大鼠颅脑损伤后ICAM-1在神经细胞中表达谱及其意义
2014-09-13陈为龙朱海超陈志明
刘 刚 李 畅 任 强 陈为龙 朱海超 陈志明
(吉林省公安厅,吉林 长春 130051)
当颅脑损伤发生于老年人时,由于机体修复功能相对较差,死亡率极高。细胞间黏附分子(ICAM)-1在损伤后炎症反应中发挥重要作用,进而参与损伤后组织修复,但其在颅脑损伤后的表达研究在国内外却鲜有报道。本研究探讨ICAM-1表达与颅脑损伤后不同时间的关系。
1 材料与方法
1.1动物分组及模型建立 雄性SD大鼠50只,体重250 g,随机分为正常对照及脑损伤组。颅脑损伤组分别于伤后15、30 min、1、3、6、24、72、96、120 h处死,共计10组。采用改进的Feeney自由落体硬膜外撞击方法。损伤装置由底板、固定支架、垂直导杆、下落击锤和聚乙烯撞击圆锥组成。乙醚麻醉大鼠后,用 10%水合氯醛(0.35 g/kg体重)腹腔内注射麻醉,将大鼠头部固定后,剪去顶部皮毛,消毒皮肤后,沿中线左侧切头皮,分离骨膜,用牙科钻于中线旁2 mm,紧挨冠状 缝后开一直径5 mm的圆形窗,硬膜保持完整。用20 g砝码于30 cm高处通过一金属导杆坠落,用锌汀粉封闭骨窗,缝合头皮,置鼠笼喂养。正常对照组不做任何处理。
1.2苏木素-伊红(HE)染色 脑组织标本用10%甲醛溶液固定48 h,石蜡包埋,5 μm厚连续切片,常规HE染色。
1.3免疫组化染色 采用免疫组织化学SP法对脑组织中ICAM-1进行检测,按试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)说明书操作,用已知阳性的切片做阳性对照,磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗为阴性对照。
1.4统计学方法 应用SPSS3.0软件行方差分析和t检验。
2 结 果
2.1HE染色 挫伤处脑组织周围散在片状出血,脑损伤2 h后,损伤灶周围神经细胞尼氏体溶解消失,并伴有周围间隙增宽,呈脑水肿改变,伤后24 h,神经细胞变性坏死,伤后72 h,出血基本吸收,伤后120 h可见有纤维组织增生。……
