朱保月 苏晓阳 李 敬 杜艳雪 高 珣 张建军

(衡水市哈励逊国际和平医院急诊科，湖北 衡水 053000)

重症急性胰腺炎发病机制较为复杂，发病时并发多系统脏器功能不全是急性重症胰腺炎死亡的主要原因，其中急性肺损伤是最常见的并发症，相当一部分患者迅速发展为急性呼吸窘迫综合征，是重症胰腺炎早期死亡的最主要原因〔1〕。本研究探讨p38抑制剂SB203580在重症胰腺炎大鼠肺损伤中的作用。

1 材料和方法

1.1动物模型制备、分组及标本采集 健康成年清洁级SD大鼠60只，雌雄各半，实验前禁食、水，随机分为假手术组：开腹后翻动胰腺数次，并行空肠造瘘；模型组：暴露十二指肠后，将4%牛磺胆酸钠(1 mg/kg)逆行注入胰胆管，并行空肠造瘘术；抑制剂组：重症胰腺炎造模成功后20 min时经空肠造瘘管注入丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)抑制剂1 mg/kg,夹闭5 min。12 h后取标本进行相关指标检测和病理检查。

1.2Western印迹法 大鼠100 mg肺组织加入裂解液匀浆，冰上碾磨匀浆后，12 000 r/min离心10 min取上清，BCA法蛋白定量，取蛋白样品50 μg，电泳后转膜，5%的脱脂奶粉封闭1 h，β-actin、p38、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、基质金属蛋白酶(MMP)9和环氧合酶(COX)-2抗体(均购自美国Santa Cruz公司)稀释液孵育(1∶200)，4℃过夜，TBST洗膜，5%的牛奶稀释的辣根过氧化物酶标记的兔抗羊二抗，洗膜后，按照ECL说明书，1∶1配置发光工作液，凝胶成像仪成像，Image J软件进行灰度分析。

1.3HE染色 组织石蜡切片二甲苯脱蜡，梯度乙醇处理后苏木精液染色，75%盐酸酒精分化30 s，酸化伊红乙醇染色，梯度乙醇处理，二甲苯透明2 min×3次，中性树胶封固后恒温箱烘烤过夜，镜下观察。……