梗阻性黄疸大鼠肾脏水通道蛋白2、内皮素-1表达变化
2014-09-13韩继龙刘金钢
韩继龙 王 勇 刘金钢
(沈阳医学院附属第二医院普外科,辽宁 沈阳 110002)
临床上梗阻性黄疸病人围术期并发症和死亡率明显高于无黄疸者。其突出的并发症和重要的死亡原因就是急性肾衰竭(ARF),发生率达8%~10%,然而死亡率却可高达82%〔1〕。肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)作为目前临床上检测肾功能损害的指标,当它们增高时肾功能已受到严重损害,增加了临床治疗困难〔2,3〕。水通道蛋白(AQP)具有特异性强,功能专一,定位准确等特点,作为肾功能损害早期改变的研究指标是适合的〔4〕。研究发现,虽然肾脏75%的水在肾近曲小管和直小管降段重吸收,但自由水的调节却在集合管〔5〕。所以肾脏水代谢功能受到集合管的AQP表达变化的控制〔6〕,AQP2就位于肾集合管,从而明确AQP2在梗阻性黄疸时表达变化极为重要。在梗阻性黄疸时,ARF的病理过程中,内皮素(ET)-1作为最强烈的血管收缩因子,发挥重要作用,在梗阻性黄疸时,既往实验证实其增加并导致肾功能损害〔7〕。然而它在肾集合管表达有何变化,其表达变化是否对AQP2表达有影响尚未见报道。本实验观察梗阻性黄疸大鼠模型肾集合管AQP2和ET-1表达及相关性。
1 材料与方法
1.1实验动物与分组 雄性Wistar大鼠80只,体重250~300 g,随机分成假手术组和梗死性黄疸(梗黄)组各40只,对应术后时间分为3、5、7、10、14 d组,每组8只。处死实验大鼠对应术后3、5、7、10、14 d,处死前抽血化验直接胆红素(DBIL)、BUN、Cr。肾髓质标本取出后放在液氮中保存,然后再转至-80℃冰箱中冷冻保存。
1.2主要试剂 AQP2一抗(兔抗鼠SA1072)、二抗(羊抗兔SA1076);ET-1一抗(兔抗鼠SA1062)、ET-1二抗(羊抗兔SA1066)及显色剂由武汉博士德生物制剂有限公司提供。……
