衰老诱导大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa通道β1亚基功能下调
2014-09-13石丽君刘佰林刘雨佳
石丽君 刘佰林 刘雨佳 陈 渝
(北京体育大学运动生理教研室,北京 100084)
肠系膜动脉是主要的外周阻力血管,是局部血流量和血压的重要调控部位。除神经和体液调节外,动脉平滑肌上的钾离子通道对血管舒缩调节亦发挥重要作用,其中,由于大电导钙激活钾通道(BKCa)表达密度高且电导大,因此在血管张力的负反馈调节中发挥决定性作用〔1,2〕。有研究报道,增龄可导致某些血管平滑肌BKCa通道功能和表达下降,如在大鼠和人的冠状动脉,BKCa通道α亚基蛋白表达下降〔3,4〕,且在转录水平发现β1亚基与α亚基表达平行下降;但是脑动脉平滑肌细胞BKCa通道表达无显著性变化〔5〕。提示增龄对血管平滑肌细胞BKCa通道的影响是组织特异性的。然而,衰老对大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa通道的电生理特性有何影响报道极少。本研究采用膜片钳技术探讨衰老对大鼠肠系膜动脉血管平滑肌BKCa通道生物物理特性的影响。
1 材料与方法
1.1实验动物与分组 2月龄健康雄性Wistar大鼠购自北京维通利华实验技术有限公司,分别饲养至4~5月龄(青年组,n=6)和22~24月龄(老年组,n=6)。大鼠分笼饲养,老年大鼠每笼1只,青年大鼠每笼3~5只,国家标准啮齿类动物饲料喂养,自由饮食,温度维持在22℃~24℃,相对湿度40%~60%,按照昼夜节律人工控制光照。
1.2药物及溶液配制 牛血清蛋白 (BSA)、I型胶原酶 (type I-S collagenase)、木瓜蛋白酶 (Papain)、F型胶原酶 (type F collagenase)、二硫苏糖醇 (DDT)、乙二胺四乙酸(EGTA)、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)均购自美国Sigma公司,其余为国产分析纯试剂。
分离平滑肌细胞缓冲液Ⅰ(mmol/L):NaCl 137,KCl 5.6,MgCl21.0,葡萄糖10.0,HEPES 10.0,硝普钠0.03,用NaOH调pH值至7.4。……
