture，EA）调节免疫功能的作用，但其作用机制不清楚。为此，本研究应用α7nAChR抗体和特异性的α7nAChR拮抗剂α－银环蛇毒（αbungarotoxin，α－Bgt），进一步证实α7nAChR在电针对 NK细胞活性中的作用，旨在为EA的临床应用提供理论基础和参考。

1 材料与方法

1.1 材料 雄性昆明小鼠，体质量18～22g，由江西中医学院实验动物中心提供，自然照明，自由饮水、饮食。实验严格按照赣南医学院医学伦理委员会的相关规定。α－Bgt（T0195）购自Sigma公司；α7nAChR抗体（SC－5544）购自Santa Cruz生物科技有限公司。对小鼠进行分组，每组9只。（1）为检测α7nAChR抗体的作用，实验分6组：对照组、IgG组、α7nAChR抗体组、100Hz EA组、100Hz EA＋IgG和100Hz EA＋α7nAChR抗体组；（2）为检测特异性的α7nAChR拮抗剂α－Bgt的作用，实验分9组：对照组、1.5μg／mL a－Bgt组、3.0μg／mL a－Bgt组、扎针组（needle组）、扎针 ＋1.5μg／mL a－Bgt组、扎针＋3.0μg／mL a－Bgt组、100Hz EA组、100Hz EA＋1.5 μg／mL a－Bgt组和100Hz EA＋3.0μg／mL a－Bgt组。

1.2 方法

1.2.1 EA刺激 分别给予小鼠双后肢的足三里和三阴交插针，并与HANSEA刺激仪相连，对照组于穴位附近扎针后不通电流，处理时间与100Hz EA组相同，刺激强度以0.5、1.0、1.5mA方式递增各刺激10min，共30min，每天1次，连续刺激3d。

1.2.2 脾脏NK细胞杀伤活性检测 靶细胞的制备：细胞培养24h后，1 000r／min，离心时间5min，弃上清液，加入2mL RPMI－1640培养液重悬，用苔盼蓝染色检测细胞活性应大于90%；……