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厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化干预作用

2014-09-17刘中柱潘明阳刘艳姝史为伍牛效清

黑龙江医药科学 2014年2期
关键词:实验模型

刘中柱,潘明阳,刘艳姝,史为伍,牛效清

(佳木斯大学附属第一医院,黑龙江佳木斯154003)

肾间质纤维化的过程包括肾小管的损伤、细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的过多沉积、多个细胞因子参与的复杂过程。TGF-β1致纤维化作用较强,故TGF-β1是预防、治疗肾间质纤维化目标性因子。最近,结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和骨形成蛋白-7(bonemorphogenetic protein-7,BMP-7)作为 TGF-β1致纤维化的重要调节因子而出现。厄贝沙坦目前已广泛用于临床,并起到保护肾功和降低尿蛋白的功效。本实验通过结扎大鼠单侧输尿管建立UUO模型,观察大鼠肾脏的病理变化,免疫组化法检测CTGF和BMP-7的表达,探讨厄贝沙坦的药物作用。

1 材料方法

1.1 主要材料

厄贝沙坦片(赛诺菲(杭州)制药有限公司);兔抗大鼠CTGF多克隆抗体(武汉博士德公司);兔抗大鼠BMP-7多克隆抗体(武汉博士德公司);SABC免疫组化试剂盒(武汉博士德公司);多聚赖氨酸(武汉博士德公司);CX41RF型高级显微镜(日本Olympus公司);切片机(英国姗顿公司);病理图文彩色分析系统(同济千屏影像公司)。

1.2 实验动物分组

雄性Wistar大鼠36只,体重(200±20)g。建立模型:腹部常规碘伏消毒,10%水合氯醛0.4mL/100g经腹腔注射麻醉,麻醉后左侧背部剪毛,碘伏消毒,于左侧背部肋弓处下方0.5cm处切开腹腔,暴露并分离左侧输尿管,结扎肾盂出口处及输尿管上段输尿管,并在结扎中点处离断输尿管,逐层缝合筋膜、肌肉、皮肤。假手术组仅分离不结扎左侧输尿管。治疗组给予厄贝沙坦20mg/kg·d,每日一次。假手术组、模型组每天给予相同剂量的生理盐水。

1.3 标本收集

分别于造模成功后14d和28d,各组分别处死6只大鼠,迅速取出左肾,去包膜固定于10%的中性甲醛中,石蜡包埋并编号,切片机将蜡块切成3μm切片,分别留取HE、MASSON染色和免疫组化标本。……

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