唐泽波 温 娜 金 宏 刘兴吉 齐 玲 于洪泉

(吉林医药学院后勤管理处,吉林 吉林 132013)

恶性胶质瘤在采用手术、放疗和化疗等治疗方法后，患者术后生命仍然不超过1年〔1〕。目前尚缺乏满意的治疗手段。五味子为木兰科五味子的干燥成熟果实，有效成分为木脂素、多糖和挥发油等。五味子多糖(CPSC)是从五味子成熟干燥果实中提取的含有五味子总多糖、17种以上氨基酸和16种以上微量元素的混合物。王艳杰等〔2〕鉴定出CPSC中含有鼠李糖(1.69%)、阿拉伯糖(1.78%)、葡萄糖(79.47%)、半乳糖(10.48%)等单糖成分，并推测CPSC中可能还含有甘露糖(1%)和岩藻糖(5.59%)。研究表明CPSC具有抗肿瘤活性〔3～7〕，但其具体的抗肿瘤作用机制尚不清楚。本文前期研究发现CPSC可以抑制脑胶质瘤细胞的生长〔8〕。本文进一步研究CPSC对体外培养裸鼠脑胶质瘤细胞生长的作用。

1 材料与方法

1.1主要试剂 裸鼠脑胶质瘤细胞本实验室提取，细胞培养基RPMI-1640 (Thermo公司)，小牛血清(Gibco公司)，CPSC(北华大学提供)，胰蛋白酶(Gibco公司)，四甲基偶氮唑(MTT)(Sigma公司)，二甲基亚砜(DMSO)(Thermo公司)。

1.2提取原代裸鼠胶质瘤细胞 留取新鲜的裸鼠脑肿瘤组织，用冷PBS冲洗后将组织剪成碎块，置于10 ml离心管中，并加入木瓜蛋白酶放于37℃培养箱中消化30 min，吸取上清液，加血清终止消化，以300 r/min离心5 min后弃上清，加培养液反复吹打，过滤后以300 r/min速度离心5 min，离心弃上清，加入含10%血清培养液培养，台盼蓝计数活细胞，以2×106/75 cm2密度将细胞接种于培养瓶中，37℃、5%CO2及饱和湿度下培养12 h待用。

1.3MTT法检测CPSC对裸鼠脑胶质瘤细胞生长的影响 将CPSC用85%乙醇溶解后，取适量液体加入含5%小牛血清RPMI-1640细胞培养液，配制成终浓度为200、400、800 μg/ml的药物。……